發(fā)布時(shí)間：2018-07-20 22:05

【摘要】：目的：人足月胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(hPMSCs)在體外進(jìn)行分離純化并對(duì)其生物學(xué)特征進(jìn)行研究,建立共培養(yǎng)體系(分別與成骨細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞),觀察共培養(yǎng)體系對(duì)hPMSCs分化為成骨細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的影響。方法：采用膠原酶消化法從人胎盤中分離純化間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs);通過(guò)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線、CD分子、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及成骨能力對(duì)hPMSCs進(jìn)行鑒定；Transwell雙層培養(yǎng)皿的底層接種成骨細(xì)胞或神經(jīng)細(xì)胞,上層種hPMSCs接,加入高糖DMEM (10%胎牛血清),對(duì)照組上下層均接種hPMSCs。誘導(dǎo)后的成骨細(xì)胞用堿性磷酸酶及茜素紅染色進(jìn)行鑒定,誘導(dǎo)后的神經(jīng)細(xì)胞用NSE進(jìn)行鑒定。結(jié)果：培養(yǎng)14d后大量細(xì)胞貼壁并呈成纖維狀生長(zhǎng)；強(qiáng)表達(dá)CD44,CD29,不表達(dá)CD34,CD45;誘導(dǎo)后可以向成骨細(xì)胞分化；與成骨細(xì)胞的共培養(yǎng)組堿性磷酸酶活性染色陽(yáng)性,對(duì)照組堿性磷酸酶活性染色成陰性。與神經(jīng)細(xì)胞共培養(yǎng)的細(xì)胞可見(jiàn)絲狀突起,成細(xì)長(zhǎng)型,NSE染色為陽(yáng)性。結(jié)論：MSCs同樣可見(jiàn)于人足月胎盤中,其生物學(xué)特性與其他來(lái)源的MSCs相似,成骨細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中提供的微環(huán)境可以誘導(dǎo)hPMSCs向成骨細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞分化。
[Abstract]:Objective: to isolate and purify human full-term placental mesenchymal stem cells (hPMSCs) in vitro and study their biological characteristics. The effects of co-culture system on differentiation of hPMSCs into osteoblasts and neural cells were observed. Methods: mesenchymal stem cells (MSCs) were isolated and purified from human placenta by collagenase digestion. The bottom layer of Transwell culture dish was inoculated with osteoblasts or nerve cells, the upper layer of HPMSCs was added with high glucose DMEM (10% fetal bovine serum), and the upper and lower layers of control group were inoculated with hPMSCs. The induced osteoblasts were identified by alkaline phosphatase and alizarin red staining, and the induced neurons were identified by NSE. Results: after 14 days of culture, a large number of cells adhered to the wall and showed fibrous growth, strong expression of CD44 + CD29, no expression of CD34 + CD45, differentiation into osteoblasts after induction, and positive staining of alkaline phosphatase activity in co-culture group with osteoblasts. Alkaline phosphatase activity in control group was negative. The cells co-cultured with nerve cells showed filamentous processes and were positive for NSE staining. Conclusion\%\
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R329

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本文編號(hào)：2134939