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表達森林腦炎病毒NS5蛋白的轉基因小鼠模型構建與鑒定

發(fā)布時間:2018-04-11 21:11

  本文選題:森林腦炎病毒 + NS蛋白; 參考:《中華醫(yī)院感染學雜志》2017年01期


【摘要】:目的建立能夠表達森林腦炎病毒NS5蛋白的轉基因小鼠模型,為評價TBEV感染時RdRp酶的活性提供研究平臺。方法將線性化的pRP.ExBi-EF1α-NS5-IRES-eGFP質粒顯微注射入FVB/N小鼠受精卵雄原核,移入假孕母鼠輸卵管內(nèi),構建并篩選轉基因首建鼠;首建鼠傳代并篩選出遺傳性狀穩(wěn)定的純合子轉基因小鼠;檢測TBEV NS5基因的表達。結果成功篩選出5只轉基因首建鼠并傳代至F5代,PCR、RT-PCR及Western blot檢測結果表明,轉基因小鼠成功表達了TBEV NS5基因。結論成功構建了表達森林腦炎病毒NS5蛋白的轉基因小鼠模型。
[Abstract]:Objective to establish a transgenic mouse model to express protein NS5 of tick borne encephalitis virus infection, for the evaluation of TBEV RdRp activity to provide research platform. Methods the linearized pRP.ExBi-EF1 plasmid FVB/N alpha -NS5-IRES-eGFP microinjected into the male pronucleus of mouse fertilized eggs, into pseudopregnant females fallopian tubes were constructed transgenic mice; first built in the passage and screening of homozygous transgenic mice genetically stable; to detect the expression of TBEV NS5 gene. Results successfully screened 5 transgenic mice and passaged to F5 generation, PCR, RT-PCR and Western blot detection results showed that transgenic mice successfully expressed TBEV NS5 gene was successfully constructed. Conclusion the expression of transgenic mouse model tick borne encephalitis virus NS5 protein.

【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學基礎醫(yī)學部微生物學教研室;解放軍第152醫(yī)院檢驗科;解放軍總醫(yī)院口腔醫(yī)學研究所;第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院輸血科;解放軍總醫(yī)院院辦;
【基金】:全軍后勤科研計劃面上項目(CWS13J056)
【分類號】:R373.31;R-332

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本文編號:1737690

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