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日本七鰓鰻免疫方案的建立及抗血清殺傷活性的鑒定

發(fā)布時(shí)間:2018-06-11 11:28

  本文選題:日本七鰓鰻 + 可變淋巴細(xì)胞受體 ; 參考:《遼寧師范大學(xué)》2012年碩士論文


【摘要】:在針對(duì)適應(yīng)性免疫系統(tǒng)起源與進(jìn)化的探究中,現(xiàn)存的無(wú)頜類(lèi)脊椎動(dòng)物的代表一七鰓鰻因其獨(dú)特的進(jìn)化地位及特有的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)從而受到了免疫學(xué)家的高度關(guān)注,繼而成為這一研究領(lǐng)域中的新型模式生物。隨著生物系統(tǒng)發(fā)生的進(jìn)行,以哺乳動(dòng)物為代表的有頜類(lèi)脊椎動(dòng)物通過(guò)天然免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的協(xié)同作用來(lái)完成對(duì)外界抗原刺激的免疫應(yīng)答。其中以免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)、T/B淋巴細(xì)胞表面受體(TCR/BCR)和主要組織相容性復(fù)合物(MHC)為代表免疫球蛋白超家族(Immunoglobulin superfamily,IgSF)成員,賦予了適應(yīng)性免疫應(yīng)答所特有的復(fù)雜性、專(zhuān)一性和記憶性。 2004年P(guān)ancer Z等學(xué)者經(jīng)研究證實(shí),在無(wú)頜類(lèi)脊椎動(dòng)物七鰓鰻中存在一種獨(dú)特的、由可變淋巴細(xì)胞受體(variable lymphocyte receptors,VLRs)介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)。目前已經(jīng)證實(shí)在七鰓鰻體內(nèi)存在三類(lèi)VLR分子—VLRA、VLRB及VLRC;當(dāng)機(jī)體受到外源微生物刺激后,只有VLRB+淋巴細(xì)胞會(huì)發(fā)生增殖并分化成漿細(xì)胞,分泌可溶性VLRB分子參與免疫應(yīng)答。 由此可見(jiàn),七鰓鰻擁有獨(dú)特的、唯一一種不依賴于免疫球蛋白的適應(yīng)性免疫體系,對(duì)該免疫系統(tǒng)作用機(jī)理的的探究,將為解開(kāi)適應(yīng)性免疫系統(tǒng)起源及進(jìn)化這一由來(lái)已久的謎團(tuán)提供關(guān)鍵線索。遺憾的是,目前在七鰓鰻免疫研究領(lǐng)域仍缺少一套標(biāo)準(zhǔn)化的免疫方案,不僅造成了七鰓鰻免疫流程中抗原制備、免疫方式、免疫時(shí)間等相關(guān)因素的不確定性,更阻礙了后續(xù)抗血清活性及VLR免疫應(yīng)答體系的研究。為解決這一問(wèn)題,本研究運(yùn)用多種抗原免疫日本七鰓鰻(Lampetra japonica),分別為大腸桿菌(Escherichia coli, E. coli),變形桿菌(Bacillus proteus, B. proteus),恥垢分枝桿菌(Mycobacterium smegmatis, M. smegmatis)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S. aureus);兔紅細(xì)胞(RRBCs),綿羊紅細(xì)胞(SRBCs);腫瘤細(xì)胞NB4、HepG2及Hela。采取腹腔注射及肌肉注射兩種免疫途徑,每十天進(jìn)行一次免疫,共免疫4次,隨后采集七鰓鰻抗血清。此外,作者對(duì)七鰓鰻抗血清的殺菌及溶細(xì)胞活性進(jìn)行了進(jìn)一步的探究,為針對(duì)七鰓鰻體內(nèi)VLR介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的研究提供基礎(chǔ),從而進(jìn)一步推動(dòng)脊椎動(dòng)物適應(yīng)性免疫系統(tǒng)起源及進(jìn)化的相關(guān)研究。
[Abstract]:In the exploration of the origin and evolution of adaptive immune system, the representative of the extant edentulous vertebrate, lamprey, has been highly concerned by immunologists for its unique evolutionary status and unique adaptive immune system. Then it becomes a new model organism in this research field. With the development of biological system, the vertebrate of jaw represented by mammal can complete the immune response to the stimulation of external antigen by the synergistic action of innate immune system and adaptive immune system. Immunoglobulins, T / B lymphocyte surface receptors (TCR / BCRs) and major histocompatibility complexes (MHCs) were used as members of immunoglobulin superfamily IgSFs, which gave the specific complexity of adaptive immune response. Specificity and memory. In 2004, Pancer Z and other researchers confirmed that there is a unique adaptive immune system mediated by variable lymphocyte receptor (lymphocyte receptor) in lamprey, a non-maxillary vertebrate. At present, it has been proved that there are three kinds of VLR molecules-VLRAN VLRB and VLRC in lamprey. When the organism is stimulated by exogenous microorganisms, only VLRB+ lymphocytes will proliferate and differentiate into plasma cells and secrete soluble VLRB molecules to participate in the immune response. The lamprey has a unique, only adaptive immune system independent of immunoglobulin, which explores the mechanism of its action. It will provide a key clue to unravel the long-standing mystery of the origin and evolution of the adaptive immune system. Unfortunately, there is still a lack of a standardized immunization program in the field of lamprey immunization, which not only leads to the uncertainty of antigen preparation, immunization methods, immune time and other related factors in the immune process of lamprey. It also hinders the further study of antiserum activity and VLR immune response system. In order to solve this problem, In this study, Lampetra japonica, Escherichia coli, E. coli, Bacillus proteus, B. proteusus, Mycobacterium smeatisgmatism, Mycobacterium smegmatisme, Staphylococcus aureus, Saureusus, RRBCsof rabbit erythrocytes, SRBCsof sheep, tumor cells NB4HepG2 and Hela. were immunized with various antigens. The mice were immunized once every ten days by intraperitoneal injection and intramuscular injection. In addition, the authors further explored the bactericidal and cytolytic activity of lamprey antiserum, which provided a basis for the study of adaptive immune system mediated by VLR in lamprey. Therefore, the study on the origin and evolution of vertebrate adaptive immune system is further promoted.
【學(xué)位授予單位】:遼寧師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類(lèi)號(hào)】:R392

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2005040

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