本文選題：兒童　切入點(diǎn)：炎癥性腸病　出處：《復(fù)旦大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：[目的]探索IBD專用配方奶、短肽類配方奶、普通配方奶及正常飲食腸內(nèi)營養(yǎng)干預(yù)在IBD模型幼鼠疾病的不同時(shí)期對IGF-1、IGFBP3表達(dá)及脛骨近端骨骨骺軟骨增殖、分化作用的影響。比較何種腸內(nèi)營養(yǎng)更能持續(xù)緩解病情,并最大程度促進(jìn)生長發(fā)育,為臨床營養(yǎng)干預(yù)方式的選擇提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。[方法]選擇4-5周(體重80-110g)SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對象,共147只,隨機(jī)分為8組。4個(gè)模型組,專用奶組22只,短肽組21只,普通奶組及正常飲食組各20只；4個(gè)對照組,每組16只。模型組應(yīng)用TNBS灌腸造模,造模后即分別給予IBD專用配方奶(IBD-Modulen)、短肽類配方奶(小百肽)、普通配方奶(雀巢能恩)及正常飲食；對照組給予所需TNBS相同劑量的生理鹽水灌腸,灌腸后亦分別給予IBD專用配方奶、短肽類配方奶、普通配方奶及正常飲食。模型組與對照組均自由飲食,每天記錄飲食、體重變化及大便情況。各組在灌腸后第7、14天分別隨機(jī)抽取8-10只大鼠處死,留取結(jié)腸、回腸、右側(cè)脛骨及血標(biāo)本。結(jié)腸及回腸標(biāo)本進(jìn)行HE染色,觀察腸壁及粘膜病理變化。測量各組大鼠脛骨長度并截取近端骨骺段,HE染色后觀察生長板軟骨生長情況,免疫組化法檢測GHR及IGF-1R的表達(dá)情況。ELISA法檢測血清IGF-1及IGFBP3的表達(dá)。[結(jié)果]1.進(jìn)食情況：各模型組1周內(nèi)進(jìn)食量明顯少于相應(yīng)對照組。模型組中,短肽組4天內(nèi)平均每天進(jìn)食量多于其他3組,5天-1周內(nèi)多于其他2種配方奶組,但與正常飲食組進(jìn)食量相當(dāng)。7天后各模型組進(jìn)食量漸恢復(fù)正常。正常飲食組進(jìn)食量最多,IBD專用奶組與短肽組進(jìn)食量無明顯差異,普通奶組進(jìn)食量最少。2.體重變化情況：(1)模型組：造模后第4天各組體重(g)較造模當(dāng)天均有明顯下降,短肽組普通奶組’專用奶組(-0.61±13.5vs-5.61±12.8、-9.59±10.3,P*P*均0.05)；正常飲食組體重下降程度是短肽組的2.9倍(P0.05)。造模后第7天短肽組體重增量(g)普通奶組*專用奶組(12.06±16.7vs5.14±19.1、0.14±17.7,P*P均0.05)；與正常飲食組體重增長程度無顯著差異(P0.05)。造模后第14天短肽組體重增量專用奶組*普通奶組(P*P0.05)。而正常飲食組體重增量(g)明顯高于3種配方奶組(84.35±18.0vs25.35±31.8、35.26±27.2、23.36±23.5,P0.05)。(2)對照組：第4、7、14天普通配方奶組體重增量(g)均明顯少于專用配方奶組、短肽類配方奶組及正常飲食組(P均0.05)。3.脛骨長度情況：(1)模型組：造模后第7天短肽組平均脛骨長度(cm)正常飲食組專用奶組*(3.21±0.10vs2.98±0.11、3.06±0.15,P*P均0.05)；余組間差異不明顯。第14天普通奶組平均脛骨長度(cm)專用奶組*正常飲食組(3.16±0.12vs3.33±0.10、3.37±0.99,P*P0.05)；短肽組脛骨未明顯長于其他飲食干預(yù)組。第14天較第7天平均脛骨長度的增長幅度在正常飲食組最大(13.1%),其次分別是專用奶組(8.8%),短肽組(3.1%)及普通奶組(2.6%)。(2)對照組：第7天各組平均脛骨長度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第14天普通奶組平均脛骨長度(cm)短肽組*專用奶組正常飲食組#(3.25±0.09vs3.39±0.09、3.43+0.07、3.49±0.99,P*PP#均0.05)。短肽組平均脛骨長度與專用奶組及正常飲食組無明顯差異。第14天較第7天平均脛骨長度的增長幅度在正常飲食組最大(8%),其次分別是短肽組(6.6%),專用奶組(4.9%)及普通奶組(2.2%)。4.回腸及結(jié)腸病理改變：(1)模型組：各組第7天回腸壁水腫明顯,解剖層次不清晰,腸絨毛損傷。以普通奶組最明顯,短肽組最不明顯。專用奶組、正常飲食組及普通奶組結(jié)腸均出現(xiàn)不同程度炎性細(xì)胞浸潤及潰瘍,短肽組腸病理變化明顯輕于其它3組,無明顯炎癥細(xì)胞浸潤及潰瘍。第14天較第7天各組回腸壁水腫明顯減輕,解剖層次清晰,絨毛修復(fù)；結(jié)腸組織潰瘍修復(fù),炎癥細(xì)胞浸潤明顯較前減輕。(2)對照組：各組7、14天時(shí)回腸及結(jié)腸壁無水腫,解剖層次清晰,腸粘膜無損傷、無潰瘍,無明顯炎癥細(xì)胞浸潤。