本文選題：吸煙急性期 + 長期吸煙��； 參考：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文

【摘要】：背景和目的 高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)通過促進(jìn)膽固醇逆轉(zhuǎn)運、抗氧化和抗炎癥等功能,在抗動脈粥樣硬化中發(fā)揮了重要的作用.在臨床上,通過檢測血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),間接反映人體循環(huán)血液中HDL的水平.人們很早就發(fā)現(xiàn),HDL-C的水平和冠心病風(fēng)險負(fù)相關(guān),并且將提高HDL-C水平作為抗動脈粥樣硬化治療的靶標(biāo)之一.然而最近的研究表明,HDL的功能在急性應(yīng)激或慢性炎癥狀態(tài)等條件下將被削弱甚至發(fā)生逆轉(zhuǎn).于是人們認(rèn)識到,HDL的功能比水平更重要. 脂質(zhì)氧化是動脈粥樣硬化起始的核心事件,通過誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞生成和凋亡而形成粥樣斑塊.吸煙是動脈粥樣硬化的獨立危險因素.大量研究表明,吸煙能夠使低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的水平升高而使HDL-C水平降低,并且戒煙能夠使血脂成分改善.然而,人們對吸煙過程中HDL的功能變化尚不清楚.本研究的目的,即針對既往無吸煙史和有長期吸煙史的健康人群,測定其在單次吸煙前后HDL抗氧化功能的改變,并且嘗試探尋其機(jī)制. 方法 1.收集20名無吸煙史和22名長期吸煙的健康受試者吸煙前后的血清樣本,將血樣分成4組：無吸煙史組單次吸煙前、無吸煙史組單次吸煙后、長期吸煙組單次吸煙前、長期吸煙組單次吸煙后,凍存于-80℃待用 2.通過密度梯度超速離心方法分離高密度脂蛋白,BCA法測定其濃度,瓊脂糖凝膠電泳鑒定其純度 3.酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測HDL上淀粉樣蛋白A(SAA)的含量 4.將各個受試者的LDL分別通過檢測紫外光(波長234nm)下OD值,以評價LDL基礎(chǔ)氧化程度；之后加入銅離子氧化,記錄氧化曲線及各個參數(shù),以氧化速度達(dá)峰時間(t at Vmax)和最大OD值(ODmax)分別評估LDL的氧化易感性和最終氧化程度 5.將無吸煙史組單次吸煙前低密度脂蛋白等比例混合,作為正常態(tài)LDL(LDLpool).先將各個受試者的HDL分別通過檢測紫外光(波長234nm)下OD值,以評價HDL基礎(chǔ)氧化程度;再將其與LDLpoo等比例混合,加入銅離子氧化,記錄氧化曲線及各個參數(shù),以遲滯時間(Tlag)和氧化速度達(dá)峰時間評估HDL抗氧化性能 6.熒光法測定血清對氧磷酶-1(PON-1)活性 結(jié)果 1.無吸煙史組和長期吸煙組單次吸煙后心率升高(67.2±13.4對71.5±9.9,p0.05；74.8±10.5對78.4±9.2,p0.05),收縮壓明顯升高(116.2±13.4對119.8±13.3,p0.01；123.4±2.8對126.2±3.9,p0.01),舒張壓明顯升高(71.0±8.9對76.8±10.0,p0.01；70.8±8.0對74.2±7.5,0.01). 2.長期吸煙組膽紅素,無論是總膽紅素或直接膽紅素均較無吸煙史組明顯降低(15.15±5.42對10.80±4.05,p0.01；5.07±2.20對3.53±1.21,p0.01),亦低于無吸煙史組單次吸煙后(14.37±7.05對10.80±4.05,p0.05；4.84±2.59對3.53±1.21,p0.05). 3.長期吸煙組單次吸煙后尿酸升高(273.7±56.9對323.8±49.4,p0.05). 4.無吸煙史組單次吸煙后,SAA水平明顯升高(10.07±4.37對15.83±8.50,p0.01). 5.長期吸煙組LDL基礎(chǔ)OD值,明顯高于無吸煙史組及其單次吸煙后(0.209±0.025對0.276±0.054,p0.01；0.217±0.052對0.276±0.054,p0.01). 6.長期吸煙組LDL氧化速度達(dá)峰時間低于無吸煙史組及其單次吸煙后(52.5±15.2對45.0±8.7,p0.05；53.9±14.9對45.0±8.7,p0.01)；長期吸煙組吸煙后最大OD值升高(0.580±0.162對0.707±0.118,p0.05). 7.無吸煙史組或長期吸煙組單次吸煙后遲滯時間均有所下降(96.0±14.4對88.5±10.8,p0.05；106.0±15.6對89.4±20.3,p0.05),長期吸煙者遲滯時間高于無吸煙史組及其單次吸煙后(96.0±14.4對106.0±15.6,p0.05；89.4±20.3對106.0±15.6,p0.01)；長期吸煙組吸煙前后(下降)差值,相比無吸煙史組增大. 8.長期吸煙組氧化速度達(dá)峰時間高于無吸煙史組及其單次吸煙后(135.5±16.7對145.4±14.0,p0.05；128.1±17.7對145.4±14.0,p0.01). 結(jié)論 1.單次吸煙后,無吸煙史者和長期吸煙者,其機(jī)體均處于急性應(yīng)激狀態(tài). 2.長期吸煙者其機(jī)體處于慢性氧化狀態(tài),膽紅素等內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)被過度消耗. 3.單次吸煙使無吸煙史者和長期吸煙者HDL抗氧化能力均出現(xiàn)降低. 4.長期吸煙者HDL抗LDL氧化能力,較無吸煙史者增高,但是仍然不能糾正長期吸煙所導(dǎo)致的慢性氧化狀態(tài). 5.長期吸煙者在急性應(yīng)激時,HDL抗氧化性能降低更明顯.
[Abstract]:Background and Purpose

