恒河猴骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)與鑒定
本文選題:間質(zhì)干細胞 + 恒河猴。 參考:《中國組織工程研究》2017年29期
【摘要】:背景:關于恒河猴骨髓間充質(zhì)干細胞的研究結果很有限,來自幼年恒河猴骨髓間充質(zhì)干細胞的分化潛力仍然未知。目的:探討體外分離培養(yǎng)的恒河猴骨髓間充質(zhì)干細胞生物學特性,對其生長曲線和表型進行初步鑒定。方法:采用密度梯度離心法和全骨髓貼壁培養(yǎng)法提取培養(yǎng)幼年恒河猴骨髓間充質(zhì)干細胞,利用MTS法繪制第2,7代骨髓間充質(zhì)干細胞生長曲線,利用流式細胞儀分析法檢測第3代骨髓間充質(zhì)干細胞凋亡及第4代骨髓間充質(zhì)干細胞表面標志物CD29、CD34、CD45、CD90、CD147表達,檢測第3代骨髓間充質(zhì)干細胞的成骨及成脂分化能力。結果與結論:①第2,7代骨髓間充質(zhì)干細胞在培養(yǎng)第一二天為潛伏期,第3-7天為對數(shù)生長期,第8天后細胞增殖逐漸減慢,進入平臺期,第7代細胞增殖能力弱于第2代;②骨髓間充質(zhì)干細胞表面標志物CD90、CD29、CD147呈陽性表達,CD34、CD45呈陰性表達;③流式細胞儀細胞凋亡檢測結果顯示,73.83%為活細胞,21.76%為死亡細胞,4.27%為凋亡細胞;④骨髓間充質(zhì)干細胞可誘導分化為成骨細胞與成脂細胞;⑤結果表明,分離培養(yǎng)的恒河猴骨髓間充質(zhì)干細胞生長活躍,有較強的增殖及多向分化能力。
[Abstract]:Background: the results of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in rhesus monkeys are very limited. The differentiation potential of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) from young rhesus monkeys is still unknown. Objective: to investigate the biological characteristics of bone marrow mesenchymal stem cells isolated from rhesus monkeys in vitro and to identify their growth curves and phenotypes. Methods: bone marrow mesenchymal stem cells of young rhesus monkeys were cultured by density gradient centrifugation and whole bone marrow adherent culture. The growth curves of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) of the 2nd and 7th generation were plotted by MTS method. The apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in the third generation and the expression of CD29, CD34, CD45, CD45, CD90, CD147 were detected by flow cytometry. The osteogenesis and adipogenic differentiation of the third generation bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were detected. Results and conclusion the first and second generation of bone marrow mesenchymal stem cells were incubated in the first and second days and the logarithmic growth period in the 3-7 days. After 8 days, the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells gradually slowed down and entered the plateau phase. The proliferation ability of the seventh generation cells was weaker than that of the second generation. 2 the positive expression of CD90, CD29, CD147, a marker on the surface of bone marrow mesenchymal stem cells, and the negative expression of CD34, CD45, and the results of apoptosis by flow cytometry showed that 73.83% were living cells and 21.76% were dead cells and 4.27% were apoptotic cells. (4) Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) could be induced to differentiate into osteoblasts and adipoblasts. The results showed that bone marrow mesenchymal stem cells isolated and cultured from rhesus monkeys were active in growth and had strong ability of proliferation and multidirectional differentiation.
【作者單位】: 昆明醫(yī)科大學第四附屬醫(yī)院云南省第二人民醫(yī)院眼科;中國醫(yī)學科學院昆明醫(yī)學生物研究所靈長類研究中心;
【基金】:云南省應用基礎研究面上項目(昆醫(yī)聯(lián)合專項)(2013FB109,2014FB074):恒河猴自體骨髓間充質(zhì)干細胞在體誘導為角膜內(nèi)皮樣細胞的實驗研究,恒河猴自體骨髓間充質(zhì)干細胞體外誘導分化為角膜內(nèi)皮樣細胞~~
【分類號】:R329.2
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,本文編號:1968714
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