本文選題：海藻酸鹽 + 骨髓間充質(zhì)干細胞　； 參考：《寧波大學》2012年碩士論文

【摘要】：【目的】：應用骨髓間充質(zhì)干細胞組織工程技術，以海藻酸鹽作為支架，進行治療類風濕性關節(jié)炎的動物實驗研究。探討海藻酸鹽組織工程技術治療類風濕性關節(jié)炎的可靠方法，通過動物實驗研究海藻酸鹽支架修復RA軟骨缺損的關鍵技術。為臨床應用該技術治療RA提供實驗基礎和科學數(shù)據(jù)。 【方法】：將新西蘭長耳白兔分為正常對照組、佐劑性模型組和海藻酸鹽支架治療組。模型組和治療組兔膝關節(jié)內(nèi)注入弗氏完全佐劑建立佐劑性關節(jié)炎模型，對照組兔膝關節(jié)則注射等量生理鹽水。取治療組的骨髓，用percoll法分離出骨髓間充質(zhì)干細胞，體外培養(yǎng)并傳代，傳至P3代用誘導培養(yǎng)液誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化，，并制備好海藻酸鹽支架。將誘導成功的軟骨細胞與制作好的海藻酸鹽支架混合注入治療組的新西蘭長耳白兔病變膝關節(jié)。對照組和模型組關節(jié)注射等量的生理鹽水。治療一個月后處死兔，觀察正常組、治療組、模型組的兔膝關節(jié)，取兔子的膝關節(jié)進行HE染色和免疫組織化學染色，觀察海藻酸鹽支架修復關節(jié)軟骨的情況。 【結果】：原代培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細胞成梭形，漩渦狀生長，誘導分化后的細胞呈現(xiàn)多角形，誘導成軟骨的細胞經(jīng)II型膠原免疫組化和阿利新藍染色顯陽性，并且RT-PCR檢測有II型膠原mRNA表達。誘導成功的軟骨細胞和制備完畢的支架混合，并測試支架的機械強度為20.05g/cm~2。組織形態(tài)學結果顯示，治療組與模型組比較，治療組關節(jié)炎癥反應明顯減輕，軟骨缺損得到明顯修復。 【結論】：以骨髓間充質(zhì)干細胞為種子細胞，經(jīng)過誘導分化為軟骨細胞并制備海藻酸鹽支架，可在一定程度上促進兔佐劑性關節(jié)炎軟骨缺損的修復。
[Abstract]:Objective : To study the technique of bone marrow mesenchymal stem cell tissue engineering to treat rheumatoid arthritis by using alginate as scaffold . The key technology of alginate scaffold in treating rheumatoid arthritis is discussed . The key technology of repairing RA cartilage defect with alginate scaffold is studied through animal experiment . The experimental foundation and scientific data are provided for clinical application of this technique to treat RA .

Methods : New Zealand white rabbits were divided into normal control group , adjuvant model group and alginate scaffold treatment group . The model group and the treatment group rabbits were injected with adjuvant arthritis model .

The results showed that the bone marrow mesenchymal stem cells cultured in primary culture were spindle - shaped and spiral - shaped , and the cells after induced differentiation showed polygonal shape , and the cells induced into the cartilage were positive by type II collagen immunohistochemistry and alissilla staining , and the mechanical strength of the scaffold was 20.05 g / cm ~ 2 . The results showed that the inflammatory response of the treated group was obviously reduced compared with the model group , and the cartilage defect was obviously repaired .

Conclusion : Bone marrow mesenchymal stem cells are used as seed cells to induce differentiation into chondrocytes and to prepare alginate scaffolds , which can promote the repair of articular cartilage defects in rabbits to some extent .
【學位授予單位】：寧波大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R329

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本文編號：1930569