本文選題：埃博拉病毒 + 復制型病毒樣顆粒�。� 參考：《病毒學報》2017年03期

【摘要】：為了研究埃博拉病毒的生物學特性及其與宿主的相互作用,構建無致病基因的復制型埃博拉病毒樣顆粒(Transcription and replication competent virus-like particles,trVLPs)成為在BSL-2實驗室中進行研究的理想途徑。本研究目的是表達和鑒定復制型埃博拉病毒樣顆粒(trVLPs)。本研究利用埃博拉病毒7個蛋白的基因組片段(VP40、VP24、GP、VP35、VP30、L、NP)和一個報告基因片段重組構建了表達質(zhì)粒,瞬時轉(zhuǎn)染293T細胞,通過熒光素酶檢測系統(tǒng)測定報告基因的表達活性確定了復制型埃博拉病毒樣顆粒(trVLPs)的成功表達。進一步通過超離轉(zhuǎn)染細胞的上清純化得到病毒樣顆粒(trVLPs),在透射電子顯微鏡下觀察到了典型的絲狀結(jié)構。對病毒樣顆粒進行熒光標記并感染Vero細胞,在熒光顯微鏡下觀察到細胞中出現(xiàn)點狀和絲狀的熒光信號。復制型埃博拉病毒樣顆粒的成功表達為進一步研究埃博拉病毒的生物學特性以及與宿主相互作用機制提供了基礎。
[Abstract]:In order to study the biological characteristics of Ebola virus and its interaction with host, the construction of replication and replication competent virus-like particles-like VLPs with no pathogenic gene is an ideal way to study in BSL-2 laboratory. The aim of this study was to express and identify replicative Ebola virus-like particles (trVLPs). In this study, the expression plasmid was constructed using the genomic fragment of 7 proteins of Ebola virus (VP40, VP24GPG, VP35, VP30, LNP) and a reporter gene fragment, which was transiently transfected into 293T cells. The successful expression of replicative Ebola virus-like particles (trVLPs) was determined by luciferase detection system. Virus like particles (trVLPs) were further purified from the supernatant of the transfected cells. The typical filamentous structures were observed under transmission electron microscope (TEM). The virus like particles were labeled with fluorescence and infected with Vero cells. The fluorescence signals of dot and filamentous were observed under fluorescence microscope. The successful expression of replicative Ebola virus-like particles provides a basis for further studying the biological characteristics of Ebola virus and the mechanism of interaction with host.
【作者單位】： 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所;中國科學院武漢病毒研究所;
【基金】：國家自然科學基金(項目號:81590763),題目:埃博拉病原學研究
【分類號】：R373

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 雷瓊;病毒樣顆粒用作輪狀病毒亞單位疫苗(英)[J];國外醫(yī)學.預防.診斷.治療用生物制品分冊;1997年03期

2 李姿林;;多基因表達家蠶生物反應器組裝甲型H1N1流感病毒樣顆粒的研究[J];北京農(nóng)業(yè);2011年03期

3 高嘯;潘玉竹;陳中偉;邢麗;劉坤;王文娟;楊鵬輝;王希良;;甲型H1N1流感病毒樣顆粒疫苗的初步研究[J];免疫學雜志;2011年06期

4 李曉楠;曹明慧;李培鋒;;新腸道病毒71型病毒樣顆粒的制備[J];中國免疫學雜志;2012年11期

5 單軍;葛以躍;戚宇華;張文帥;李顯;崔侖標;;含腸道病毒5'端非編碼區(qū)部分核糖核酸序列病毒樣顆粒的構建[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2010年10期

6 董曉燕;劉曉丹;張麟;;內(nèi)含肽介導的鼠多瘤病毒樣顆粒生產(chǎn)表達和純化[J];天津大學學報(自然科學與工程技術版);2014年04期

7 王健偉,姜慧英,屈建國,趙同興,洪濤;同時表達藍舌病毒四個主要結(jié)構蛋白可裝配成病毒樣顆粒[J];病毒學報;2000年02期

8 龍遺芳;郭中敏;陸家海;;病毒樣顆粒技術——現(xiàn)代生物醫(yī)學應用的新平臺[J];中國病毒病雜志;2013年04期

9 朱詩應,戚中田;丙型肝炎病毒樣顆粒疫苗的研究現(xiàn)狀[J];國外醫(yī)學(預防、診斷、治療用生物制品分冊);2005年01期

10 施金榮;楊曉明;杜慧;邱阿明;王妮丹;黃曉媛;;H5N1亞型禽流感病毒樣顆粒的構建及鑒定[J];中國生物制品學雜志;2013年02期

相關會議論文 前4條

1 陳霄;周子華;廖玉華;王敏;;乙肝核心病毒樣顆粒的克隆、改建、表達和純化[A];中華醫(yī)學會第11次心血管病學術會議論文摘要集[C];2009年

2 戚宇華;崔侖標;史智揚;葛以躍;李顯;單軍;陸祖宏;;H5N1禽流感病毒樣顆粒的制備與應用[A];第十一次中國生物物理學術大會暨第九屆全國會員代表大會摘要集[C];2009年

3 柯昌文;李天成;武田直和;;BK病毒VP1的C端陽電荷殘基對病毒樣顆粒形成的影響[A];2004年中國科學院新生病毒性疾病控制學術討論會摘要集[C];2004年

4 仝光杰;樓覺人;;HPV52 L1蛋白在畢赤酵母中的優(yōu)化表達[A];第五次全國免疫診斷暨疫苗學術研討會論文匯編[C];2011年

相關重要報紙文章 前1條

1 通訊員 于洋　記者 張兆軍;病毒樣顆粒熒光示蹤研究獲重要進展[N];科技日報;2011年

相關博士學位論文 前8條

1 李月濤;RVFV病毒樣顆粒的構建及其免疫原性研究[D];石河子大學;2016年

2 王，

本文編號：2061076