本文選題：人骨髓間充質(zhì)干細胞 + 白細胞介素-　； 參考：《生物工程學(xué)報》2017年04期

【摘要】：構(gòu)建人IL-34真核表達載體并將其轉(zhuǎn)染到人骨髓間充質(zhì)干細胞,觀察高表達IL-34的骨髓間充質(zhì)干細胞對THP-1細胞的影響。PCR擴增IL-34 DNA,并將其克隆到真核表達載體pIRES2-EGFP;將構(gòu)建成功的重組體轉(zhuǎn)染到骨髓間充質(zhì)干細胞,Western blotting和ELISA分析IL-34在細胞中的表達;用高表達IL-34的骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清液來培養(yǎng)THP-1細胞,Real-time PCR分析THP-1細胞中IL-10和TNFα的表達變化。經(jīng)雙酶切和測序鑒定,成功構(gòu)建了pIRES2-EGFP-IL-34重組體;轉(zhuǎn)染至骨髓間充質(zhì)干細胞的IL-34可以促進THP-1細胞表達IL-10和TNFα。結(jié)果表明,骨髓間充質(zhì)干細胞表達分泌的IL-34對THP-1有調(diào)節(jié)作用。
[Abstract]:The human IL-34 eukaryotic expression vector was constructed and transfected into human bone marrow mesenchymal stem cells, and the effect of bone marrow mesenchymal stem cells with high expression of IL-34 on THP-1 cells was observed and IL-34 DNA was amplified by.PCR, and it was cloned to eukaryotic expression vector pIRES2-EGFP, and the constructed recombinant was transfected into bone marrow mesenchymal stem cells, Western blotting and ELI. The expression of IL-34 in cells was analyzed by SA; THP-1 cells were cultured with supernatant of bone marrow mesenchymal stem cells with high expression of IL-34. The expression of IL-10 and TNF alpha in THP-1 cells was analyzed by Real-time PCR. The pIRES2-EGFP-IL-34 recombinant was successfully constructed by double enzyme digestion and sequencing, and the IL-34 of transfected to bone marrow mesenchymal stem cells could be promoted. THP-1 cells were used to express IL-10 and TNF alpha. The results showed that IL-34 expressed in bone marrow mesenchymal stem cells had a regulatory effect on THP-1.

【作者單位】： 寧波市第二醫(yī)院;
【基金】：寧波市自然科學(xué)基金(No.2016A610139) 寧波科技創(chuàng)新團隊項目(No.2011B82016)資助~~
【分類號】：R329.2

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本文編號：1873346