THP-1細胞中p2x7R對ISG20的調節(jié)作用
本文選題:嘌呤能受體 + 白介素β。 參考:《免疫學雜志》2017年09期
【摘要】:目的探討脂多糖誘導的THP-1源性巨噬細胞中,嘌呤能受體2x7(p2x7R)對IFN-α誘導干擾素刺激基因20(ISG20)的影響及其可能的機制。方法 THP-1源性巨噬細胞經(jīng)LPS誘導4 h后分別加入p2x7R非特異性抑制劑蘇拉明(Suramin)、磷酸吡哆醛(PPADS),p2x7R特異性抑制劑oxidized ATP(O-ATP)、亮藍G(BBG)、以及p2x7R特異性激動劑苯甲酰苯甲酸ATP(BzATP)作用1 h后,聯(lián)合IFN-α培養(yǎng)24 h。監(jiān)測細胞內ISG20 mRNA、蛋白的表達差異及上清液中IL-1β的含量。BzATP組中,觀察不同濃度BzATP以及caspase-1抑制劑預處理1 h后Bz ATP、IFN-α對ISG20的調節(jié)作用。結果 RT-PCR及Western blot結果顯示,p2x受體廣譜抑制劑與p2x7R的特異性抑制劑具有抑制IFN-α對ISG20的誘導作用,IFN-α聯(lián)用抑制劑組與IFN-α聯(lián)用激動劑BzATP組中ISG20 mRNA較IFN-α組差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。濃度梯度實驗中,上清液中IL-1β的含量在加入BzATP、BBG后發(fā)生改變。另外,Bz ATP直接誘導的ISG20可被caspase-1抑制劑抑制,上清液中IL-1β同樣受到抑制。結論在THP-1細胞中,BzATP對ISG20的誘導作用不同于IFN-α途徑直接誘導ISG20的生成。這為將來探索新的抗病毒治療提供了新的思路。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of purinergic receptor 2x7 (p2x7R) on IFN- 偽 -induced interferon stimulating gene 20ISG20 in THP-1 derived macrophages induced by lipopolysaccharide (LPS) and its possible mechanism. Methods THP-1 derived macrophages were treated with p2x7R nonspecific inhibitor Suraminine, p2x7R specific inhibitor oxidized ATP O-ATPase, brilliant blue GBS GBS, and p2x7R specific agonist ATP BzATP for 1 h. Combined with IFN- 偽 for 24 h. To monitor the difference of ISG20 mRNAs and protein expression and the content of IL-1 尾 in supernatant. In BzATP group, we observed the regulation of ISG20 by Bz ATP and caspase-1 inhibitor pretreatment for 1 h. Results the results of RT-PCR and Western blot showed that P2x receptor broad-spectrum inhibitor and p2x7R specific inhibitor could inhibit the induction of ISG20 by IFN- 偽 and IFN- 偽 combined with IFN- 偽 agonist BzATP. There was a significant difference in ISG20 mRNA between IFN- 偽 group and IFN- 偽 group compared with IFN- 偽 group. In the concentration gradient experiment, the content of IL-1 尾 in the supernatant changed after adding BzATP BBG. In addition, ISG20 directly induced by BZ ATP could be inhibited by caspase-1 inhibitor, and IL-1 尾 in supernatant was also inhibited. Conclusion the induction of ISG20 by BzATP in THP-1 cells is different from that induced by IFN- 偽 pathway. This provides a new idea for exploring new antiviral therapy in the future.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院感染科;
【基金】:國家自然科學基金(81271838)
【分類號】:R392
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本文編號:2006160
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