發(fā)布時(shí)間：2018-04-25 21:16

  本文選題：血管緊張素Ⅱ受體 + 骨骼肌��； 參考：《中南大學(xué)》2012年博士論文

【摘要】：第一章血管緊張素Ⅱ受體活性對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注的調(diào)節(jié)作用 研究背景骨骼肌微循環(huán)是血漿和組織間液之間物質(zhì)交換的場(chǎng)所,骨骼肌微循環(huán)灌注量的改變對(duì)物質(zhì)交換起直接調(diào)節(jié)作用。腎素-血管緊張素(Renin-angiotensin system, RAS)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)血管張力及血流動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用,血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是RAS系統(tǒng)的主要生物活性物質(zhì),主要通過與其1型受體(AT1R)和2型受體(AT2R)結(jié)合發(fā)揮作用,AngⅡ?qū)T1R和AT2R具有相似的親和力。在大容量血管及阻力小動(dòng)脈,AT1R激活介導(dǎo)血管收縮,而AT2R激活可介導(dǎo)血管舒張。AT1R和AT2R在骨骼肌微循環(huán)中分布廣泛,AT1R活性及AT2R活性是否對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下骨骼肌微循環(huán)灌注起調(diào)節(jié)作用,并進(jìn)而影響骨骼肌葡萄糖利用及胰島素轉(zhuǎn)運(yùn),目前并不完全清楚。 目的給予AT1R拮抗劑氯沙坦和/或AT2R拮抗劑PD123319,觀察基礎(chǔ)狀態(tài)下骨骼肌循環(huán)灌注情況的變化,以明確AT1R活性及AT2R活性對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下骨骼肌微循環(huán)灌注的調(diào)節(jié)作用,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步觀察AT1R活性及AT2R活性對(duì)骨骼肌攝取胰島素和利用葡萄糖的影響。 方法(1)骨骼肌微循檢測(cè)實(shí)驗(yàn)：SD大鼠(20只)隨機(jī)分為氯沙坦給藥組、PD123319給藥組、氯沙坦+PD123319給藥組、氯沙坦+L-NAME給藥組,運(yùn)用造影增強(qiáng)超聲技術(shù)(Contrast-enhanced ultrasound, CEU)檢測(cè)各組大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量(Microvascular blood volume, MBV)的變化；(2)股動(dòng)脈血流檢測(cè)實(shí)驗(yàn)：SD大鼠(10只),隨機(jī)分為氯沙坦給藥組和PD123319給藥組,檢測(cè)實(shí)驗(yàn)過程中股動(dòng)脈血流變化；(3)骨骼肌葡萄糖利用測(cè)定實(shí)驗(yàn)：SD大鼠(20只)隨機(jī)分為氯沙坦給藥組、PD123319給藥組、氯沙坦+PD123319給藥組、氯沙坦±L-NAME給藥組,測(cè)定大鼠下肢動(dòng)靜脈葡萄糖差值以明確骨骼肌葡萄糖利用情況；(4)骨骼肌胰島素?cái)z取實(shí)驗(yàn)：SD大鼠(15只),隨機(jī)分為對(duì)照組、氯沙坦給藥組、氯沙坦+L-NAME給藥組,測(cè)定125-I胰島素的清除率以明確骨骼肌胰島素?cái)z取情況。 結(jié)果(1)AT1R拮抗劑氯沙坦給藥后,與基礎(chǔ)值相比,大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量顯著增加約3倍(p0.001),伴隨骨骼肌葡萄糖利用和胰島素?cái)z取的明顯增加(p0.05)。氯沙坦給藥不影響股動(dòng)脈血流及動(dòng)脈血壓。 (2)AT2R拮抗劑PD123319給藥后,與基礎(chǔ)值相比,大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量降低約80%(p0.001),伴隨骨骼肌葡萄糖利用明顯下降(p0.01)。PD123319給藥不影響股動(dòng)脈血流及動(dòng)脈血壓。 (3)在同時(shí)給予AT2R拮抗劑PD123319的情況下,氯沙坦增加骨骼肌微循環(huán)灌注量及葡萄糖攝取的作用被抑制(與基礎(chǔ)值相比,p0.05)。 (4)一氧化氮合成酶抑制劑L-NAME抑制一氧化氮產(chǎn)生后,氯沙坦增加骨骼肌微循環(huán)灌注量、葡萄糖利用及胰島素?cái)z取的作用均被抑制(與基礎(chǔ)值相比,p0.05) 結(jié)論(1)基礎(chǔ)AT1R活性限制骨骼肌微循環(huán)灌注量,并進(jìn)而影響骨骼肌葡萄糖利用和胰島素?cái)z��；基礎(chǔ)AT2R活性可增加骨骼肌微循環(huán)灌注量,從而增加骨骼肌葡萄糖利用和胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)。 (2)AT1R阻滯后增加骨骼肌微循環(huán)灌注、葡萄糖利用和胰島素?cái)z取的作用,由AT2R介導(dǎo),并依賴于一氧化氮的作用。 