C型利鈉肽基因調(diào)控斑馬魚胚胎血管發(fā)育
本文選題:nppc + 原位雜交; 參考:《生理學報》2017年01期
【摘要】:本研究旨在探索C型利鈉肽前體蛋白基因(natriuretic peptide precursor C,nppc)在斑馬魚胚胎期的表達及其在血管發(fā)育過程中的功能。利用胚胎整體原位雜交技術(shù)檢測nppc基因在斑馬魚胚胎期的表達。同時使用轉(zhuǎn)基因斑馬魚系Tg(flk1:GFP)和Tg(fli1a:n GFP),顯微注射nppc特異性嗎啉基反義寡核苷酸(morpholino)和nppc m RNA調(diào)控nppc基因表達,利用激光共聚焦顯微鏡觀察分析斑馬魚節(jié)間血管(intersegment vessel,ISV)表型,并統(tǒng)計內(nèi)皮細胞數(shù)目。結(jié)果顯示,在受精后24 h和48 h,nppc基因在斑馬魚腦、心臟、血管系統(tǒng)中都有表達。下調(diào)nppc基因表達導致ISV發(fā)育缺陷,ISV內(nèi)皮細胞數(shù)目減少。以上結(jié)果表明下調(diào)nppc基因表達可能通過抑制內(nèi)皮細胞增殖和內(nèi)皮細胞遷移調(diào)控斑馬魚胚胎血管發(fā)育。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the expression of C-type natriuretic peptide precursor protein gene (natriuretic peptide precursor Cnppc) in zebrafish at embryonic stage and its function in vascular development. The expression of nppc gene in zebrafish embryos was detected by in situ hybridization. The expression of nppc gene was regulated by microinjection of nppc specific morpholinyl antisense oligonucleotide (morpholino) and nppc m RNA using transgenic zebrafish lines TG (flk1: GFP) and TG (fli1a:n GFP). The phenotypes of intersegment vessels were observed and analyzed by confocal laser microscopy. And count the number of endothelial cells. The results showed that the nppc gene was expressed in the brain, heart and vascular system of zebrafish at 24 h and 48 h after fertilization. Down-regulation of nppc gene expression resulted in a decrease in the number of ISV endothelial cells. These results suggest that down-regulation of nppc gene expression may regulate the angiogenesis of zebrafish embryos by inhibiting endothelial cell proliferation and endothelial cell migration.
【作者單位】: 廣東醫(yī)科大學附屬醫(yī)院;南通大學神經(jīng)再生重點實驗室;
【基金】:supported by grants from the National Natural Science Foundation of China(No.31370824) the Special Support Plan of Excellent Young Talents,Guangdong Province,China(No.[2015]8) Initial Program of Excellent Young Teachers in Colleges and Universities in Guangdong Province,China(No.[2016]6:YQ2015081)
【分類號】:R3416
【相似文獻】
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,本文編號:2102798
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