本文選題：F1+rV + 蛋白　； 參考：《福建醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：目的:本課題以提取的鼠疫F1抗原和重組鼠疫V抗原免疫小鼠,豚鼠兩種動(dòng)物模型,評(píng)價(jià)鼠疫亞單位疫苗的免疫效果,為鼠疫疫苗研制奠定基礎(chǔ)。 方法:1.在小鼠動(dòng)物模型上,本課題用F1和rV與氫氧化鋁進(jìn)行物理混合后免疫小鼠。通過(guò)脾淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、脾淋巴細(xì)胞細(xì)胞因子,流式細(xì)胞分析術(shù)和抗體滴度的測(cè)定四種方法對(duì)F1和rV蛋白疫苗的免疫原性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。2.在豚鼠動(dòng)物模型上,實(shí)驗(yàn)采用不同劑量的F1和rV抗原與氫氧化鋁佐劑進(jìn)行物理混合后免疫豚鼠,以探求合適的疫苗濃度;通過(guò)分離免疫后不同時(shí)間的外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行增殖實(shí)驗(yàn),對(duì)疫苗末次注射八周后的豚鼠進(jìn)行過(guò)敏性遲發(fā)型超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn),并測(cè)定免疫后不同時(shí)間抗體滴度等實(shí)驗(yàn),對(duì)F1和rV蛋白疫苗的免疫原性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。3.在疫苗效力保護(hù)實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)不同劑量的鼠疫雙組分疫苗免疫小鼠,并于一周后用一定劑量的鼠疫菌株對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行攻擊,選擇一定的時(shí)間對(duì)小鼠脾臟的細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù),從而觀察疫苗的保護(hù)效果。 結(jié)果:1.小鼠動(dòng)物模型結(jié)果:ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示F1+rV+Al(OH)3組有較強(qiáng)的體液免疫應(yīng)答;ELISPOT,MTT細(xì)胞增殖結(jié)果顯示F1+rV+Al(OH)3組在不同時(shí)間點(diǎn)經(jīng)F1,rV抗原刺激后分泌IFN-r的脾臟淋巴細(xì)胞數(shù)均高于其余各組。2.豚鼠動(dòng)物模型結(jié)果:ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示各疫苗組均有較強(qiáng)的體液免疫應(yīng)答,同時(shí)活疫苗組對(duì)F1抗原特異性的體液IgG效價(jià)明顯高于其余各組,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MTT細(xì)胞增殖結(jié)果顯示不同劑量的疫苗組F1+rV組及活疫苗組在不同時(shí)間點(diǎn)經(jīng)F1,rV抗原刺激后的增殖與陰性對(duì)照組無(wú)顯著性差異;遲發(fā)型超敏反應(yīng)顯示F1+rV復(fù)合疫苗能介導(dǎo)較強(qiáng)的細(xì)胞免疫應(yīng)答。3.疫苗效力保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示陰性對(duì)照組有數(shù)量不等的菌落生長(zhǎng),而疫苗組小鼠脾臟均無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。 結(jié)論:鼠疫雙組分疫苗能引起小鼠和豚鼠明顯的免疫應(yīng)答,Al(OH)3佐劑能夠顯著提高其應(yīng)答水平,同時(shí)對(duì)小鼠具有一定的保護(hù)力。確證了其與氫氧化鋁佐劑物理混合后能夠激發(fā)高水平的免疫應(yīng)答,為進(jìn)一步研制新型鼠疫疫苗奠定了基礎(chǔ)
[Abstract]:Objective: to evaluate the immune effect of Yersinia pestis subunit vaccine in mice and guinea pigs by immunizing mice with F1 antigen and recombinant V antigen in order to lay a foundation for the preparation of Yersinia pestis vaccine. Method 1: 1. In this study, mice were immunized with F1 and rV and aluminum hydroxide. The immunogenicity of F1 and rV protein vaccines was preliminarily evaluated by spleen lymphocyte proliferation test, spleen lymphocyte factor, flow cytometry and antibody titer determination. The guinea pigs were immunized with different doses of F1 and rV antigens and aluminum hydroxide adjuvant in order to find the appropriate vaccine concentration. The proliferation of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) at different time after immunization was carried out, the allergic delayed type hypersensitivity test was performed on guinea pigs after the last injection of the vaccine eight weeks later, and the antibody titers were measured at different times after immunization. The immunogenicity of F1 and RV protein vaccines was evaluated. In the protective experiment of vaccine efficacy, mice were immunized with different doses of plague two-component vaccine, and a certain dose of Yersinia pestis strain was used to attack the experimental mice one week later, and selected a certain time to culture and count the bacteria in the spleen of mice. The protective effect of the vaccine was observed. The result is 1: 1. The results of mouse animal model showed that F1 rV Albumin OHH3 group had a strong humoral immune response and ELISPOTH MTT cell proliferation. The results showed that the spleen lymphocytes secreting IFN-r in F1 rV Alo OHH3 group were higher than those in other groups at different time points after stimulation by F1 rV antigen. The results of the guinea pig animal model showed that each vaccine group had a strong humoral immune response, and the live vaccine group had higher specific humoral IgG titer against F1 antigen than the other groups. Results the results of MTT cell proliferation showed that there was no significant difference between F1 rV group and live vaccine group stimulated by F1rV antigen at different time points. Delayed type hypersensitivity reaction showed that F1 rV complex vaccine could mediate strong cellular immune response. 3. The results of vaccine protection test showed that there were different numbers of colonies in negative control group, but no bacteria growth in spleen of vaccine group. Conclusion: Yersinia pestis two-component vaccine can induce a significant immune response in mice and guinea pigs. It was confirmed that it could stimulate a high level of immune response after physical mixing with aluminum hydroxide adjuvant, which laid a foundation for the further development of a new plague vaccine.
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馮建萍;金星;李翔;楊曉艷;任玲玲;張青雯;祁芝珍;戴瑞霞;魏紹振;金麗霞;熊浩明;趙子婧;;赫氏培養(yǎng)基不同氨基氮含量對(duì)鼠疫菌生長(zhǎng)的影響[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2011年07期