第二章血管緊張素Ⅱ受體活性對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下大鼠骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性的調(diào)節(jié)作用 研究背景骨骼肌是胰島素調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的主要場(chǎng)所,在作用于骨骼肌細(xì)胞之前,胰島素必須首先從循環(huán)血液中轉(zhuǎn)運(yùn)至骨骼肌組織間隙,胰島素的轉(zhuǎn)運(yùn)是決定其在骨骼肌中發(fā)揮調(diào)節(jié)葡萄糖代謝作用的限速步驟。在正常狀態(tài)下,胰島素可擴(kuò)張毛細(xì)血管前終末小動(dòng)脈,增加骨骼肌微循環(huán)灌注,擴(kuò)大物質(zhì)交換面積,促進(jìn)其自身轉(zhuǎn)運(yùn)作用。骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性正常,是保證胰島素調(diào)節(jié)糖代謝作用正常發(fā)揮的基礎(chǔ)。血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的過度激活影響胰島素在骨骼肌中發(fā)揮調(diào)節(jié)糖代謝的能力,RAS系統(tǒng)對(duì)于骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性是否有影響,目前尚無直接證據(jù)。我們?cè)诘谝徽聦?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),基礎(chǔ)狀態(tài)下,AT1R和AT2R活性對(duì)骨骼肌微循環(huán)灌注、葡萄糖利用及胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)具有調(diào)節(jié)作用。由于骨骼肌微循環(huán)灌注、胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)與微循環(huán)胰島素敏感性及胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力密切相關(guān),我們推測(cè)AT1R和AT2R活性可能對(duì)微循環(huán)胰島素敏感性發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,并進(jìn)而影響胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力。 目的觀察基礎(chǔ)狀態(tài)下AT1R和AT2R活性對(duì)胰島素微循環(huán)作用和調(diào)節(jié)糖代謝能力的影響。 方法(1)胰島素微循環(huán)作用和調(diào)節(jié)糖代謝能力實(shí)驗(yàn)：SD大鼠(15只)隨機(jī)分為對(duì)照組,氯沙坦給藥組和PD123319給藥組。對(duì)照組大鼠接受2小時(shí)胰島素鉗夾實(shí)驗(yàn)(3mU/kg.min),氯沙坦組大鼠在接受胰島素鉗夾試驗(yàn)同時(shí)給予氯沙坦靜脈注射以阻滯AT1R活性,PD123319組鼠在接受胰島素鉗夾試驗(yàn)同時(shí)給予PD123319持續(xù)輸注以阻滯AT2R活性。計(jì)算胰島素刺激的葡萄糖處置率(Glucose infusion rate, GIR),用于評(píng)價(jià)胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力；運(yùn)用造影增強(qiáng)超聲技術(shù)(Contrast-enhanced ultrasound, CEU)檢測(cè)各組大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量(MBV)的變化,用于評(píng)價(jià)微循環(huán)胰島素敏感性；整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中監(jiān)測(cè)動(dòng)脈血壓； (2)股動(dòng)脈血流檢測(cè)實(shí)驗(yàn)：SD大鼠(15只),分組及處理同上,檢測(cè)實(shí)驗(yàn)過程中股動(dòng)脈血流變化。 結(jié)果(1)對(duì)照組大鼠中,隨著胰島素的輸注,GIR逐漸升高,同時(shí)可觀察到MBV的增加,與基礎(chǔ)值相比MBV增加約1.5-2倍(P0.05)。 (2)在胰島素輸注的情況下,給予氯沙坦后可觀察到MBV進(jìn)一步升高,與基礎(chǔ)值相比升高約3倍(P0.05)；與對(duì)照組大鼠相比,氯沙坦給藥對(duì)GIR沒有進(jìn)一步影響(P0.05)。 (3)在胰島素輸注的情況下同時(shí)給予PD123319輸注,可觀察到胰島素增加MBV的作用消失(P0.05,與基礎(chǔ)值相比)；伴隨GIR顯著降低,與對(duì)照組大鼠相比,PD123319給藥后GIR下降約30%(P0.05)。 