本文選題：抗酶抑制因子 + 原核表達��； 參考：《生物技術通報》2017年03期

【摘要】：原核表達純化人抗酶抑制因子-1((antizyme inhibition factor-1,AZIN1),制備并鑒定抗AZIN1多克隆抗體。p ET-28a/AZIN1表達質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)后,IPTG誘導蛋白表達,利用Ni-NTA樹脂于變性條件下親和層析純化人AZIN1蛋白。將重組AZIN1蛋白用作抗原免疫BALB/c小鼠以制備多克隆抗體,ELISA檢測抗AZIN1抗體效價,Western bloting、細胞免疫熒光、細胞免疫化學方法檢測抗體的應用。結果顯示,重組p ET-28a/AZIN1表達質粒經(jīng)酶切及測序鑒定構建正確。細菌內重組AZIN1蛋白可被IPTG誘導表達并以包涵體的形式存在。用親和層析法能有效純化原核表達的AZIN1蛋白,該蛋白在小鼠體內能夠誘導抗AZIN1特異性抗體產(chǎn)生,血清效價達到1，

本文編號：1820068