Agrin對(duì)體外損傷大鼠星形細(xì)胞遷移的作用
本文選題:集聚蛋白 + 星形細(xì)胞; 參考:《華中科技大學(xué)》2011年碩士論文
【摘要】:目的初步探討外源性agrin對(duì)體外機(jī)械性損傷的大鼠大腦皮質(zhì)星形細(xì)胞遷移的影響。 方法 1.大鼠大腦皮質(zhì)星形細(xì)胞原代培養(yǎng)、純化及傳代。 2.機(jī)械性劃傷的復(fù)制和星形細(xì)胞遷移能力的測(cè)定:一次傳代的單層培養(yǎng)星形細(xì)胞采用移液器藍(lán)色槍頭作“十”字形劃傷,以遷移入劃傷區(qū)星形細(xì)胞數(shù)(Na)和星形細(xì)胞距劃傷邊緣最大遷移距離(Dmax),作為評(píng)價(jià)agrin對(duì)星形細(xì)胞遷移影響的指標(biāo)。 3.觀察劃傷后0h、6h、12h、24h、48h、72h時(shí)間點(diǎn)體外培養(yǎng)星形細(xì)胞的Na和Dmax值,確定劃傷后星形細(xì)胞遷移活躍時(shí)間段。應(yīng)用不同濃度的外源性agrin (0ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml),于劃傷后60h觀察對(duì)損傷星形細(xì)胞Na和Dmax的影響。在此基礎(chǔ)上,選定agrin作用濃度組(5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml)及傷后不同時(shí)間點(diǎn)(24h、48h、60h),觀察agrin對(duì)星形細(xì)胞遷移影響。Dmax測(cè)定用IPP6.0軟件,所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 1.劃傷72h星形細(xì)胞的Na和Dmax值均較傷后48h增加最顯著(P0.0001)。 2.劃傷后60h外源性agrin 5ng/ml組、10ng/ml組及20ng/ml組均較對(duì)照組星形細(xì)胞Na和Dmax值均有顯著增加(P0.05)。100ng/ml組,星形細(xì)胞的Na和Dmax則顯著減少(P0.05)。 3.外源性agrin 5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml濃度組和在傷后24h、48h、60h,星形細(xì)胞的Na和Dmax均較對(duì)照組顯著增加(P0.05),以10ng/ml濃度組對(duì)于星形細(xì)胞遷移影響最為明顯(P0.05)。 結(jié)論 1.星形細(xì)胞在機(jī)械性劃傷12h后開(kāi)始出現(xiàn)遷移,劃傷后48h-72h星形細(xì)胞遷移能力明顯增加; 2.外源性agrin的加入可影響損傷星形細(xì)胞的遷移。Agrin在一定濃度(5~20ng/ml)和作用時(shí)間范圍(24~48h)內(nèi)可顯著促進(jìn)損傷星形細(xì)胞遷移;但過(guò)高的agrin作用濃度(如50~100ng/ml)則抑制星形細(xì)胞遷移。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of exogenous agrin on the migration of astrocytes in rat cerebral cortex after mechanical injury in vitro. Method 1. Primary culture, purification and passage of astrocytes from rat cerebral cortex. 2. Replication of mechanical scratches and determination of the ability of stellate cells to migrate: a single passage of astrocytes was cut in the form of "ten" zigzag by using a liquidator with a blue gun head. The effect of agrin on astrocyte migration was evaluated by the maximum migration distance between the astrocytes and the edge of the scratched area (Na) and the maximum migration distance between the astrocytes and the edge of the scratches. 3. The Na and Dmax values of cultured astrocytes were observed at 0 h, 6 h, 12 h, 24 h, 48 h and 72 h after scratch, and the active period of astrocyte migration was determined. The effects of different concentrations of exogenous agrin on the Na and Dmax of astrocytes were observed at 60 h after scratch with 10 ng / ml 10 ng / ml 20 ng / ml 50 ng / ml / ml 100 ng / ml 路ml / ml of different concentrations of exogenous agrin / mg / ml 5 ng / ml ~ 5 ng / ml ~ (-1) ~ 10 ng / ml ~ (-1) ~ 20 ng / ml ~ (-1). On this basis, 5 ng / ml 10 ng / ml of agrin and 20 ng / ml ~ 20 ng / ml) and 24 h ~ 48 h ~ (-1) ~ 60 h after injury were selected to observe the effect of agrin on the migration of astrocytes. IPP6.0 software was used to determine the effect of agrin on the migration of astrocytes. All the data were analyzed statistically by SPSS13.0 software. Result 1. The Na and Dmax values of astrocytes were significantly increased at 72 h compared with 48 h after injury (P 0.0001). 2. The Na and Dmax values of astrocytes in 10 ng / ml group and 20ng/ml group were significantly higher than those in control group at 60 h after scratch, while Na and Dmax in astrocytes decreased significantly compared with those in control group. 3. Na and Dmax of astrocytes in exogenous agrin 5 ng / ml 10 ng / ml 20 ng / ml group and at 24 h after injury at 48 h or 60 h after injury were significantly increased compared with the control group, especially in the 10ng/ml group, which had the most significant effect on the migration of astrocytes. Conclusion 1. The migration of astrocytes began to occur 12 hours after mechanical scratch, and the migration ability of 48h-72h astrocytes increased significantly after scratching. 2. The addition of exogenous agrin could affect the migration of injured astrocytes. Agrin could significantly promote the migration of injured astrocytes within a certain concentration of 20 ng / ml and within a time range of 244h, but too high concentration of agrin (such as 50 ~ 100ng / ml) inhibited the migration of astrocytes.
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R363
【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1912117
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