結(jié)論(1)基礎(chǔ)AT1R和AT2R活性影響胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力,AT1R活性限制胰島素刺激的骨骼肌處理葡萄糖的能力,AT2R活性對(duì)于胰島素正常調(diào)節(jié)糖代謝是必需的； (2)基礎(chǔ)AT1R和AT2R活性影響骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性,AT1R活性限制胰島素增加骨骼肌微循環(huán)灌注的能力,AT2R活性對(duì)于保持骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性正常是必需的。 第三章氯沙坦改善脂質(zhì)誘導(dǎo)的大鼠骨骼肌微循環(huán)胰島素抵抗 研究背景胰島素可通過增加骨骼肌微循環(huán)灌注,促進(jìn)自身轉(zhuǎn)運(yùn)至骨骼肌組織間隙,進(jìn)而發(fā)揮調(diào)節(jié)糖代謝的作用。在糖尿病、肥胖等情況下,胰島素增加微循環(huán)灌注的能力受損,即存在微循環(huán)胰島素抵抗。微循環(huán)胰島素抵抗限制了胰島素的轉(zhuǎn)運(yùn),影響胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力；微循環(huán)胰島素抵抗是導(dǎo)致葡萄糖利用異常和糖尿病微血管、大血管病變發(fā)生發(fā)展的重要因素。本課題組在第一章和第二章研究中發(fā)現(xiàn)：正常大鼠中,血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)和2型受體(AT1R)的活性與骨骼肌微循環(huán)灌注及胰島素敏感性密切相關(guān)；AT1R拮抗后,可增加正常大鼠微循環(huán)灌注及骨骼肌葡萄糖攝取,而阻滯AT2R可使微循環(huán)胰島素敏感性下降。在胰島素抵抗情況下,AT1R拮抗劑氯沙坦是否能夠改善骨骼肌微循環(huán)胰島素抵抗?fàn)顟B(tài),增加胰島素轉(zhuǎn)運(yùn),進(jìn)而改善糖代謝紊亂(代謝性胰島素抵抗)尚不完全清楚。 目的在脂質(zhì)輸注誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠模型中,觀察AT1R拮抗劑氯沙坦是否能夠改善骨髂肌微循環(huán)胰島素抵抗?fàn)顟B(tài),增加胰島素轉(zhuǎn)運(yùn),進(jìn)而改善代謝性胰島素抵抗。 方法(1)微循環(huán)胰島素抵抗實(shí)驗(yàn)：SD大鼠(20只)隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、氯沙坦治療組和L-NAME給藥組。對(duì)照組大鼠接受2小時(shí)胰島素輸注(3mU/kg.min)。模型組大鼠給予脂質(zhì)輸注3小時(shí),并接受2小時(shí)胰島素輸注；氯沙坦治療組大鼠給予脂質(zhì)及胰島素輸注,于胰島素輸注開始前給予氯沙坦(0.3mg/kg)；L-NAME給藥組大鼠接受脂質(zhì)、胰島素及氯沙坦給藥與氯沙坦治療組相同,同時(shí)給予一氧化氮合成酶抑制劑L-NAME (50ug/kg.min)輸注。各組大鼠計(jì)算胰島素刺激的葡萄糖處置率(GIR),用于評(píng)價(jià)胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力；運(yùn)用造影增強(qiáng)超聲技術(shù)(CEU)檢測(cè)各組大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量(MBV)的變化,用于評(píng)價(jià)微循環(huán)胰島素敏感性；整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中監(jiān)測(cè)動(dòng)脈血壓。 (2)骨骼肌125-I胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)：SD大鼠(15只),隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、氯沙坦治療組,對(duì)照組予以生理鹽水輸注,模型組予以脂質(zhì)輸注,氯沙坦治療組在脂質(zhì)輸注同時(shí)給予氯沙坦治療,各組大鼠注射125-I胰島素后測(cè)定125-I胰島素的清除率以明確骨骼肌胰島素?cái)z取情況。 結(jié)果(1)對(duì)照組中,胰島素輸注30分鐘時(shí)可觀察到骨骼肌微循環(huán)灌注量(MBV)較基礎(chǔ)值增加約2倍(p0.05),該作用持續(xù)至少2小時(shí),同時(shí)伴隨胰島素刺激的葡萄糖處置率(GIR)的升高。模型組中,脂質(zhì)輸注抑制胰島素增加骨骼肌MBV的能力(p0.05)模型組大鼠穩(wěn)定狀態(tài)GIR較對(duì)照組降低約35%(p0.001)。氯沙坦治療后,可觀察到骨骼肌MBV較基礎(chǔ)值顯著增加約3倍左右(p0.05),該作用持續(xù)至少2小時(shí),同時(shí)伴隨GIR的明顯改善,氯沙坦治療組大鼠穩(wěn)定狀態(tài)GIR較模型組大鼠明顯升高(p0.001)。L-NAME輸注抑制氯沙坦增加骨骼肌MBV的作用,同時(shí)氯沙坦改善GIR的作用也受到抑制。 (2)脂質(zhì)輸注和/或氯沙坦給藥不影響骨骼肌125I-胰島素的攝取。 結(jié)論在胰島素抵抗大鼠模型中,AT1R拮抗劑氯沙坦治療能改善大鼠微循環(huán)胰島素抵抗?fàn)顟B(tài),進(jìn)而改善代謝性胰島素抵抗。
[Abstract]:Chapter 1 Regulation of angiotensin 鈪，

本文編號(hào)：1802999