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Anoxybacillus flavithermus subsp.yunnanensis的鑒定與有機(jī)溶劑耐受特性的研究

發(fā)布時間:2018-07-29 13:54
【摘要】:通過使用含有機(jī)溶劑的培養(yǎng)基對來自中國云南騰沖熱泉的泥水混合樣品進(jìn)行篩選,分離獲得了兩株細(xì)菌,一株是具有具有乙醇耐受性的E13T,另一株是具有廣譜有機(jī)溶劑耐受性的PGDY12。它們都是革蘭氏陽性的嚴(yán)格嗜熱細(xì)菌。這是第一次發(fā)現(xiàn)具有有機(jī)溶劑耐受性的嚴(yán)格嗜熱細(xì)菌。 菌株E13T為兼性厭氧芽孢桿菌,能夠在60℃下耐受濃度為13%(V/V)的乙醇。基于一系列生理生化指標(biāo)、16S rRNA序列分析以及DNA-DNA雜交等數(shù)據(jù),我們將E13 T菌株鑒定為Anoxybacillus flavithermus的一個新亞種。由于菌株P(guān)GDY12和E13 T菌株具有很高的相似性,我們把被PGDY12和E13 T菌株共同鑒定為一個新的亞種,并命名為:Anoxybacillus flavithermus subsp. yunnanensis subsp. nov.。這是第一個耐受有機(jī)溶劑的嗜熱細(xì)菌新亞種。模式菌株E13T分別保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心CCTCC AB2010187T和韓國典型菌種保藏中心KCTC 13759T。PGDY12已送至德國菌種保藏中心(DSMZ)保存,編號為DSM23293T。 菌株P(guān)GDY12也是一株兼性厭氧芽孢桿菌,能夠移動。沒有特殊的營養(yǎng)成分的需求,其生長溫度的上限能夠達(dá)到65℃(最適生長溫度為55℃),并且能夠在pH5.0-10.0范圍內(nèi)生長(最適pH為7.0)。相對對低毒性的乙醇,log Pow值在1.5-4.0的有機(jī)溶劑,比如,甲苯、苯、環(huán)己烷等,是極毒的。PGDY12能夠在100%的這些極毒有機(jī)溶劑的浸泡下仍然能夠幸存,并且也能夠在含有高濃度極毒有機(jī)溶劑的液體培養(yǎng)基中生長。電鏡圖片顯示當(dāng)細(xì)胞受到外界有機(jī)溶劑的脅迫時,胞內(nèi)物質(zhì)會變得不再均一,而是呈一種扭曲的狀態(tài)。 由于有機(jī)溶劑耐受菌在生物轉(zhuǎn)化領(lǐng)域的作用越來越顯著,人們已經(jīng)把研究熱點(diǎn)逐步轉(zhuǎn)向?qū)ふ揖哂杏袡C(jī)溶劑耐受性的菌株。但是目前研究的有機(jī)溶劑耐受菌集中于常溫細(xì)菌。溫度對細(xì)菌有機(jī)溶劑耐受的影響尚未見報道。我們通過測定PGDY12菌株在不同的溫度下的有機(jī)溶劑耐受特性,以生化反應(yīng)動力學(xué)理論為基礎(chǔ),應(yīng)用Monod模型描述其生長過程中比生長速率(μ)與甲苯的添加濃度之間的關(guān)系。結(jié)果表明我們建立的溫度與甲苯耐受性之間的數(shù)學(xué)模型可以定量表征PGDY12菌株的甲苯耐受性隨溫度的升高而急劇降低的特點(diǎn)。有機(jī)溶劑耐受性的這種強(qiáng)烈的溫度依耐性,也從一個側(cè)面解釋了自然界中為何罕見具有有機(jī)溶劑耐受性的嗜熱細(xì)菌。
[Abstract]:Two strains of bacteria, E13T with ethanol tolerance and PGDY12 with broad-spectrum organic solvent tolerance, were isolated from mixed samples of mud water from Tengchong hot spring in Yunnan Province by using organic solvent medium. They are all Gram-positive, strictly thermophilic bacteria. This is the first time a strictly thermophilic bacteria with organic solvent tolerance has been found. Strain E13T is a facultative anaerobic bacillus, which can tolerate ethanol with a concentration of 13% (V / V) at 60 鈩,

本文編號:2152889

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