本文選題：血腦屏障模型 + 非小細(xì)胞肺癌　； 參考：《神經(jīng)解剖學(xué)雜志》2017年02期

【摘要】：目的:建立體外血腦屏障模型(blood-brain barrier model,BBBM),觀察非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549細(xì)胞對BBBM功能的影響。方法:早上將周細(xì)胞(pericytes,PC)接種到Transwell膜的外側(cè)面,星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocytes,AS)接種到12孔板內(nèi),8 h后將Transwell置入12孔板內(nèi),再將小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞(brain microvascular endothelial cells,BMEC)接種到transwell膜的內(nèi)側(cè)面,建立血腦屏障模型。模型建立后每天進(jìn)行試漏試驗(yàn)及跨內(nèi)皮電阻(transendothelial electrical resistance,TEER)測定,鑒定是否成模。成模后分為對照組與實(shí)驗(yàn)組,將A549細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)組BBBM內(nèi)室,共培養(yǎng)體系置于培養(yǎng)箱,于24 h、48 h、72 h后進(jìn)行電阻測定及辣根過氧化物酶滲透試驗(yàn),以評估BBBM的功能。分別于滲透試驗(yàn)進(jìn)行至2 h、6 h時取樣,根據(jù)樣本中辣根過氧化物酶濃度計算表觀滲透系數(shù)(apparent permeability coef錞cient,Papp)。結(jié)果:(1)部分血腦屏障模型在建立后3 d成模,4 d可全部成模。(2)A549細(xì)胞加入BBBM內(nèi)室共培養(yǎng)。(a)實(shí)驗(yàn)組TEER值與對照組比較:1 d后無顯著變化(P0.05);2 d后降低出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);3 d后降低具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01);(b)滲透試驗(yàn)與對照組比較:1 d后2 h及6 h滲透試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)組Papp均降低,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);2 d后實(shí)驗(yàn)組Papp升高,2 h滲透試驗(yàn)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),6 h滲透試驗(yàn)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);3 d后實(shí)驗(yàn)組Papp升高,2 h及6 h滲透試驗(yàn)均具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01)。結(jié)論:小鼠體外血腦屏障模型的功能可被人類非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞影響。體外共培養(yǎng)體系可用于研究肺癌腦轉(zhuǎn)移過程中腫瘤細(xì)胞與腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞間相互作用的分子機(jī)制。
[Abstract]:Aim: to establish a blood-brain barrier model in vitro to observe the effect of non-small cell lung cancer on the function of BBBM in NSCLC A549 cells. Methods: in the morning, the pericytes were inoculated into the outer side of the Transwell membrane, the astrocytes were inoculated into the 12-hole plate for 8 hours, the Transwell was placed into the 12-hole plate, and then the mouse brain microvascular endothelial cells were inoculated into the inner side of the transwell membrane. Blood brain barrier model was established. After the establishment of the model, the leakage test and transendothelial electrical resistance test were carried out every day to determine whether the model was formed. The model was divided into control group and experimental group. A549 cells were inoculated into the BBBM chamber of experimental group. The co-culture system was placed in incubator. After 24 h, 48 h and 72 h, resistance measurement and horseradish peroxidase permeation test were performed to evaluate the function of BBBM. The peroxidase concentration of horseradish peroxidase was calculated according to the apparent osmotic coefficient of permeability coef. Results part of the blood-brain barrier model was established 3 days after the establishment of the model and 4 days after the establishment of the model, all of the cells were added into the BBBM chamber co-culture. The TEER value of the experimental group was no significant change compared with that of the control group after 1 day. P0.05A549 cells decreased after 2 days. There was a statistical difference between the experimental group and the control group. Compared with the control group, the Papp of the experimental group at 2 h and 6 h after 1 day was significantly lower than that of the control group. However, there was no statistical difference between the experimental group and the experimental group after 2 days after P0.05, there was no significant difference between the experimental group and the experimental group. There was no significant difference in the permeability test between the experimental group and the experimental group. There was no significant difference between the experimental group and the experimental group. After 3 days, the Papp in the experimental group was increased for 2 h and 6 h, respectively. There was significant difference between the two groups (P0.01) and the experimental group (P0.01). Conclusion: the function of mouse blood-brain barrier model can be affected by human non-small cell lung cancer cells in vitro. In vitro coculture system can be used to study the molecular mechanism of the interaction between tumor cells and microvascular endothelial cells during brain metastasis of lung cancer.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科;紅河州第一人民醫(yī)院;
【基金】：云南省科技廳-昆明醫(yī)科大學(xué)應(yīng)用基礎(chǔ)研究聯(lián)合專項(xiàng)資金項(xiàng)目(2015FB033)
【分類號】：R734.2;R-332

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本文編號：1825414