High density lipoprotein ( HDL ) plays an important role in anti - atherosclerosis by promoting cholesterol reversal , anti - oxidation and anti - inflammation . It has been found that HDL - C is inversely correlated with coronary heart disease risk by detecting serum high density lipoprotein cholesterol ( HDL - C ) . However , recent studies have shown that the function of HDL is impaired or even reversed in acute stress or chronic inflammatory conditions .

Lipid oxidation is a core event of atherosclerosis . Smoking is an independent risk factor for atherosclerosis . Smoking is an independent risk factor for atherosclerosis . A large number of studies have shown that smoking enables low density lipoprotein cholesterol ( LDL - C ) levels to lower HDL - C levels , and smoking cessation can improve the blood lipid component .

method

1 . Serum samples before and after smoking in 20 healthy subjects without smoking history and 22 long - term smoking were collected , and the blood samples were divided into 4 groups : before the single smoking in the smoking history group , after a single smoking in the smoking history group , after a single smoking in the long - term smoking group , after a single smoking in the long - term smoking group , the long - term smoking group was frozen at - 80.degree . C . for use .

2 . High density lipoprotein was isolated by density gradient hypervelocity centrifugation . The purity of high density lipoprotein was determined by BCA method , and its purity was determined by agarose gel electrophoresis .

3.Enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) to detect the content of amyloid A ( SAA ) in HDL

4 . The LDL of each subject was measured by detecting the OD value of ultraviolet light ( wavelength of 254 nm ) , respectively , to evaluate the degree of oxidation of LDL base ;
After the oxidation of copper ions , the oxidation curve and the parameters were recorded , the oxidation susceptibility and final oxidation degree of LDL were assessed by oxidation rate up to peak time ( t at Vmax ) and maximum OD value ( ODmax ) .

5 . The low density lipoprotein was mixed with low density lipoprotein in non - smoking history group as normal low density lipoprotein ( LDLpool ) . HDL of each subject was first measured by detecting the OD value of ultraviolet light ( wavelength of 254 nm ) to evaluate the degree of oxidation of HDL base , and then mixed with LDLpoo and other ratios , then added with copper ion oxidation , recorded oxidation curve and various parameters , and the anti - oxidation performance of HDL was assessed with hysteresis time ( Tlag ) and oxidation speed up to peak time .

