發(fā)布時間：2018-06-24 00:31

  本文選題：大腸埃希菌 + 多重耐藥��； 參考：《瀘州醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文

【摘要】：目的：了解本地產(chǎn)超廣譜β—內(nèi)酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases, ESBLs)大腸埃希菌(Escherichia coli)的耐藥情況,探討轉(zhuǎn)座子與整合子遺傳標(biāo)志在耐多藥產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌中的作用。方法：1.初步篩選試驗(Screening test):選用頭孢噻肟、頭孢他啶、氨曲南、頭孢曲松藥敏紙片對71株大腸埃希菌進(jìn)行產(chǎn)ESBLs篩選試驗,凡頭孢他啶的抑菌環(huán)直徑≤22 mm,頭孢曲松≤25 mm,氨曲南或頭孢噻肟≤27 mm,則提示為可疑產(chǎn)ESBLs菌株。2.紙片確認(rèn)試驗(Confirmatory tests):將初篩可疑產(chǎn)ESBLs菌株同時用頭孢他啶和頭孢他啶加克拉維酸、頭孢噻肟和頭孢噻肟加克拉維酸作藥敏試驗,對任何一組藥物,加克拉維酸前后抑菌環(huán)直徑相差≥5mm可確認(rèn)為產(chǎn)ESBLs菌株。3.藥敏試驗：紙片擴(kuò)散法(Kerby-Bauer法,K-B法),采用NCCLS推薦的方法測定71株大腸埃希菌對三類6種常用抗菌藥物—鏈霉素(S)、阿米卡星(A)、環(huán)丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LEV)、頭孢噻肟(CTX)、頭孢西丁(FOX)的耐藥性。采用大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 25922進(jìn)行質(zhì)控。4.PCR技術(shù)：采用Biospin細(xì)菌基因組DNA試劑盒提取大腸埃希菌DNA。根據(jù)qacE△1-sul1基因(Ⅰ類整合子遺傳標(biāo)記)、merA(為轉(zhuǎn)座子Tn21和Tn501共同的遺傳標(biāo)記)、tnpA(為轉(zhuǎn)座子Tn1、Tn2、Tn3和Tn1000共同的遺傳標(biāo)志)、tnpU(為轉(zhuǎn)座子Tn1548遺傳標(biāo))設(shè)計四對引物,以提取的大腸埃希菌DNA為反應(yīng)模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳、紫外線檢測儀觀察結(jié)果及送檢做基因測序。結(jié)果：1.產(chǎn)ESBLs菌株的檢測結(jié)果：臨床分離的71株大腸埃希菌表型篩選試驗初步篩出可疑產(chǎn)ESBLs 55株(77.46%),進(jìn)一步確認(rèn)試驗共檢出產(chǎn)ESBLs35株(49.30%)。2.臨床分離株對6種抗生素耐藥分布：(1)耐S 41株、耐A 6株、耐LEV 45株、耐CIP 51株、耐CTX 44株、耐FOX 9株；(2)耐藥模式分布：多耐模式45株(63.38%)、雙耐8株(11.27%)、單耐11株(15.49%)、全敏感菌株7株(9.86%)。3.轉(zhuǎn)座子的檢出：PCR法檢出遺傳標(biāo)記merA陽性菌共15株(21.13%),而轉(zhuǎn)座子tnpA和tnpU均未檢出。不同耐藥模式中轉(zhuǎn)座子遺傳標(biāo)記merA檢出率的比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。產(chǎn)ESBLs酶菌株中不同耐藥模式中轉(zhuǎn)座子遺傳標(biāo)記merA檢出率的比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)；非產(chǎn)ESBLs酶菌株中不同耐藥模式中轉(zhuǎn)座子遺傳標(biāo)記merA檢出率的比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。4.整合子遺傳標(biāo)記(qacE△1-sul1)的檢出：PCR法共檢出55株(77.46%),其中多耐模式菌株檢出率最高為88.89%(40株),其次為雙耐模式75%(6株),單耐模式中檢出率最低為22.22%(2株),不同耐藥模式中整合子遺傳標(biāo)記檢出率有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。產(chǎn)ESBLs酶菌株中不同耐藥模式的整合子遺傳標(biāo)記檢出率有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)；非產(chǎn)ESBLs酶菌株不同耐藥模式中整合子遺傳標(biāo)記檢出率無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。5.轉(zhuǎn)座子陽性株中整合子檢出情況：共檢出10株(66.67%),其中多耐模式中兩者重疊率最高為80%(8株)、雙耐20%(2株)。6.轉(zhuǎn)座子遺傳標(biāo)記merA在產(chǎn)ESBLs酶且整合子陽性菌株中的檢出：共檢出6株,其中多耐模式4株,雙耐2株,單耐未檢出。不同耐藥模式中檢出率有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論：1.本地區(qū)大腸埃希菌耐藥情況嚴(yán)重,產(chǎn)ESBLs酶菌株常見,并以多耐模式菌株為主；2.轉(zhuǎn)座子、整合子的分布以耐多藥模式菌株為主；3.同時攜帶整合子和轉(zhuǎn)座子基因的菌株多表現(xiàn)為耐藥,尤其在耐多藥模式中更為明顯；4.產(chǎn)ESBLs酶且同時攜帶轉(zhuǎn)座子、整合子基因的菌株主要分布在耐多藥模式菌株中,該三者在多重耐藥機(jī)制中可能存在一定的聯(lián)系。
[Abstract]:Objective : To investigate the drug resistance of Escherichia coli with extended spectrum beta - lactamase ( extended spectrum beta - lactamase ) . 71 strains of Escherichia coli were isolated from clinical isolates ( 77.46 % ) . There were 35 strains ( 49.30 % ) of ESBLs35 strains ( 49.30 % ) .
( 2 ) The distribution of resistance patterns : 45 strains ( 63.38 % ) , 8 ( 11.27 % ) , 11 ( 15.49 % ) and 7 ( 9.86 % ) .
There was no statistical difference ( P0.05 ) . There were 55 strains ( 77.46 % ) detected by polymerase chain reaction ( PCR ) in different drug resistance patterns of non - producing - producing strains ( P0.05 ) . The detection rate of multi - resistant strains was 88.89 % ( 40 strains ) , and the detection rate was 22 . 22 % ( 2 strains ) .
There was no statistical difference in the detection rate of integron in non - producing - producing strains ( P0.05 ) . Among them , 10 strains ( 66.67 % ) were detected . Among them , 10 strains ( 66.67 % ) were detected . Among them , 6 strains were detected . Among them , 6 strains were detected , 4 of them were resistant to multi - resistance , 2 strains were resistant to double - resistant strains .
2 . The distribution of transposon and integron was mainly resistant to multi - drug - resistant strain .
3 . At the same time , the strains carrying both the integron and the transposon genes showed resistance , especially in the multi - drug - resistant model ;
4 . It is possible to have a certain relationship among the multiple drug resistance mechanisms in the strains of multi - drug resistance , which is mainly distributed among the strains of multi - drug resistance .
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R378

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2059150