發(fā)布時間：2018-05-08 22:30

  本文選題：金黃色葡萄球菌 + 感染��； 參考：《中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版)》2016年04期

【摘要】：目的建立穩(wěn)定型生物發(fā)光臨床株金黃色葡萄球菌假體周圍關(guān)節(jié)感染(PJI)動物模型并探討其可行性及應(yīng)用價值。方法應(yīng)用噬菌體Phi11侵染帶Lux發(fā)光基因的標準菌株BD1652,并通過噬菌體轉(zhuǎn)導(dǎo)將Lux基因?qū)隤JI臨床菌株金葡菌ST1792基因組DNA,進而構(gòu)建成穩(wěn)定型生物發(fā)光臨床菌株ST1792-Lux。通過抽紙牌,將10只健康BALB/c小鼠隨機均分為實驗組和對照組,使用克氏針作為兩組模型動物的左膝關(guān)節(jié)假體。術(shù)中實驗組左膝關(guān)節(jié)內(nèi)注入10μl(105CFU)ST1792-Lux菌液,對照組注入等量0.9%氯化鈉溶液,術(shù)后1、3、7、14 d,采用活體成像系統(tǒng)(IVIS)檢測生物發(fā)光強度隨時間變化;并于術(shù)后2周觀察小鼠左膝關(guān)節(jié)病理學(xué)變化。以非配對t檢驗對ST1792-Lux和ST1792的生物膜形成能力和同一時間點實驗組與對照組小鼠左膝平均生物發(fā)光強度進行比較分析。結(jié)果經(jīng)臨床株篩選,噬菌體Phi11轉(zhuǎn)導(dǎo)獲得生物發(fā)光菌株"ST1792-Lux",無抗生素篩選條件下連續(xù)傳代培養(yǎng)48 h,ST1792-Lux穩(wěn)定發(fā)光;Lux基因重組于ST1792基因組DNA內(nèi),較之野生株ST1792,ST1792-Lux在生長能力和不同培養(yǎng)條件下成膜能力(tTSB=1.16,1.29;tTSBG=0.38,0.31;P均0.05)方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義。IVIS檢測示,術(shù)后每個時間點(1、3、7和14 d),實驗組較對照組的左膝平均生物發(fā)光強度均明顯增高(t=9.13,10.72,14.48,7.46;P均0.05)。結(jié)論本研究成功建立了穩(wěn)定生物發(fā)光臨床株S.aureus PJI動物模型,其穩(wěn)定性高、重復(fù)性好,可用于臨床株S.aureus PJI的致病分子機制和各種干預(yù)措施有效性的體內(nèi)研究。
[Abstract]:Objective to establish a stable bioluminescence clinical strain of Staphylococcus aureus periprosthetic joint infection (PJI) animal model and explore its feasibility and application value. Methods the standard strain BD1652 with Lux luminescence gene was infected with phage Phi11, and the Lux gene was transfected into ST1792 genomic DNA of PJI clinical strain ST1792 by phage transduction, and then the stable bioluminescence clinical strain ST1792-Lux. was constructed. By playing cards, 10 healthy BALB/c mice were randomly divided into experimental group and control group. Kirschner needle was used as the prosthesis of left knee joint in two groups of model animals. 10 渭 l(105CFU)ST1792-Lux bacterial solution was injected into the left knee joint of the experimental group and 0.9% sodium chloride solution was injected into the control group. The bioluminescence intensity was measured by living imaging system at 14 days after the operation, and the pathological changes of the left knee joint were observed at 2 weeks after operation. The biofilm forming ability of ST1792-Lux and ST1792 and the average bioluminescence intensity of the left knee of the experimental group and the control group at the same time point were compared and analyzed by non-paired t test. Results the bioluminescent strain "ST1792-Lux" was obtained by phage Phi11 transduction. After 48 h culture without antibiotic screening, ST1792-Lux gene was recombined into ST1792 genomic DNA. Compared with wild strain ST1792, ST1792-Lux had no significant difference in growth ability and membrane forming ability under different culture conditions. The mean bioluminescence intensity of the left knee in the experimental group was significantly higher than that in the control group on the 7th and 14th day after operation. The mean bioluminescence intensity of the left knee in the experimental group was significantly higher than that in the control group. Conclusion the animal model of stable bioluminescence clinical strain S.aureus PJI has been successfully established in this study. The animal model is stable and reproducible. It can be used to study the pathogenetic molecular mechanism of clinical strain S.aureus PJI and the effectiveness of various intervention measures in vivo.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院骨科;上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院檢驗科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81472108)
【分類號】：R-332;R687.4;R318.17

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本文編號：1863380