抗鼠跨膜型TNF-α多克隆抗體設計和制備
本文選題:跨膜型TNF-α + 多克隆抗體。 參考:《暨南大學學報(自然科學與醫(yī)學版)》2017年01期
【摘要】:目的:設計和制備區(qū)分鼠跨膜型腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和分泌型TNF-α的多克隆抗體.方法:采用抗原肽預測軟件對跨膜型TNF-α表位進行預測,合成跨膜型TNF-α24個氨基酸多肽,并與匙孔堿血藍蛋白偶聯(lián),家兔皮背部多點注射,收集分離血清,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗和流式細胞術鑒定其特異性.結果:制備出高效價的抗血清,該抗血清可特異性結合免疫原多肽,不與分泌型TNF-α發(fā)生交叉反應,流式細胞術顯示該抗血清可與細胞系NIH 3T3表達的跨膜型TNF-α發(fā)生特異性結合.結論:成功制備了跨膜型TNF-α特異性多克隆抗體,為區(qū)分跨膜型TNF-α和分泌型TNF-α生物學作用提供了新工具.
[Abstract]:Aim: to design and prepare polyclonal antibodies against transmembrane tumor necrosis factor- 偽 (TNF- 偽) and secretory TNF- 偽 (TNF- 偽). Methods: the antigenic peptide prediction software was used to predict the transmembrane TNF- 偽 epitope. 24 amino acid peptides of transmembrane TNF- 偽 were synthesized and coupled with keyhole alkaloid hemocyanin. The rabbit skin was injected with multiple points to collect and isolate serum. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) and flow cytometry (FCM) were used to identify its specificity. Results: a high titer antiserum was prepared. The antiserum could specifically bind to the immunogen peptide and did not cross react with secretory TNF- 偽. Flow cytometry showed that the antiserum could specifically bind to the transmembrane TNF- 偽 expressed in cell line NIH 3T3. Conclusion: transmembrane TNF- 偽 specific polyclonal antibody was successfully prepared, which provides a new tool for distinguishing the biological effects of transmembrane TNF- 偽 and secretory TNF- 偽.
【作者單位】: 貴州省骨科醫(yī)院檢驗科;貴州省人民醫(yī)院檢驗科;
【基金】:貴州省科學技術基金(20142086)
【分類號】:R392
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本文編號:1938861
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