本文選題：血栓性疾病 + D-二聚體　； 參考：《湖北中醫(yī)藥大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：研究目的：血栓性疾病已經(jīng)成為臨床上十分常見(jiàn)的疾病,嚴(yán)重威脅著人類的生命健康,近年來(lái)其發(fā)病率漸增且發(fā)病年齡呈年輕化之勢(shì),成為當(dāng)代國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)之一。制備出具有效價(jià)高、純度高、特異性強(qiáng)、無(wú)交叉反應(yīng)、重復(fù)性好以及可無(wú)限量生產(chǎn)等多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)的抗D-二聚體單克隆抗體,可以使血栓性疾病的早期診斷、抗體導(dǎo)向血栓顯像和抗體導(dǎo)向溶栓等更加快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便。 方法：本實(shí)驗(yàn)以人源性D-二聚體標(biāo)準(zhǔn)品作為抗原常規(guī)免疫BALB/c雌鼠,取免疫小鼠的脾細(xì)胞與同系骨髓瘤細(xì)胞SP2/0作電融合,HAT選擇培養(yǎng)出雜交瘤細(xì)胞。以D-二聚體標(biāo)準(zhǔn)品為抗原,間接ELISA法篩選出分泌抗D-二聚體抗體的雜交瘤細(xì)胞,有限稀釋克隆化培養(yǎng)獲得穩(wěn)定分泌抗D-二聚體單克隆抗體的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株。利用ELISA、Western blotting等方法鑒定抗D-二聚體單克隆抗體的特性。 結(jié)果：研究篩選出2株穩(wěn)定分泌抗D-二聚體的單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株,分別命名為6A3和8A9。2株單克隆抗體的免疫球蛋白亞類均為IgG2a。通過(guò)ELISA、Western blotting等方法的鑒定,抗D-二聚體單克隆抗體能與D-二聚體發(fā)生特異性反應(yīng)。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)成功制備出親和力強(qiáng)、效價(jià)高,并且能特異性識(shí)別D二聚體的單克隆抗體,將為血栓性疾病的診療發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:Objective: thrombotic disease has become a very common disease in clinic, which is a serious threat to human life and health. In recent years, the incidence of thrombotic diseases is increasing and the age of onset is becoming younger.It has become one of the hotspots and emphases of medical research at home and abroad.The preparation of anti-D-dimer monoclonal antibodies with the advantages of high effective value, high purity, strong specificity, no cross reaction, good repeatability and unlimited production can enable the early diagnosis of thrombotic diseases.Antibody-guided thrombolysis imaging and anti-thrombolytic imaging are more rapid, accurate and simple.Methods: in this experiment, BALB/c female mice were immunized with human D-dimer as antigen. The spleen cells of immunized mice and homologous myeloma cells SP2/0 were used as electrofusion fusion cells to culture hybridoma cells.The hybridoma cells secreting anti-Ddimer antibody were screened by indirect ELISA method using standard D- dimer as antigen. The hybridoma cell lines secreting monoclonal antibodies against D- dimer were obtained by limited dilution clone culture.The characteristics of anti-D-dimer monoclonal antibody were identified by Elisa-Western blotting.Results: two monoclonal antibody hybridoma cell lines which secreted anti-Ddimer stably were selected. The immunoglobulin subclasses of monoclonal antibodies named 6A3 and 8A9.2 were IgG2a respectively.The monoclonal antibody against D- dimer can react specifically with D- dimer by Elisa Western blotting.Conclusion: the monoclonal antibody with strong affinity, high titer and specific recognition of D dimer will play an important role in diagnosis and treatment of thrombotic diseases.
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：1735577