L-精氨酸激活人肝細(xì)胞中內(nèi)源凝血因子Ⅷ的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2018-05-01 13:17
本文選題:人凝血因子Ⅷ + L-精氨酸; 參考:《重慶醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文
【摘要】:目的利用L-精氨酸加入人肝細(xì)胞LO2培養(yǎng)基中,觀察LO2中內(nèi)源凝血因子Ⅷ(coagulation factor Ⅷ,F(xiàn)Ⅷ)的表達(dá)情況,研究L-精氨酸激活LO2中內(nèi)源FⅧ表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。 方法將LO2分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組加入L-精氨酸(終濃度為10mmol/L)分別培養(yǎng)24、36、48和60h,對(duì)照組用同體積滅菌水取代L-精氨酸培養(yǎng)。用RT-PCR方法檢測(cè)LO2中人FⅧ基因的轉(zhuǎn)錄水平并測(cè)序鑒定,,一期法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的人FⅧ促凝活性(FⅧ:C),Western blot分別檢測(cè)作用24、48h后LO2中人FⅧ基因的表達(dá),免疫熒光染色結(jié)合激光共聚焦顯微鏡觀察作用48h后LO2中人FⅧ的表達(dá)。 結(jié)果RT-PCR顯示,加L-精氨酸培養(yǎng)36、48、60h后,LO2中有人FⅧ mRNA的轉(zhuǎn)錄,而對(duì)照組未出現(xiàn)人FⅧ mRNA的轉(zhuǎn)錄;一期法檢測(cè)各組細(xì)胞上清液中人FⅧ:C差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㧐0.05);Western blot及激光共聚焦均觀察到加L-精氨酸培養(yǎng)48h后LO2中出現(xiàn)人FⅧ的表達(dá),而對(duì)照組的細(xì)胞中均未有人FⅧ的表達(dá)。 結(jié)論L-精氨酸可激活人正常肝細(xì)胞中內(nèi)源人FⅧ的表達(dá),其調(diào)控的機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
[Abstract]:Objective to observe the expression of endogenous coagulation factor 鈪
本文編號(hào):1829517
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