甲型H1N1流感重組病毒模型的建立及應(yīng)用
本文選題:重組病毒 + HN流感 ; 參考:《藥物分析雜志》2016年07期
【摘要】:目的:針對流感病毒感染宿主機體的作用機制,建立以甲型H1N1流感A/California/04/2009(H1N1)為靶點的重組病毒模型,并對其應(yīng)用進行探索。方法:通過將表達流感病毒血凝素蛋白HA、神經(jīng)氨酸酶NA及敲除外殼基因、復(fù)制基因并帶有熒光素酶報告基因的HIV~(-1)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染至293T包裝細胞,產(chǎn)生以HA[A/California/04/2009(H1N1)]和NA[A/California/04/2009(H1N1)]為膜蛋白,HIV~(-1)(p NL4-3.Luc.R-E-)為核心的重組病毒。通過該重組流感病毒模型評價陽性對照化合物(奧斯他韋、奧斯他韋酸)、中和血清以及板藍根藥材提取液對重組病毒活性的抑制作用。結(jié)果:奧司他韋、奧司他韋酸抑制重組病毒p NL+HA04+NA04的IC50為1.07×10-8 mol·L~(-1)和1.82×10-9 mol·L~(-1);中和血清的IC50為1∶320~1∶640;中藥板藍根提取液的IC50為1.91×10-5 g·m L~(-1)。結(jié)論:奧斯他韋、奧斯他韋酸、中和血清及板藍根提取液對于重組病毒的活性有抑制作用,提示所構(gòu)建的重組病毒模型可用于上述作用機制藥物的篩選和評價。
[Abstract]:Aim: to establish a recombinant virus model targeting A / H1N1 influenza A / California / 04 / 2009 (H1N1) and to explore its application. Methods: HIV ~ (-1) plasmids expressing influenza virus hemagglutinin (HA), neuraminidase (na) and knockout gene were co-transfected into 293T packaging cells by replicating genes and carrying luciferase reporter gene. Recombinant viruses were produced with HA [A / California / 04 / 2009 (H1N1)] and na [A / California / 04 / 2009 (H1N1)] as the membrane protein HIV-1) (p NL4-3.Luc.R-E-. The recombinant influenza virus model was used to evaluate the inhibitory effect of positive control compounds (oseltamivir, oseltamivir acid), neutralizing serum and Radix Isatidis extract on the recombinant virus activity. Results: the IC50 of the recombinant virus pNL HA04 NA04 was 1.07 脳 10 ~ (-8) mol / L ~ (-1) and 1.82 脳 10 ~ (-9) mol / L ~ (-1) for oseltamivir and oseltamivir acid respectively, the IC50 for neutralizing serum was 1: 320 ~ 1: 640, and the IC50 for Radix Isatidis extract was 1.91 脳 10 ~ (-5) g / L ~ (-1). Conclusion: oseltamivir, oseltamivir acid, neutralizing serum and Radix Isatidis extract can inhibit the activity of recombinant virus.
【作者單位】: 中國食品藥品檢定研究院;
【基金】:國家藥典委員會國家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高研究(670) 中國食品藥品檢定研究院中青年研究發(fā)展基金(2012A12) 化藥制劑質(zhì)量評價關(guān)鍵技術(shù)研究課題(2015ZX09303001) 國家自然科學(xué)基金(81303194)
【分類號】:R373.13
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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本文編號:2103067
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