本文選題：巨噬細(xì)胞分化抗原　切入點(diǎn)：破骨細(xì)胞　出處：《中國(guó)病理生理雜志》2017年03期

【摘要】：目的:探究巨噬細(xì)胞分化抗原1(Mac-1)分子在核因子κB受體活化因子配體(RANKL)誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞分化中作用的分子機(jī)制。方法:取4周齡C57BL/6J小鼠脾細(xì)胞,用RANKL及巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)誘導(dǎo),同時(shí)用抗CD11b及抗CD18的特異性抗體進(jìn)行處理,1周后對(duì)細(xì)胞核和細(xì)胞骨架進(jìn)行染色;用抗CD11b抗體、干擾CD11b基因的慢病毒及其對(duì)照空載病毒處理RANKL誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞,1周后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色;取4周齡C57BL/6J小鼠脾細(xì)胞用RANKL及M-CSF誘導(dǎo),同時(shí)用抗CD11b抗體、干擾CD11b的慢病毒及其對(duì)照空載病毒分別進(jìn)行處理,1周后提取總蛋白進(jìn)行Western blot檢測(cè)。結(jié)果:CD11b抗體組和雙抗體組的多核細(xì)胞形成率低于對(duì)照組和CD18抗體組,雙抗體組和CD11b抗體組之間多核細(xì)胞形成率的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性;免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果顯示病毒組的CD11b、Syk及NFATc1表達(dá)強(qiáng)度均低于對(duì)照病毒組,CD11b抗體組的CD11b、Syk及NFATc1表達(dá)強(qiáng)度均低于對(duì)照組;Western blot結(jié)果顯示,CD11b抗體組的CD11b、Syk、NFATc1、c-Fos及p-ERK/ERK水平均低于對(duì)照組,病毒組的CD11b、Syk、NFATc1、c-Fos及p-ERK/ERK水平均低于對(duì)照病毒組。結(jié)論:Mac-1分子中CD11b亞基對(duì)破骨細(xì)胞分化具有促進(jìn)作用。該分子通過(guò)激活下游Syk通路,上調(diào)c-Fos,增加ERK活性,最終上調(diào)NFATc1而促進(jìn)破骨細(xì)胞的分化。
[Abstract]:Aim: to explore the molecular mechanism of macrophage differentiation antigen 1 (Mac-1) in osteoclast differentiation induced by nuclear factor 魏 B receptor activating factor ligand RANKL. Methods: spleen cells of C57BL/6J mice at 4 weeks of age were harvested. RANKL and macrophage colony stimulating factor (MCSF) were used to induce cell nuclear and cytoskeleton staining with anti CD11b and anti CD18 specific antibodies for 1 week. Lentivirus interfering with CD11b gene and its control empty virus treated osteoclasts induced by RANKL for 1 week were stained with immunofluorescence, spleen cells of 4-week-old C57BL/6J mice were induced by RANKL and M-CSF, and anti-#en3# antibody was used. Lentiviruses that interfered with CD11b and their unloaded control viruses were treated for 1 week, and the total protein was extracted for Western blot detection. Results the polynuclear cell formation rate of the two groups was lower than that of the control group and the CD18 antibody group, and the percentage of polynuclear cells in the two groups was lower than that in the control group and the CD18 antibody group. There was no significant difference in the polynuclear cell formation rate between the double antibody group and the CD11b antibody group. The results of double labeling immunofluorescence showed that the expression intensity of CD11btc and NFATc1 in the virus group was lower than that in the control group compared with the control group. The results of Western blot showed that the levels of CD11bSK and p-ERK/ERK in the anti-CD11b antibody group were lower than those in the control group, and the results showed that the expression of CD11btc1c-Fos and p-ERK/ERK in the anti-CD11b antibody group was lower than that in the control group. The levels of c-Fos and p-ERK/ERK in the viral group were lower than those in the control group. Conclusion the CD11b subunit of the 1: Mac-1 molecule can promote the differentiation of osteoclasts by activating the downstream Syk pathway, upregulating c-Fosand increasing the activity of ERK. Finally, NFATc1 was upregulated and osteoclast differentiation was promoted.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)附屬西京醫(yī)院骨一科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81301541)
【分類號(hào)】：R329.2

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本文編號(hào)：1680593