本文選題：心祖細(xì)胞　切入點(diǎn)：集落增殖　出處：《解剖學(xué)報(bào)》2016年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的原代分離培養(yǎng)及鑒定新生大鼠心祖細(xì)胞(CPCs)。方法利用差速貼壁原代分離培養(yǎng)CPCs,形態(tài)觀察和二乙酸羧基熒光素-琥珀酰亞胺酯(CFDA-SE)示蹤法檢測(cè)細(xì)胞增殖。使用Fluo-3/AM鈣離子檢測(cè)法,檢測(cè)集落增殖細(xì)胞中鈣離子濃度變化。免疫熒光技術(shù)檢測(cè)集落增殖細(xì)胞的干細(xì)胞標(biāo)記物及心肌細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)。結(jié)果差速貼壁法獲得細(xì)胞培養(yǎng)1周左右即觀察到集落增殖的細(xì)胞,圓/橢圓形或不規(guī)則多邊形細(xì)胞呈鋪路石樣排列。隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),細(xì)胞集落增大。培養(yǎng)3周左右,細(xì)胞集落中細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變(分化),逐漸出現(xiàn)突起或呈梭形等,集落中出現(xiàn)波動(dòng)/跳動(dòng)的心肌細(xì)胞。用CFDA SE示蹤顯示,細(xì)胞呈集落增殖特點(diǎn);Fluo-3/AM鈣離子檢測(cè)顯示,集落增殖細(xì)胞中分化細(xì)胞的鈣離子濃度增高。免疫熒光檢測(cè)顯示,不同的集落增殖細(xì)胞具異質(zhì)性,存在c-kit~+/CD34~-、Nanog~+/CD34~-和c-kit~-/Nanog~-細(xì)胞集落;增殖的細(xì)胞集落存在c-kit和Gata4陽(yáng)性共表達(dá),隨細(xì)胞分化出現(xiàn)心肌肌鈣蛋白T(c Tn T)細(xì)胞集落。結(jié)論差速貼壁法原代分離培養(yǎng)的心祖細(xì)胞具有集落增殖和分化為心肌細(xì)胞的能力,是研究心祖細(xì)胞表面標(biāo)記物、增殖和調(diào)控機(jī)制的理想材料。
[Abstract]:Objective to isolate and identify neonatal rat cardiac progenitor cells (CPCs). Methods Fluo-3/AM calcium ion assay was used to detect the proliferation of neonatal rat cardiac progenitor cells. The changes of calcium concentration in colony proliferating cells and the expression of stem cell markers and myocardial cell markers in colony proliferating cells were detected by immunofluorescence technique. To colony proliferating cells, Round / oval or irregular polygon cells were arranged like paving stones. With the extension of culture time, the cell colony increased. After 3 weeks of culture, the cell morphology of the cell colony changed (differentiation and gradually appeared protuberance or fusiform, etc.). There were fluctuating / beating cardiomyocytes in the colony. CFDA SE tracing showed that the colony proliferation was the characteristic of Fluo-3 / AM Ca ~ (2 +), and the calcium concentration of differentiated cells in colony proliferating cells was increased. Different colony proliferative cells have heterogeneity, there are c-kit~ / / CD34 ~ / CD34 ~ + and c-kit-r / Nanog-cell colonies, and c-kit and Gata4 positive coexpression exists in the proliferative colonies, and the positive expression of c-kit and Gata4 is also found in the proliferative cell colonies, and the positive expression of c-kit and Gata4 is also found in the proliferative colonies. Conclusion Cardiac progenitor cells isolated and cultured by differential adherent method have the ability of colony proliferation and differentiation into cardiomyocytes, which are the surface markers of cardiac progenitor cells. Ideal material for proliferation and regulatory mechanisms.
【作者單位】： 河南省醫(yī)用組織再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院科研項(xiàng)目培育基金(2013ZD121) 2012年度研究生科研創(chuàng)新支持計(jì)劃
【分類號(hào)】：R329.2

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本文編號(hào)：1594928