重組B群腦膜炎球菌fHBP融合蛋白的表達(dá)和免疫原性研究
本文選題:腦膜炎奈瑟氏菌 + fHBP。 參考:《中國(guó)生物工程雜志》2011年05期
【摘要】:采用PCR構(gòu)建編碼B群腦膜炎球菌fHBP蛋白V1變異型全長(zhǎng)序列和V2變異型C結(jié)構(gòu)域抗原表位融合蛋白的基因片段。并克隆入pET30a(+)載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),在其實(shí)現(xiàn)表達(dá),表達(dá)量約占菌體蛋白總量的30%。表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)離子交換層析純化后,獲得了純度達(dá)到90%以上的融合蛋白。將融合蛋白免疫小鼠,對(duì)其免疫原性進(jìn)行了初步分析。結(jié)果顯示,經(jīng)2次腹腔免疫,血清IgG滴度達(dá)到15 849,同時(shí)殺菌力實(shí)驗(yàn)顯示此融合蛋白能誘導(dǎo)針對(duì)B群腦膜炎球菌的補(bǔ)體依賴的殺菌反應(yīng)。表明此融合蛋白具有較好的免疫原性,為B群腦膜炎球菌蛋白疫苗的研究提供了一定的理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:The full-length sequence of V1 variant of group B meningococcal fHBP protein and the fusion protein fragment of V2 variant C-domain antigen epitope were constructed by PCR. It was cloned into pET30a () vector and transformed into E. coli BL21 (DE3) and expressed in E. coli BL21 (DE3). After purification by ion exchange chromatography, the fusion protein with purity of more than 90% was obtained. The immunogenicity of mice immunized with fusion protein was preliminarily analyzed. The results showed that the titer of serum IgG reached 15849 after twice intraperitoneal immunization, and the bactericidal effect test showed that the fusion protein could induce complement dependent bactericidal reaction against meningococcus. The results showed that the fusion protein had good immunogenicity and provided a theoretical basis for the study of meningococcal protein vaccine.
【作者單位】: 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院/中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所;
【基金】:云南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2009ZC186M)
【分類號(hào)】:R392.1
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,本文編號(hào):2117904
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