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實驗用小型豬乙型腦炎病毒的分離鑒定

發(fā)布時間:2018-06-01 02:11

  本文選題:乙型腦炎病毒 + 分離; 參考:《中國比較醫(yī)學雜志》2017年03期


【摘要】:目的了解小型豬感染乙型腦炎病毒株的特點。方法豬腦組織經過處理,接種BHK21細胞,進行病毒培養(yǎng)、間接免疫熒光試驗、中和試驗、電鏡觀察,及通過逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)擴增新分離毒株E區(qū)段和PrM區(qū)段核苷酸序列,測序后進行基因型鑒定。結果 25只豬腦組織接種BHK_(21)細胞,有3個組織處理液能使BHK21細胞發(fā)生圓縮、集聚等病變;3個組織接種的BHK_(21)病變細胞滴片進行免疫熒光試驗,均產生強綠色熒光反應;中和實驗結果顯示3株新分離株中和效價均為1∶64;電鏡下可見直徑40nm左右球型病毒粒子;RT-PCR產物測序結果與疫苗株E區(qū)段核苷酸比較同源性均為95%;3株新分離株均為GIII型乙腦病毒。結論實驗表明小型豬場存在乙型腦炎病毒感染,為GIII型乙型腦炎病毒。
[Abstract]:Objective to investigate the characteristics of Japanese encephalitis virus infection in miniature pigs. Methods Pig brain tissues were treated, inoculated with BHK21 cells, cultured with virus, detected by indirect immunofluorescence assay, neutralized, observed by electron microscope, and amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The genotypes were identified after sequencing. Results of the 25 pig brain tissues inoculated with BHKS21) cells, 3 tissue treatments could make the BHK21 cells round and accumulate, and the three tissues inoculated with BHKS21) had a strong green fluorescence reaction. The neutralization titers of the three new isolates were all 1: 64, and the sequencing results of RT-PCR products of spherical virus particles with diameter of about 40nm were 95% and 95%, respectively, compared with the E region of the vaccine strain under electron microscope. GIII encephalitis B virus. Conclusion the results showed that there was encephalitis B virus infection in small pig farms and it was GIII type B encephalitis virus.
【作者單位】: 中國食品藥品檢定研究院國家實驗動物微生物遺傳檢測中心;
【分類號】:R-332;R512.32

【參考文獻】

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本文編號:1962461


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