發(fā)布時間：2018-04-15 15:33

  本文選題：類鼻疽桿菌 + Ⅲ型分泌系統(tǒng)蛋白　； 參考：《第三軍醫(yī)大學學報》2017年10期

【摘要】：目的重組表達類鼻疽桿菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)蛋白BPSS1395,利用其抗體檢測該蛋白在細菌中的分布。方法以pET-22b為表達系統(tǒng),采用DNA重組技術在大腸桿菌中表達BPSS1395蛋白;用純化重組蛋白免疫新西蘭大白兔,Western blot及ELISA法鑒定其免疫學性質(zhì);以制備的抗血清Western blot分析該蛋白的亞細胞定位。結果從類鼻疽桿菌BPC006株基因組DNA中PCR得到了BPSS1395目的基因,并成功構建pET-22b-BPSS1395重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化到E.coli宿主菌BL21(DE3)經(jīng)IPTG誘導表達、純化得到了相對分子質(zhì)量為32×10~3的高純度BPSS1395蛋白,制備的兔抗血清ELISA效價均高達1∶1 280 000,并能與目的蛋白發(fā)生特異性抗原抗體反應。亞細胞分離后BPSS1395在類鼻疽桿菌中主要定位于細胞質(zhì)。結論重組表達了具有生物活性的BPSS1395蛋白,制備了其特異性多克隆抗體,證明了該蛋白定位于細胞質(zhì)。
[Abstract]:Objective to express BPSS 1395, a secreting system protein of Bacillus mallei type 鈪，

本文編號：1754714