6 . Determination of serum paraoxalidase - 1 ( PON - 1 ) activity by fluorimetry

Results

1 . After single smoking , the heart rate was increased ( 67.2 鹵 13.4 vs 71.5 鹵 9.9 , p < 0.05 ) .
74.8 鹵 10.5 ( 78.4 鹵 9.2 , p < 0.05 ) , systolic blood pressure was significantly increased ( 116.2 鹵 13.4 vs 119.8 鹵 13.3 , p0.01 ) ;
123.4 鹵 2.8 ( 126.2 鹵 3.9 , p0.01 ) and diastolic blood pressure increased significantly ( 71.0 鹵 8.9 vs 76.8 鹵 10.0 , p0.01 ) ;
70.8 鹵 8.0 vs 74.2 鹵 7.5 , 0.01 ) .

2 . The bilirubin of long - term smoking group , whether total bilirubin or direct bilirubin , was significantly lower than that in non - smoking history group ( 15.15 鹵 5.42 vs 10.80 鹵 4.05 , p0.01 ) .
5.07 鹵 2.20 vs 3.53 鹵 1.21 , p0.01 and 14.37 鹵 7.05 to 10.80 鹵 4.05 , p0.01 respectively after single smoking in non - smoking history group ( 14.37 鹵 7.05 vs 10.80 鹵 4.05 , p0.01 ) ;
4.84 鹵 2.59 vs 3.53 鹵 1.21 , p0.05 ) .

3 . After single smoking in the long - term smoking group , uric acid increased ( 273.7 鹵 56.9 vs 323.8 鹵 49.4 , p0.01 ) .

4 . After single smoking , the SAA level increased significantly ( 10.07 鹵 4.37 vs 15.83 鹵 8.50 , p0.01 ) .

5 . The OD value of LDL in long - term smoking group was significantly higher than that of non - smoking history group and its single smoking ( 0.209 鹵 0.025 vs 0.276 鹵 0.054 , p0.01 ) .
0.217 鹵 0.052 vs 0.276 鹵 0.054 , p0.01 ) .

6 . LDL oxidation rate of long - term smoking group was lower than that of non - smoking history group and single smoking group ( 52.5 鹵 15.2 vs 45.0 鹵 8.7 , p < 0.05 ) .
53.9 鹵 14.9 ( 45.0 鹵 8.7 , p0.01 ) ;
The maximum OD value after smoking in the long - term smoking group increased ( 0.580 鹵 0.162 vs 0.707 鹵 0.118 , p < 0.05 ) .

7 . After a single smoking group or long - term smoking group , the lag time was decreased ( 96.0 鹵 14.4 vs 85.5 鹵 10.8 , p < 0.05 ) .
106.0 鹵 15.6 ( 89.4 鹵 20.3 , p < 0.05 ) , the lag time of long - term smokers was higher than that in the non - smoking history group and its single smoking ( 96.0 鹵 14.4 vs 106 . 0 鹵 15.6 , p . 05 ) .
89.4 鹵 20.3 ( 106.0 鹵 15.6 , p0.01 ) ;
The difference of smoking before and after smoking in the long - term smoking group increased compared with the non - smoking history group .

8 . The oxidation rate of long - term smoking group was higher than that of non - smoking history group and its single smoking ( 135.5 鹵 16.7 vs 145.4 鹵 14.0 , p < 0.05 ) .
128.1 鹵 17.7 ( 145.4 鹵 14.0 , p0.01 ) .

Conclusion

1 . After a single smoking , there were no smokers and long - term smokers , and all of them were in an acute stress state .

2 . Long - term smokers whose organism is in chronic oxidation state , bilirubin and other endogenous antioxidant substances are overconsumed .

3 . There was a decrease in the anti - oxidation ability of non - smokers and long - term smokers .

4 . Long - term smoker HDL anti - LDL oxidation resistance , higher than non - smoking history , but still cannot correct chronic oxidation state caused by long - term smoking .

5 . In the case of acute stress , the anti - oxidation performance of HDL was lower .
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R363

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1942305