本文選題：內(nèi)皮祖細(xì)胞 + 骨髓��； 參考：《中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)》2011年09期

【摘要】：目的:研究大鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCS)的分離、培養(yǎng)、SPIO標(biāo)記,SPIO對(duì)EPCS的標(biāo)記效果及其對(duì)細(xì)胞存活、增殖以及凋亡的影響,為進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究奠定基礎(chǔ)。方法:SD大鼠體重120～150 g,采用梯度密度離心法和貼壁法獲取大鼠EPCS,采用25μg/ml SPIO對(duì)其標(biāo)記,比較標(biāo)記和未標(biāo)記的EPCS。普魯士藍(lán)染色觀察鐵標(biāo)記率,臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活力,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖力,Calcein-AM/PI染色檢測(cè)細(xì)胞活性及細(xì)胞膜完整性,AO/PI染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:分離培養(yǎng)EPCS 7～10 d,細(xì)胞集落相互連接,呈典型的鋪路石樣外觀。普魯士蘭染色顯示SPIO(25μg/ml,24 h)對(duì)細(xì)胞的標(biāo)記率接近94%;比較SPIO標(biāo)記及未標(biāo)記的EPCS,細(xì)胞活力分別為(94.34±0.25)%和(95.33±0.31)%;MTT法檢測(cè)兩組間相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意學(xué)義(P0.05);Calcein-AM/PI染色檢測(cè)細(xì)胞的活性和膜完整性,存活率分別為96%和97%;AO/PI染色兩組細(xì)胞的凋亡率均為5%。結(jié)論:采用梯度離心法從骨髓中分離單個(gè)核細(xì)胞,經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)可實(shí)現(xiàn)內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離培養(yǎng)。25μg/ml濃度的SPIO細(xì)胞標(biāo)記率高,對(duì)細(xì)胞毒性小,且不影響EPCS的活力、增殖及凋亡。
[Abstract]:Objective: to study the isolation of endothelial progenitor cells from rat bone marrow endothelial progenitor cells and the effect of Spio on EPCS labeling and its effects on cell survival, proliferation and apoptosis, so as to lay a foundation for further experimental study.Methods Sprague-Dawley (SD) rats weighing 120 ~ 150g were obtained by gradient density centrifugation and adherent method. 25 渭 g/ml SPIO was used to label the EPCSs, and the labeled and unlabeled EPCSs were compared.The rate of iron labeling was observed by Prussian blue staining, the cell viability was detected by trypan blue assay and the cell viability was detected by MTT assay. The cell activity was detected by Calcein-AM / Pi staining and the apoptosis rate was detected by AOP staining.Results: after EPCS was isolated and cultured for 7 ~ 10 days, the colony was connected with each other, showing a typical paving stone appearance.The survival rates were 96% and 97%, respectively, and the apoptotic rates were 5% in both groups.Conclusion: mononuclear cells were isolated from bone marrow by gradient centrifugation. The SPIO cells with 25 渭 g/ml concentration of endothelial progenitor cells could be isolated and cultured with high labeling rate, low cytotoxicity and no effect on the activity, proliferation and apoptosis of EPCS.
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院影像科;
【基金】：山西醫(yī)科大學(xué)青年科技研究基金(項(xiàng)目名稱:SPIO標(biāo)記干細(xì)胞移植治療兔脊髓損傷的MR活體示蹤項(xiàng)目編號(hào):2010021038-2)
【分類號(hào)】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1733187