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食物過敏幼鼠模型的建立與評價

發(fā)布時間:2018-03-11 19:04

  本文選題:食物過敏 切入點:卵白蛋白 出處:《福建醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】:目的 利用3周齡SD幼鼠通過卵白蛋白腹腔注射進(jìn)行基礎(chǔ)致敏、灌胃激發(fā)建立幼鼠食物過敏動物模型并對其評價,探討建立幼鼠食物過敏動物模型的適宜條件和評價方法。 方法 將16只3周齡的雌性SD幼鼠隨機(jī)分為兩組,每組8只。食物過敏組以卵白蛋白為過敏原,氫氧化鋁為佐劑,通過腹腔注射致敏聯(lián)合灌胃激發(fā)進(jìn)行建模,即在第0天給予每只幼鼠腹腔注射低劑量卵白蛋白和氫氧化侶混懸液共0.2ml(含卵白蛋白40μg,氫氧化鋁1mg),在第2、4、7、9、11天腹腔注射低劑量卵白蛋白40μg(0.2mg/ml卵白蛋白溶液0.2ml);在第20、24、28、30天給予高劑量卵白蛋白30mg(15mg/ml卵白蛋白溶液2.0ml)灌胃激發(fā);空白對照組同期分別給予同等容量的生理鹽水腹腔注射和灌胃。分別觀察兩組幼鼠體重增長、外觀、活動度及排便等變化;酶聯(lián)免疫吸附法檢測兩組幼鼠血清卵白蛋白特異性免疫球蛋白E含量;蘇木精-伊紅染色觀察空腸、回腸、結(jié)腸黏膜形態(tài)變化和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤;甲苯胺藍(lán)染色觀察空腸、回腸、結(jié)腸黏膜肥大細(xì)胞密度及其完整性百分率進(jìn)行幼鼠食物過敏模型評價。 采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析,α=0.05為顯著性檢驗標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果 [1]兩組幼鼠體重在第0、7、14、21天差別均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05);在第28、30天,F(xiàn)A組、NS組幼鼠體重(g)分別為186.3±3.39、191.4±4.27和195.4±3.20、201.3±4.06,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。FA組幼鼠在致敏激發(fā)后均出現(xiàn)不同程度豎毛,毛發(fā)失去光澤,活動減少或俯臥不動,抓耳撓腮或躁動不安,并出現(xiàn)排不成形稀便;NS組幼鼠無明顯變化。 [2]致敏前(D0p)、第一次激發(fā)前(D20p)、最后一次激發(fā)后(D30a)FA組幼鼠血清OVA-IgE含量(μg/ml)分別為6.19±1.05、10.34±1.28、13.17±1.43,NS組分別為6.11±1.13、6.17±1.08、6.31±1.05。隨著基礎(chǔ)致敏和灌胃激發(fā),食物過敏組血清卵白蛋白特異性IgE水平明顯升高,差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與空白對照組比較,在D20p、D30a食物過敏組幼鼠血清血清卵白蛋白特異性IgE含量明顯升高,差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);以血清血清卵白蛋白特異性IgE含量高于NS組X+3S作為致敏成功的陽性判定值所得,食物過敏組幼鼠致敏率為100%,空白對照組無一例致敏。 [3]蘇木精-伊紅染色光鏡下觀察,食物過敏組空腸、回腸、結(jié)腸腸黏膜不同程度損傷,其中,空腸黏膜損傷最明顯,腸黏膜嗜酸性粒細(xì)胞浸潤明顯;其空腸、回腸、結(jié)腸每高倍視野嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(個/HPF)分別為26.6±5.9、18.2±3.2、13.0±2.8;NS組分別為7.8±1.4、7.6±1.6、6.2±1.3,F(xiàn)A組,兩組比較差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。 [4]甲苯胺藍(lán)染色高倍鏡下,食物過敏組空腸、回腸、結(jié)腸黏膜內(nèi)見明顯肥大細(xì)胞聚集伴脫顆粒;其空腸、回腸、結(jié)腸每高倍視野肥大細(xì)胞數(shù)(個/HPF)分別為9.8±2.3、5.9±2.0、4.4±1.3,空白對照組分別為2.3±0.3、2.0±0.4、1.3±0.3,兩組比較差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。食物過敏組空腸、回腸、結(jié)腸黏膜內(nèi)肥大細(xì)胞完整性百分率(%)分別為22.3±2.6、42.9±4.9、57.5±2.9;空白對照組分別為80.1±4.6、83.8±4.5、85.1±4.8,,兩組比較差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論 采用致敏原卵白蛋白與免疫佐劑氫氧化鋁,通過低劑量卵白蛋白腹腔注射致敏聯(lián)合高劑量卵白蛋白灌胃激發(fā)可以成功建立SD幼鼠食物過敏模型。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1599487

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