2 田春波;陳榮富;藍(lán)玉清;柳付明;;一例歷史鼠疫患者墳?zāi)怪械耐寥罊z測(cè)報(bào)告[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2011年08期

3 楊琳;高鶴;張義全;劉霞;譚亞芳;郭兆彪;黃新祥;楊瑞馥;周冬生;;鼠疫菌、副溶血性弧菌及肺炎克雷伯菌CRP蛋白的表達(dá)及其DNA結(jié)合活性分析[J];中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志;2011年03期

4 王梅;海榮;;鼠疫噬菌體研究概述[J];中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志;2011年03期

5 周樹(shù)武;梁江明;曾竣;韋錦平;陳達(dá)宗;倪爾江;廖生華;黃利榮;;隆林縣蚤種群分布特征分析[J];中國(guó)地方病防治雜志;2011年04期

6 羅張;高鶴;張義全;王麗;譚亞芳;郭兆彪;楊瑞馥;周冬生;;鼠疫菌重要調(diào)控子蛋白的表達(dá)純化及DNA結(jié)合活性分析[J];生物技術(shù)通訊;2011年04期

7 洪文艷;王浩然;王津;郭兆彪;周蕾;楊瑞馥;;鼠疫菌PsaA抗原的表達(dá)及抗體制備和應(yīng)用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年12期

8 顧錫英;方睿;嘎瑪;;西藏朗縣5例肺鼠疫患者臨床分析[J];西藏醫(yī)藥雜志;2011年03期

9 閆東;史獻(xiàn)明;崔耀仁;項(xiàng)友清;趙玉剛;劉冠純;陳立;任風(fēng)岐;陳永明;;河北省鼠疫疫源地小型夜行鼠調(diào)查[J];中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志;2011年04期

10 馮建萍;;檢測(cè)鼠疫菌培養(yǎng)基的質(zhì)量控制[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2011年08期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 熱娜·吐?tīng)柕?徐秉臣;阿扎提·熱合木;孫石;雷剛;;酶免疫染色法快速檢驗(yàn)鼠疫菌[A];新世紀(jì)預(yù)防醫(yī)學(xué)面臨的挑戰(zhàn)——中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)首屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2002年

2 董興齊;張洪英;彭和碧;Chu C.May;;鼠疫菌—新質(zhì)粒的限制性酶切圖譜[A];西部大開(kāi)發(fā) 科教先行與可持續(xù)發(fā)展——中國(guó)科協(xié)2000年學(xué)術(shù)年會(huì)文集[C];2000年

3 宋亞軍;;鼠疫耶爾森氏菌比較與進(jìn)化基因組學(xué)研究[A];2006中國(guó)微生物學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

4 薛強(qiáng);王靜;鄒明強(qiáng);李錦豐;王楠;周朋;邱月明;陳彥長(zhǎng);;應(yīng)用微流控芯片快速檢測(cè)血清中鼠疫抗體[A];第三屆全國(guó)微全分析系統(tǒng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

5 葉楓;李俊勇;尹家祥;;云南省南部及東南部鼠疫菌質(zhì)粒圖譜分析及其流行病學(xué)意義[A];西部大開(kāi)發(fā) 科教先行與可持續(xù)發(fā)展——中國(guó)科協(xié)2000年學(xué)術(shù)年會(huì)文集[C];2000年

6 張濤;;鼠疫研究與控制措施(綜述)[A];第八屆粵港澳臺(tái)預(yù)防醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)交流會(huì)議論文匯編[C];2008年

