發(fā)布時間：2018-04-25 03:37

  本文選題：金黃色葡萄球菌蛋白A + 單克隆抗體��； 參考：《糧食科技與經(jīng)濟(jì)》2016年04期

【摘要】：利用大腸桿菌表達(dá)金黃色葡萄球菌蛋白A,根據(jù)大腸桿菌密碼子偏好性對金黃色葡萄球菌蛋白(SPA)基因進(jìn)行密碼子優(yōu)化。SPA基因插入p ET28a表達(dá)載體中,利用自誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)SPA表達(dá),表達(dá)量達(dá)8.2 mg/L。通過Ni親和層析純化SPA蛋白,純度達(dá)到95%。純化的SPA蛋白免疫小鼠制備單克隆抗體,間接ELISA法檢測抗體效價,抗體效價可達(dá)1∶40000,采用Protein G親和層析純化SPA單抗,純度達(dá)98%。純化后的SPA單抗檢測與食品中常見的致病菌無交叉反應(yīng)。結(jié)果顯示,SPA單抗特異性良好,與其他致病菌無交叉反應(yīng)。
[Abstract]:Staphylococcus aureus protein A was expressed in Escherichia coli. According to the codon preference of Escherichia coli, the codon of Staphylococcus aureus protein spa gene was optimized for insertion into p ET28a expression vector, and SPA expression was induced by self-induction medium. The expression reached 8.2 mg / L. The purity of SPA protein was 95% by Ni affinity chromatography. Monoclonal antibody was prepared by immunizing mice with purified SPA protein. The titer of antibody was detected by indirect ELISA method. The titer of antibody was up to 1: 40000.The monoclonal antibody of SPA was purified by Protein G affinity chromatography, and the purity was 98%. The purified SPA McAbs did not cross react with common pathogenic bacteria in food. The results showed that SPA monoclonal antibody had good specificity and had no cross reaction with other pathogenic bacteria.
【作者單位】： 北京華安麥科生物技術(shù)有限公司;北京市糧油食品檢驗所;
【基金】：北京市科委項目“即食食品中致病菌檢測及快速檢測技術(shù)研究與產(chǎn)品開發(fā)”(Z14110500260000)
【分類號】：R392.11

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本文編號：1799605