本文選題：肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞 + 肺成纖維細(xì)胞　； 參考：《昆明醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文

【摘要】：[目的]通過構(gòu)建礦粉誘導(dǎo)永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮轉(zhuǎn)化過程中與大鼠肺成纖維細(xì)胞相互作用的細(xì)胞共培養(yǎng)模型,探討肺成纖維細(xì)胞作為腫瘤基質(zhì)成纖維細(xì)胞在肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化中的作用。 [方法] (1)選用200μg/ml個(gè)舊錫礦礦粉,分別對(duì)永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(RLE-6TN)及永生化大鼠肺成纖維細(xì)胞(RFL-6)染毒,每次染毒72h,隔代染毒直至第20代,自第21代起分組共培養(yǎng)至第40代。(2)倒置顯微鏡觀察活細(xì)胞形態(tài)。(3)電鏡觀察肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞染毒前后超微結(jié)構(gòu)改變。(4)流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期變化。(5)刀豆凝集素實(shí)驗(yàn)。(6)錨著獨(dú)立性生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。(7)免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞高分子角蛋白改變、SP-B改變,成纖維細(xì)胞活化標(biāo)志α-SMA、以及上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化標(biāo)志FHIT和Ki-67。(8)免疫印跡檢測(cè)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)SP-C改變。 [結(jié)果] (1)經(jīng)過個(gè)舊錫礦粉礦粉20代隔代染毒后,肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,超微結(jié)構(gòu)改變,板層小體消失；SP-B、SP-C表達(dá)下降,但各項(xiàng)惡性轉(zhuǎn)化指標(biāo)均為陰性；成纖細(xì)胞活化標(biāo)志α-SMA陽(yáng)性,說明其已被活化。(2)經(jīng)過20代共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)染毒肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)進(jìn)一步改變,近似于惡性細(xì)胞；刀豆凝集素實(shí)驗(yàn)、錨著獨(dú)立性生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)均為陽(yáng)性；FHIT表達(dá)逐步下降而Ki-67表達(dá)趨于增強(qiáng),其中與染毒成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)組表現(xiàn)更為顯著,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)未染毒肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞與肺成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)后,未見顯著差異。(4)活化后的肺成纖維細(xì)胞經(jīng)與染毒肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞共培養(yǎng)其α-SMA表達(dá)較對(duì)照組增強(qiáng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 [結(jié)論] (1)單純以200ug/ml礦粉作用20代,不足以使RLE-6TN細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化,而與礦粉作用的成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)能促使上皮細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。(2)在礦粉誘導(dǎo)RLE-6TN上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的過程中存在FHIT蛋白的丟失,并伴隨Ki-67的表達(dá)增高,且這一現(xiàn)象能被成纖維細(xì)胞所促進(jìn)。(3)礦粉誘導(dǎo)可導(dǎo)致RLE-6TN上皮細(xì)胞的增殖活性增強(qiáng)、Ki-67高表達(dá),與成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)后,增殖活性的升高尤為明顯。(4)200ug/ml礦粉能誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞RFL-6活化,繼而表達(dá)α-SMA,其活化能被經(jīng)礦粉作用的上皮細(xì)胞所促進(jìn)。
[Abstract]:Objective : To investigate the role of lung fibroblasts as tumor stromal fibroblasts in the transformation of alveolar type II epithelial cells by constructing a cell co - culture model of the interaction between lung fibroblasts in rat alveolar type II epithelial cells induced by mineral powder .

The changes of cell cycle of alveolar type 鈪，

本文編號(hào)：1887695