【摘要】：目的本實驗通過構建THP-1源性泡沫細胞模型，探討Ang-（1-7）和腺苷酸環(huán)化酶的抑制劑MDL對THP-1源性泡沫細胞膽固醇逆轉運相關蛋白ABCA1表達和膽固醇含量的影響。進一步闡明Ang-（1-7）抑制動脈粥樣硬化形成的機制。 方法培養(yǎng)THP-1源性單核細胞，用佛波酯（PMA）（160 nmol/L）誘導為巨噬細胞，加入終濃度為50 mg/L的ox-LDL建立泡沫細胞模型。實驗分為4組，A組：正常泡沫細胞組；B組：腺苷酸環(huán)化酶抑制劑MDL組（簡稱MDL組）；C組：Ang-（1-7）組；D組：MDL+Ang-（1-7）組。處理24 h后，ELISA法檢測各組細胞cAMP表達水平，實時熒光定量RT-PCR法和Western-blot檢測各組細胞ABCA1 mRNA相對表達量和蛋白含量，閃爍計數(shù)法檢測各組細胞膽固醇流出率，高效液相法檢測各組細胞膽固醇含量。 結果（1）MDL組與泡沫細胞組相比cAMP表達水平、ABCA1mRNA相對表達含量、ABCA1蛋白含量及膽固醇流出率明顯降低（P 0.05），細胞內(nèi)膽固醇含量增高（P 0.05）；Ang-（1-7）組cAMP表達水平、ABCA1mRNA相對表達含量、ABCA1蛋白含量明顯升高（P 0.05），膽固醇流出率增高（P 0.05），膽固醇含量顯著降低（P 0.05）；（2）與Ang-（1-7）組比較，MDL+Ang（-1-7）組cAMP表達水平、ABCA1mRNA相對表達含量、ABCA1蛋白含量明顯降低（P 0.05），膽固醇流出率降低（P 0.05），膽固醇含量增高（P 0.05）。 結論（1）Ang-（1-7）能促進泡沫細胞ABCA1表達增加，增加膽固醇流出率，減少泡沫細胞膽固醇含量，逆轉泡沫細胞的形成。（2）MDL可以抑制腺苷酸環(huán)化酶的活性，減少cAMP的生成，從而部分拮抗Ang-（1-7）的上述作用，但不能完全阻斷Ang-（1-7）的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of Ang- (1-7) and adenylate cyclase inhibitor (MDL) on the expression of cholesterol reverse transporter associated protein (ABCA1) and cholesterol content in THP-1 derived foam cells. To further elucidate the mechanism of Ang- (1-7) inhibiting atherosclerosis. Methods THP-1 derived monocytes were cultured and induced into macrophages by phorbol ester (PMA) (160 nmol/L. The foam cell model was established by adding 50 mg/L ox-LDL. The experiment was divided into 4 groups: normal foam cell group (group B): adenylate cyclase inhibitor MDL group (MDL group) and C group (group C) and D group (group D: MDL Ang- (1-7). After 24 h treatment, cAMP expression was detected by Elisa, relative ABCA1 mRNA expression and protein content were detected by real-time fluorescence quantitative RT-PCR and Western-blot, and cholesterol efflux was detected by scintillation counting. Cholesterol content was detected by HPLC. Results (1) the relative expression of ABCA1 mRNA in MDL group was significantly lower than that in foam cell group. The protein content and cholesterol efflux rate of ABCA1 mRNA in MDL group were significantly lower than those in foam cell group (P 0.05), and the intracellular cholesterol content was increased (P 0.05). In Ang- (1-7) group, the relative expression of ABCA1 mRNA and the protein content of ABCA1 were significantly increased (P0. 05), the cholesterol efflux rate was increased (P0. 05), and the content of cholesterol was significantly decreased (P0. 05). (2) compared with Ang- (1-7) group, the level of cAMP expression in MDL Ang (-1-7) group was significantly lower than that in Ang- (1-7) group. The relative expression of ABCA1 mRNA and ABCA1 protein content in MDL Ang (-1-7) group were significantly lower than those in Ang- (1-7) group. Conclusion (1) Ang- (1-7) can increase the expression of ABCA1, increase the cholesterol efflux rate, decrease the cholesterol content and reverse the formation of foam cells. (2) MDL can inhibit the activity of adenylate cyclase and reduce the production of cAMP. The above effects of Ang- (1-7) were partly antagonized, but the effects of Ang- (1-7) could not be completely blocked.
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R363

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本文編號：2180097