【摘要】：目的:對少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的分離、培養(yǎng)及傳代方法進(jìn)行改良,探討體外條件下OPCs的增殖與分化特性。方法:取新生SD大鼠脊髓來源的細(xì)胞分離、純化OPCs行原代培養(yǎng),用含堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)和血小板源性生長因子-aa(platelet-derived growth factor-aa,PDGF-aa)的培養(yǎng)液作擴增培養(yǎng),MTT法檢測OPCs的增殖能力;三碘甲腺原氨酸和睫狀神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)OPCs分化,最終分化為成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocytes,OLs),并對分化細(xì)胞行形態(tài)學(xué)及免疫化學(xué)染色法鑒定。結(jié)果:95%以上的細(xì)胞具有雙極或三極突起的典型OPCs形態(tài)并表達(dá)A2B5;MTT法檢測顯示OPCs在體外保持良好的增殖能力;細(xì)胞最終誘導(dǎo)分化為成熟的OLs并表達(dá)髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)。結(jié)論:OPCs在體外條件下可繼續(xù)保持良好的增殖生長及定向分化能力。
[Abstract]:Aim: to improve the method of isolation, culture and passage of oligodendrocyte progenitor cells (oligodendrocyte precursor cells), and to investigate the characteristics of OPCs proliferation and differentiation in vitro. Methods: Spinal cord cells from newborn SD rats were isolated and purified OPCs was cultured in primary culture. The proliferative ability of OPCs was detected by using the culture medium containing basic fibroblast growth factor (basic fibroblast growth factor-b FGF and platelet-derived growth factor-aaaaahuo PDGF-AA, and the differentiation of OPCs was induced by triiodothyronine and ciliary nerve growth factor. Finally, the cells were differentiated into mature oligodendrocytes OLs, and the differentiated cells were identified by morphological and immunocytochemical staining. Results more than 95% of the cells had typical OPCs morphology with bipolar or tripolar protuberances and expressed A2B 5 OPCs. The results showed that OPCs maintained a good proliferative ability in vitro, and the cells eventually differentiated into mature OLs and expressed myelin basic protein (MBP). Conclusion: OPCs can continue to maintain good proliferative growth and directional differentiation ability in vitro.
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院麻醉科中南大學(xué)麻醉醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81070994,81671962)~~
【分類號】：R741

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本文編號：2143985