發(fā)布時間：2018-03-29 09:48

  本文選題：巨噬細胞分化抗原　切入點：破骨細胞　出處：《中國病理生理雜志》2017年03期

【摘要】：目的:探究巨噬細胞分化抗原1(Mac-1)分子在核因子κB受體活化因子配體(RANKL)誘導的破骨細胞分化中作用的分子機制。方法:取4周齡C57BL/6J小鼠脾細胞,用RANKL及巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)誘導,同時用抗CD11b及抗CD18的特異性抗體進行處理,1周后對細胞核和細胞骨架進行染色;用抗CD11b抗體、干擾CD11b基因的慢病毒及其對照空載病毒處理RANKL誘導的破骨細胞,1周后對細胞進行免疫熒光染色;取4周齡C57BL/6J小鼠脾細胞用RANKL及M-CSF誘導,同時用抗CD11b抗體、干擾CD11b的慢病毒及其對照空載病毒分別進行處理,1周后提取總蛋白進行Western blot檢測。結(jié)果:CD11b抗體組和雙抗體組的多核細胞形成率低于對照組和CD18抗體組,雙抗體組和CD11b抗體組之間多核細胞形成率的差異不具有統(tǒng)計學顯著性;免疫熒光雙標結(jié)果顯示病毒組的CD11b、Syk及NFATc1表達強度均低于對照病毒組,CD11b抗體組的CD11b、Syk及NFATc1表達強度均低于對照組;Western blot結(jié)果顯示,CD11b抗體組的CD11b、Syk、NFATc1、c-Fos及p-ERK/ERK水平均低于對照組,病毒組的CD11b、Syk、NFATc1、c-Fos及p-ERK/ERK水平均低于對照病毒組。結(jié)論:Mac-1分子中CD11b亞基對破骨細胞分化具有促進作用。該分子通過激活下游Syk通路,上調(diào)c-Fos,增加ERK活性,最終上調(diào)NFATc1而促進破骨細胞的分化。
[Abstract]:Aim: to explore the molecular mechanism of macrophage differentiation antigen 1 (Mac-1) in osteoclast differentiation induced by nuclear factor 魏 B receptor activating factor ligand RANKL. Methods: spleen cells of C57BL/6J mice at 4 weeks of age were harvested. RANKL and macrophage colony stimulating factor (MCSF) were used to induce cell nuclear and cytoskeleton staining with anti CD11b and anti CD18 specific antibodies for 1 week. Lentivirus interfering with CD11b gene and its control empty virus treated osteoclasts induced by RANKL for 1 week were stained with immunofluorescence, spleen cells of 4-week-old C57BL/6J mice were induced by RANKL and M-CSF, and anti-#en3# antibody was used. Lentiviruses that interfered with CD11b and their unloaded control viruses were treated for 1 week, and the total protein was extracted for Western blot detection. Results the polynuclear cell formation rate of the two groups was lower than that of the control group and the CD18 antibody group, and the percentage of polynuclear cells in the two groups was lower than that in the control group and the CD18 antibody group. There was no significant difference in the polynuclear cell formation rate between the double antibody group and the CD11b antibody group. The results of double labeling immunofluorescence showed that the expression intensity of CD11btc and NFATc1 in the virus group was lower than that in the control group compared with the control group. The results of Western blot showed that the levels of CD11bSK and p-ERK/ERK in the anti-CD11b antibody group were lower than those in the control group, and the results showed that the expression of CD11btc1c-Fos and p-ERK/ERK in the anti-CD11b antibody group was lower than that in the control group. The levels of c-Fos and p-ERK/ERK in the viral group were lower than those in the control group. Conclusion the CD11b subunit of the 1: Mac-1 molecule can promote the differentiation of osteoclasts by activating the downstream Syk pathway, upregulating c-Fosand increasing the activity of ERK. Finally, NFATc1 was upregulated and osteoclast differentiation was promoted.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學附屬西京醫(yī)院骨一科;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81301541)
【分類號】：R329.2

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本文編號：1680593