7 吳小紅;李豫川;嚴(yán)格;曹軍田;王翠娥;;鼠疫耶爾森氏菌感染小鼠的病理學(xué)觀察[A];第六屆全國(guó)生物醫(yī)學(xué)體視學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨第九屆全軍軍事病理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議、第五屆全軍定量病理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

8 季恒青;賈慶良;汪新麗;蘇培學(xué);吳國(guó)輝;毛德強(qiáng);張春華;;三峽庫(kù)區(qū)重慶段鼠疫預(yù)警研究[A];重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)2009年論文集[C];2009年

9 戴二黑;;鼠疫耶爾森菌基因組重排譜分型的研究[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

10 陳虹;;四川省石渠縣人間鼠疫菌株鑒定結(jié)果分析[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識(shí)創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊(cè)）[C];2001年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 王雪飛;鼠疫檢測(cè)新技術(shù)身手不凡 30分鐘內(nèi)鎖定鼠疫菌及抗體[N];健康報(bào);2007年

2 李偉;中蒙聯(lián)手開(kāi)展鼠疫等病原監(jiān)測(cè)研究[N];中國(guó)國(guó)門(mén)時(shí)報(bào);2007年

3 本報(bào)記者 何秀麗;731部隊(duì)核心隊(duì)員揭露活體解剖[N];哈爾濱日?qǐng)?bào);2008年

4 《中華人民共和國(guó)鼠疫與環(huán)境圖集》研制組;按圖索“鼠” 辨疫知因[N];健康報(bào);2001年

5 王秀華;細(xì)菌戰(zhàn)犯元兇石井四郎逃脫國(guó)際審判揭秘[N];中國(guó)檔案報(bào);2005年

6 中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院流行病學(xué)微生物學(xué)研究所 研究員 張見(jiàn)麟;“恐怖微生物”——炭疽、鼠疫、天花[N];健康報(bào);2001年

7 崔尚金;聚焦老而不朽的人畜共患�。菏笠遊N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2005年

8 本報(bào)記者 劉安平 郝廣福;嚴(yán)把國(guó)門(mén) 聯(lián)防聯(lián)控[N];中國(guó)國(guó)門(mén)時(shí)報(bào);2006年

9 本報(bào)記者 龔保華;他與歷史見(jiàn)證人對(duì)話[N];吉林日?qǐng)?bào);2005年

10 自治區(qū)地方病防治研究所供稿;提高防護(hù)意識(shí) 消除鼠疫危害[N];西藏日?qǐng)?bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王薇;納米材料在抗腫瘤免疫治療中的應(yīng)用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

2 譚亞芳;鼠疫耶爾森氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白YopK在致病機(jī)制中的作用研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

3 陳澤良;鼠疫耶爾森氏菌密度感應(yīng)系統(tǒng)與毒力關(guān)系研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

4 李蓓;鼠疫耶爾森氏菌候選疫苗靶標(biāo)的篩選與初步驗(yàn)證[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

5 殷瑛;以乙型肝炎病毒核心蛋白為載體的新型疫苗研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

6 周蕾;鼠疫耶爾森氏菌密度感應(yīng)系統(tǒng)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

7 柯躍華;鼠疫菌蛋白YpkA和人蛋白VASP的相互作用和功能研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

8 吳超;幽門(mén)螺桿菌多亞單位疫苗的篩選及免疫保護(hù)機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

9 李娜;肉毒毒素及炭疽SFV復(fù)制子核酸疫苗的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

10 洪文艷;UPT十通道免疫層析試紙盤(pán)檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)的建立及其在鼠疫菌抗體譜篩查中的應(yīng)用[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 汪潔英;鼠疫雙組分疫苗的免疫學(xué)評(píng)價(jià)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

2 王旺;鼠疫亞單位疫苗的制備及其在獼猴中的免疫保護(hù)作用評(píng)價(jià)[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

3 劉軼然;示蹤鼠疫菌構(gòu)建及吞噬細(xì)胞對(duì)其吞噬能力的觀察[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

4 何萍;納米鋁佐劑的制備及其輔佐HBsAg的免疫學(xué)效應(yīng)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

5 尚帥;載鼠疫亞單位疫苗的多孔微球[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

6 姜慧;1942年河套地區(qū)鼠疫研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2012年

7 王棠;鼠疫菌天然F1與重組rV270抗原的制備及其免疫保護(hù)作用的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

8 劉景福;布魯菌新型亞單位疫苗BP26的動(dòng)物免疫評(píng)價(jià)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

9 尤敬民;1911年直隸鼠疫防治研究[D];河北師范大學(xué);2012年

10 王娜;中國(guó)鼠疫菌單核苷酸多態(tài)性研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2011年

，

本文編號(hào)：2039625