LMP-1轉(zhuǎn)染人胎盤源間充質(zhì)干細胞前后蛋白質(zhì)組學(xué)研究
本文選題:LMP- 切入點:hPDMSCs 出處:《口腔醫(yī)學(xué)研究》2017年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)檢測LIM礦化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)轉(zhuǎn)染人胎盤源間充質(zhì)干細胞(Human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)前后蛋白質(zhì)組學(xué)改變。方法:提取hPDMSCs LMP-1和hPDMSCsvector細胞總蛋白,通過二維凝膠電泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)制備兩組細胞的二維電泳圖譜,并用PDQuest軟件進行圖像分析,尋找差異表達的蛋白質(zhì)點,并用基質(zhì)輔助激光解吸粒子-飛行時間電離質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析技術(shù)對這些差異表達的蛋白質(zhì)點進行鑒定,并選取6個與成骨相關(guān)的蛋白(PCNA,vimentin,annexin A1,annexin A2,eEF2和peroxiredoxin-1)作為驗證對象,蛋白質(zhì)印跡法檢測各蛋白在兩組細胞中的表達水平。結(jié)果:采用2-DE技術(shù)建立了hPDMSCsLMP-1和hPDMSCsvector兩組細胞的二維電泳圖譜;PDQuest軟件分析圖像發(fā)現(xiàn)兩組細胞有22個差異蛋白質(zhì)點,采用MALDI-TOF-MS質(zhì)譜初步鑒定出15個蛋白質(zhì)點,其中表達上調(diào)9個,下調(diào)6個。Western blot檢測結(jié)果與蛋白質(zhì)組學(xué)一致。結(jié)論:LMP-1基因轉(zhuǎn)染hPDMSCs后共篩選獲得15個差異表達的蛋白,它們是成骨分化潛在的重要參與者,為進一步闡明LMP-1對hPDMSCs細胞功能和成骨分化影響的分子機制奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: using proteomics technique for the detection of LIM (LIM mineralization protein-1 -1 mineralization protein, LMP-1) transfection of human placenta derived mesenchymal stem cells (Human placenta-derived mesenchymal stem cells, hPDMSCs) before and after the proteome changes. Methods: the extraction of hPDMSCs LMP-1 and hPDMSCsvector cell total proteins by two-dimensional gel electrophoresis (two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE two dimensional electrophoresis) preparation of cells in two groups, and the images were analyzed by PDQuest software to find the differentially expressed proteins, and by matrix assisted laser desorption time-of-flight particle ionization mass spectrometry (matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem mass spectrometry, MALDI-TOF-MS) analysis of these differentially expressed proteins were identified, and selected 6 a protein and bone related (PCNA, vimentin, annexin A1, annexin A2, and eEF2 Peroxiredoxin-1) as a validation object, the expression level of each protein by Western blotting in two groups of cells. Results: two dimensional electrophoresis of hPDMSCsLMP-1 and hPDMSCsvector of two groups were established by 2-DE technology; image found in the two groups of cells have 22 differential protein analysis software PDQuest, using MALDI-TOF-MS mass spectrometry identified 15 protein spots among them, 9 up-regulated, 6 down regulated.Western blot detection results and proteomics. Conclusion: the transfection of LMP-1 gene after hPDMSCs were screened 15 differentially expressed proteins obtained, they are an important participant in osteogenic differentiation potential, in order to further clarify the molecular mechanism of LMP-1 on hPDMSCs cell function and osteogenic differentiation of lay the foundation.
【作者單位】: 吉林大學(xué)口腔醫(yī)院;吉林大學(xué)第二醫(yī)院;
【基金】:吉林省醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)推進計劃(編號:20140311088YY,201603028YY) 長春市重大科技攻關(guān)計劃(編號:2014054) 吉林省科技攻關(guān)計劃(編號:20150204004YY) 長春市“雙十工程”計劃(統(tǒng)帶:16SS12)
【分類號】:R329.2
【相似文獻】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 鄭惠榕,張秀春;蛋白質(zhì)組與蛋白質(zhì)組學(xué)概述[J];福州師專學(xué)報;2001年02期
2 孫穎,張陽德;表面等離子共振技術(shù)在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用[J];醫(yī)學(xué)與哲學(xué);2002年10期
3 李柯;第二屆蛋白質(zhì)組學(xué)國際學(xué)術(shù)研討會召開[J];北京師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年03期
4 何大澄,肖雪媛;差異蛋白質(zhì)組學(xué)及其應(yīng)用[J];北京師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年04期
5 ;蛋白質(zhì)組和蛋白質(zhì)組學(xué)[J];現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)生物工程學(xué)雜志;2003年04期
6 林燕玲;異軍突起的蛋白質(zhì)組學(xué)[J];植物雜志;2003年01期
7 ;為在國際蛋白質(zhì)組學(xué)研究上占有一席之地 記中國蛋白質(zhì)組學(xué)首屆學(xué)術(shù)大會[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2004年01期
8 張潔,張麗華,張維冰,張玉奎;蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的多維液相分離系統(tǒng)[J];現(xiàn)代儀器;2004年01期
9 ;為在國際蛋白質(zhì)組學(xué)研究上占有一席之地——記中國蛋白質(zhì)組學(xué)首屆學(xué)術(shù)大會[J];生命的化學(xué);2004年01期
10 ;中國蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會(第一輪通知)[J];生命的化學(xué);2004年02期
相關(guān)會議論文 前10條
1 曾嶸;夏其昌;;蛋白質(zhì)組學(xué)的國內(nèi)外進展[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會2003年學(xué)術(shù)交流會論文摘要集[C];2003年
2 曾嶸;夏其昌;;蛋白質(zhì)組學(xué)研究的一些體會[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)首屆學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2003年
3 石榮;程剛;賀福初;;線粒體蛋白質(zhì)組學(xué)研究概述[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)首屆學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2003年
4 嚴順平;孫衛(wèi)寧;張敏華;蘇維埃;湯章城;;應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法研究水稻抗鹽機理[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)首屆學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2003年
5 張國林;陳子s,
本文編號:1640085
本文鏈接:http://sikaile.net/xiyixuelunwen/1640085.html