【摘要】：研究背景及目的： 剛地弓形蟲（Toxoplasma gondii，T. gondii）是在細胞內(nèi)寄生的原蟲之一，其生命周期主要包括侵入細胞、細胞內(nèi)繁殖、逸出細胞、侵入新的細胞幾個步驟。其中，入侵機制已有大量的研究，，但如何從宿主細胞中外出還研究得較少。弓形蟲速殖子從宿主細胞中出胞是一個連續(xù)的過程，研究發(fā)現(xiàn)這一過程需要脫落酸（Abscisic acid，ABA）作為出胞啟動的信號分子，并分泌剛地弓形蟲穿孔素樣蛋白（Toxoplasmagondii perforin-like proteins，TgPLP1）；推測弓形蟲體內(nèi)可能存在合成內(nèi)源性ABA的相關(guān)基因。又有研究發(fā)現(xiàn)外源性ABA可以誘導腫瘤細胞發(fā)生凋亡。本課題組前期的研究表明弓形蟲能使宿主細胞發(fā)生明顯的細胞周期阻滯及凋亡。 本文以弓形蟲出胞依賴的信號分子作為切入點，采用ABA抑制劑氟啶酮（Fluridone）作為干預手段，首先作用于細胞培養(yǎng)的弓形蟲，利用形態(tài)學、分子生物學、細胞生物學等研究方法，探索氟啶酮對體外培養(yǎng)的弓形蟲出胞的影響作用及其相關(guān)機制；試圖發(fā)現(xiàn)弓形蟲出胞與宿主細胞細胞周期改變和凋亡間是否存在關(guān)聯(lián)。其次，用氟啶酮作用于感染弓形蟲的模型小鼠，從實驗動物體內(nèi)層面研究氟啶酮對弓形蟲出胞的影響作用。 方法： 1.通過小鼠腹腔接種復蘇剛地弓形蟲RH株速殖子；建立蟲體與Hela細胞的共同培養(yǎng)體系，分別以不同比例（依次為5

本文編號：2126668