5.IGF-1與IGFBP3的表達(dá)情況：(1)IGF-1的表達(dá)情況：模型組第7天短肽組血IGF-1的表達(dá)(mg/ml)專用奶組*普通奶組正常飲食組#(3.79±0.42 vs 2.93 ±0.89.2.69±0.49.2.58±0.50,P*P*P#均0.05),余組間差異不明顯。短肽模型組正常飲食對照組*短肽對照組(3.79±0.42 vs 3.08±0.48.2.82±0.40, P* =0.007,P=0.000).模型組第14天IGF-1的表達(dá)在短肽組最高,普通奶組最低,但各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對照組第7天IGF-1的表達(dá)(ng/ml)在正常飲食組及專用奶組均高于短肽組及普通奶組,但組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第14天正常飲食組表達(dá)量普通奶組(4.02±1.49 vs 2.94±0.73,P=0.033),略高于專用奶組及短肽組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)IGFBP3的表達(dá)情況：模型組第7天短肽組血IGFBP3的表達(dá)量(ng/ml)正常飲食組(21.28±4.52vs16.11±2.86,P0.05),略高于專用奶組及普通奶組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第14天正常飲食組表達(dá)量(ng/ml)普通奶組(20.49±5.39vs15.62±5,22,P0.05),略高于專用奶組及短肽組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對照組第7天IGFBP3的表達(dá)在正常飲食組最高,普通奶組最低,但各組間表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第14天IGFBP3的表達(dá)正常飲食組IGFBP3的表達(dá)水平普通奶組*短肽組(21.50±4.81vs16.58±4.72、15.32±4.49,P*P均0.05),略高于專用奶組(P0.05)6.脛骨病理及免疫組化：(1)骨骺生長板厚度：各模型組第7天軟骨生長板厚度短肽組普通奶組正常飲食組專用奶組。第14天專用奶組、正常飲食組生長板厚度較第7天明顯增厚；普通奶組生長板厚度較7天時(shí)變薄。各對照組間第7天短肽組及普通奶組相對較薄,而專用奶組與正常飲食組較厚；第14天普通奶組生長板明顯較其他三組薄。(2)骨骺生長板增生區(qū)及肥大區(qū)細(xì)胞計(jì)數(shù)：第7天各模型組骨骺生長板增生區(qū)及肥大區(qū)軟骨細(xì)胞數(shù)(個(gè)/10cm2),短肽組正常飲食組≥專用奶組(66.0±16.1vs51.2±6.6、47.9±6.3,P*P均0.05)。第14天各模型組骨骺生長板增生區(qū)及肥大區(qū)軟骨細(xì)胞數(shù)(個(gè)/10cms),短肽組專用奶組正常飲食組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；對照組第7天專用奶組增生區(qū)及肥大區(qū)細(xì)胞數(shù)明顯多其他3組(P0.05),余組間差異不明顯；第14天普通奶組細(xì)胞數(shù)(個(gè)/10cm2)明顯少于其他3組(P0.05),余組間差異不明顯。(3)GHR與IGF-1R的表達(dá)情況：GHR在整個(gè)骨骺生長板區(qū)域均有表達(dá),但免疫組化切片顯示其主要表達(dá)于靜止細(xì)胞區(qū)。模型組第7、14天各組表達(dá)強(qiáng)陽性的細(xì)胞計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。IGF-1R在整個(gè)骨骺生長板區(qū)域均有表達(dá),免疫組化切片顯示其主要表達(dá)于增生及肥大細(xì)胞區(qū)。模型組第7、14天短肽組表達(dá)量明顯高于其他組。在第7天短肽組增生及肥大區(qū)細(xì)胞數(shù)亦明顯多于正常飲食組及專用奶組(P0.05)。但第14天短肽組該區(qū)細(xì)胞數(shù)亦多余上述兩組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]短肽類配方奶在造模后一周內(nèi)可迅速緩解IBD模型鼠腸道炎癥反應(yīng)、改善營養(yǎng)狀況,促進(jìn)IGF-1、IGFBP3及IGF-1R的表達(dá),加速長骨的生長。第二周這種優(yōu)勢減弱。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R-332;R725.7

【參考文獻(xiàn)】

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1 楊舒;王新月;景姍;楊雪;盛益華;閻忻;;不同濃度三硝基苯磺酸和乙醇誘導(dǎo)的大鼠克羅恩病模型[J];中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào);2011年11期

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本文編號：1639800