利奈唑胺單抗的制備及其熒光免疫層析檢測(cè)法的建立
本文選題:利奈唑胺 切入點(diǎn):利奈唑胺衍生物 出處:《藥物分析雜志》2017年07期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:建立一種簡(jiǎn)便、快速、特異的利奈唑胺血藥濃度熒光免疫層析檢測(cè)法。方法 :將脫乙酰利奈唑胺定向合成具有單一羧基結(jié)構(gòu)的利奈唑胺衍生物。采用碳二亞胺法將利奈唑胺衍生物與牛血清蛋白和卵清蛋白分別偶聯(lián)制備完全抗原。將利奈唑胺-牛血清蛋白偶聯(lián)物免疫Balb/c小鼠制備單克隆抗體。熒光標(biāo)記利奈唑胺單抗,將利奈唑胺-卵清蛋白完全抗原和羊抗兔IgG抗體噴涂于硝酸纖維素膜分別作為檢測(cè)線和質(zhì)控線,以競(jìng)爭(zhēng)性免疫抑制反應(yīng)模式建立了利奈唑胺血藥濃度熒光免疫層析檢測(cè)法;谝陨蠙z測(cè)方法建立利奈唑胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對(duì)該檢測(cè)法進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)。并采用HPLC方法測(cè)定,對(duì)兩方法的結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果 :通過(guò)優(yōu)化體系,所建立的檢測(cè)法IC_(50)=5.28μg·mL~(-1),線性范圍為0.78~50μg·mL~(-1),靈敏度為0.61μg·mL~(-1),精密度均小于10%,回收率為78.4%~123%。與14種與利奈唑胺結(jié)構(gòu)相似以及聯(lián)合用藥相關(guān)藥物無(wú)明顯交叉反應(yīng)。分別檢測(cè)67份臨床利奈唑胺血樣與HPLC法對(duì)比,發(fā)現(xiàn)2種方法相關(guān)性較好,R~2=0.929,大于0.90。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)成功建立了一種操作簡(jiǎn)便、快速、高靈敏度、特異性強(qiáng)的利奈唑胺熒光免疫層析檢測(cè)方法,為進(jìn)一步臨床血藥濃度監(jiān)測(cè)的應(yīng)用打下了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: to establish a simple and rapid method, A specific fluorescent immunochromatographic assay for the determination of serum concentration of linazolamide. Methods: deacetylleprazolium was used to synthesize linazolamide derivatives with a single carboxyl group. The complete antigen was prepared by coupling bovine serum protein and ovalbumin respectively. The Balb/c mice were immunized with linazolamide and bovine serum protein conjugate to prepare monoclonal antibody. The complete antigen of linazolamine ovalbumin and goat anti-rabbit IgG antibody were sprayed on the nitrocellulose membrane as the detection line and the quality control line, respectively. Based on the competitive immunosuppressive reaction model, a fluorescence immunochromatographic assay for the determination of linazolamine in blood was established. Based on the above methods, the standard curve of linazolamide was established, and the method was evaluated. The method was determined by HPLC method. The results of the two methods are compared. Results: by optimizing the system, The linear range of the method is 0.78 渭 g 路mL ~ (-1), the sensitivity is 0.61 渭 g 路mL ~ (-1), the precision is less than 100.The recovery rate is 78.4m ~ (-1). There is no obvious cross reaction with 14 kinds of drugs similar to the structure of linazolamide and related drugs. The blood samples of nezolamine were compared with HPLC method. It was found that the two methods had a good correlation, which was greater than 0.90.Conclusion: a simple, rapid, sensitive and specific fluorescent immunochromatographic assay was established for the detection of linazolamine. It lays a foundation for the further application of blood drug concentration monitoring.
【作者單位】: 湖州市中心醫(yī)院;中科院湖州營(yíng)養(yǎng)中心;
【基金】:湖州市科技局公益性技術(shù)應(yīng)用研究(一般)項(xiàng)目,2013GYB12
【分類號(hào)】:R392-33
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1587988
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