發(fā)布時(shí)間：2018-06-26 01:35

  本文選題：缺氧 + 高遷移率族蛋白B1�。� 參考：《南京醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的觀察缺氧對巨噬細(xì)胞高遷移率族蛋白B1（HMGB1）釋放的誘導(dǎo)作用，，并探討其可能機(jī)制。 方法采用巨噬細(xì)胞株RAW264.7，觀察缺氧（1%O2或100μmol/LCoCl2）培養(yǎng)不同時(shí)間（6、12、24h）對細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HMGB1含量、細(xì)胞HMGB1mRNA及細(xì)胞HMGB1胞內(nèi)分布的影響。觀察不同濃度N-乙酰半胱氨酸（NAC）、MAPK信號通路抑制劑(PD98059、SP600125、SB202190)對缺氧誘導(dǎo)細(xì)胞HMGB1釋放的影響。HMGB1上清液含量和HMGB1mRNA表達(dá)水平分別采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR）檢測。 結(jié)果巨噬細(xì)胞株RAW264.7缺氧（1%O2或100μmol/LCoCl2）培養(yǎng)12h后培養(yǎng)上清液中HMGB1含量及細(xì)胞HMGB1mRNA表達(dá)升高（P0.05或P0.01），24h時(shí)達(dá)到峰值；缺氧（1%O2）培養(yǎng)12h時(shí)，免疫熒光染色顯示HMGB1出現(xiàn)核漿轉(zhuǎn)移；NAC（10、100mmol/L）、PD98059（5、20μmol/L）、SP600125（5、20μmol/L）對巨噬細(xì)胞株RAW264.7缺氧（1%O2）培養(yǎng)24h后培養(yǎng)上清液中的HMGB1含量有明顯抑制作用（P0.01）。 結(jié)論缺氧能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞釋放HMGB1，其機(jī)制可能與胞內(nèi)氧自由基產(chǎn)生及MEKJNK信號通路有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of hypoxia on the release of high mobility group protein B1 (HMGB1) from macrophages and its possible mechanism. Methods macrophage cell line RAW264.7 was used to observe the effects of hypoxia (1O 2 or 100 渭 mol / L CoCl2) on HMGB1 content, HMGB1 mRNA and intracellular distribution of HMGB1 in supernatant of cell culture. The effects of different concentrations of N-acetylcysteine (NAC) MAPK signaling pathway inhibitor (PD98059 / SP600125 / SB20190) on hypoxia induced HMGB1 release were investigated by enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) and real-time fluorescence quantitative PCR (RT-PCR). Results the HMGB1 content and HMGB1 mRNA expression in the supernatant of macrophages RAW264.7 exposed to hypoxia (1O 2 or 100 渭 mol / L CoCl2) reached a peak at 24 h after incubation (P0.05 or P0.01), and the nuclear and cytoplasmic metastasis of HMGB1 was detected by immunofluorescence staining at 12 h after hypoxia (1O2). NAC (10 100 mmol / L) PD98059 (5 ~ 20 渭 mol / L) SP600125 (5 ~ 20 渭 mol / L) inhibited the HMGB1 content in the supernatant of RAW264.7 cultured for 24 h after hypoxia (1O2) (P0.01). Conclusion hypoxia can induce the release of HMGB1 from macrophages, which may be related to the production of intracellular oxygen free radicals and MEKJNK signaling pathway.
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R392.11

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2068466