本文選題：肺泡巨噬細(xì)胞　切入點(diǎn)：流式細(xì)胞術(shù)　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年11期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的建立一種基于流式細(xì)胞術(shù)分離小鼠肺泡巨噬細(xì)胞(AM)的方法。方法小鼠肺臟在體外經(jīng)膠原酶IV消化后獲得單細(xì)胞懸液,再經(jīng)CD11b和CD11c抗體標(biāo)記,利用流式細(xì)胞儀分選獲得CD11blowCD11c+AM,并經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)細(xì)胞活力,以及通過Real-time PCR和吞噬功能進(jìn)行鑒定。結(jié)果流式細(xì)胞術(shù)分選小鼠肺臟單細(xì)胞懸液,獲得CD11blowCD11c+細(xì)胞,純度為(93±2)%,細(xì)胞活力為(80±5)%;Real-time PCR結(jié)果顯示過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)在該群細(xì)胞高表達(dá)(P0.001);細(xì)胞吞噬功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示該群細(xì)胞具有較好的吞噬活性,吞噬率約為10%。結(jié)論建立了一種基于流式細(xì)胞術(shù)分選獲得AM的方法,該方法獲得的細(xì)胞純度高,細(xì)胞活性好,可用于功能性實(shí)驗(yàn)。
[Abstract]:Objective to establish a flow cytometry method for isolation of mouse alveolar macrophage (AM). Methods single cell suspension was obtained from mouse lung after digested by collagenase IV in vitro, and then labeled with CD11b and CD11c antibody. CD11blowCD11c AMs were obtained by flow cytometry and counted by trypan blue staining, and identified by Real-time PCR and phagocytosis. Results CD11blowCD11c cells were obtained from single cell suspension of mouse lung by flow cytometry. The purity was 93 鹵2, and the cell viability was 80 鹵5. The results of Real-time PCR showed that the peroxisome proliferator activated receptor 緯 -PPAR- 緯 was highly expressed in the group, and the phagocytic function test showed that the colony had a good phagocytic activity. Conclusion A method based on flow cytometry was established to obtain AM by flow cytometry. This method has high cell purity and good cell activity and can be used in functional experiments.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;蛋白質(zhì)組學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):31570901、81500428)
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：1647935