miRNA-17-5p在免疫細(xì)胞炎癥反應(yīng)和自噬中的作用
本文選題:脂多糖 + 炎癥。 參考:《廣東醫(yī)學(xué)》2016年12期
【摘要】:目的探討脂多糖(LPS)誘導(dǎo)免疫細(xì)胞炎癥反應(yīng)和自噬中miRNA-17-5p的調(diào)控作用。方法體外培養(yǎng)人白血病單核細(xì)胞株(THP-1),100 ng/m L佛波醇將THP-1細(xì)胞誘導(dǎo)24 h分化成為巨噬細(xì)胞,設(shè)置空白對照組和LPS刺激組,其中LPS刺激組加500 ng/m L的LPS,空白對照組只加滅菌水。刺激THP-1巨噬細(xì)胞12 h后采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)蛋白水平;采用定量PCR反應(yīng)檢測基因miRNA-17-5p、PTEN的表達(dá)情況,采用Western blot檢測P62蛋白水平。結(jié)果與空白對照組比較,LPS刺激組培養(yǎng)上清液中TNF-α、MCP-1蛋白分泌量顯著增加(P0.01),PTEN表達(dá)顯著下調(diào)(P0.01),細(xì)胞內(nèi)miRNA-17-5p顯著上調(diào)(P0.01),細(xì)胞內(nèi)P62蛋白表達(dá)上調(diào)(P0.05)。結(jié)論 miRNA-17-5p參與LPS誘導(dǎo)的免疫細(xì)胞炎癥反應(yīng)和自噬調(diào)控。
[Abstract]:Objective to investigate the inflammatory response of immune cells induced by lipopolysaccharide (LPS) and the regulation of miRNA-17-5p in autophagy. Methods Human leukemic monocytes were cultured in vitro. THP-1 cells were induced to differentiate into macrophages for 24 h by 100 ng/m / L phorbol alcohol. The blank control group and LPS stimulated group were divided into two groups: LPS stimulated group plus 500 ng/m L LPSs, and blank control group only added sterilizing water. After 12 h stimulation of THP-1 macrophages, the levels of tumor necrosis factor- 偽 (TNF- 偽) and monocyte chemoattractant protein (MCP-1) in the supernatant of cell culture were detected by Elisa, and the expression of miRNA-17-5pPTEN gene was detected by quantitative PCR reaction. The level of P62 protein was detected by Western blot. Results compared with the control group, the secretion of TNF- 偽 MCP-1 protein increased significantly in the culture supernatant of LPS-stimulated group, the expression of P0.01PTEN was down-regulated, the expression of miRNA-17-5p was up-regulated by P0.01T, and the expression of P62 protein was upregulated by P0.05A. Conclusion miRNA-17-5p is involved in LPS induced immune cell inflammation and autophagy.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院健康體檢中心;廣東省婦幼保健院婦產(chǎn)科;廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科;
【基金】:廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號:2012B031800233)
【分類號】:R363
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本文編號:1798762
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