發(fā)布時間：2018-03-01 08:05

  本文關鍵詞： A型流感病毒 PB-F 蛋白激酶R 蛋白磷酸化　出處：《動物醫(yī)學進展》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為研究A型流感病毒的重要毒力因子PB1-F2對蛋白激酶R(PKR)的調(diào)控機制,通過純化GST-PB1-F2融合蛋白,利用GST pull-down試驗證實了PB1-F2與PKR發(fā)生相互作用;采用免疫熒光試驗進一步驗證了二者的相互關系;實時熒光定量PCR表明PB1-F2能負調(diào)控PKR及IL-6的mRNA水平;采用siRNA干擾PKR基因的表達后,PB1-F2抑制IL-6的mRNA轉(zhuǎn)錄作用更顯著。進一步運用蛋白免疫印跡方法檢測了PB1-F2對PKR及其底物eIF-2α蛋白磷酸化水平的影響,顯示過表達PB1-F2后,PKR及eIF-2α的磷酸化表達水平明顯下調(diào)。本研究表明PB1-F2與PKR相互作用而抑制PKR磷酸化活化,并通過PKR調(diào)控IL-6的表達,為探索PB1-F2的未知生物學功能提供了重要信息。
[Abstract]:In order to study the regulatory mechanism of PB1-F2, an important virulence factor of influenza A virus, GST-PB1-F2 fusion protein was purified and the interaction between PB1-F2 and PKR was confirmed by GST pull-down test. The real-time fluorescence quantitative PCR showed that PB1-F2 could negatively regulate the mRNA level of PKR and IL-6. SiRNA interfered with the expression of PKR gene, and PB1-F2 inhibited the mRNA transcription of IL-6 significantly. The effect of PB1-F2 on the phosphorylation of eIF-2 偽 protein in PKR and its substrate was detected by Western blot. The results showed that the phosphorylation level of PB1-F2 and eIF-2 偽 was significantly down-regulated after overexpression of PB1-F2. This study indicated that the interaction between PB1-F2 and PKR inhibited the activation of PKR phosphorylation and provided important information for exploring the unknown biological function of PB1-F2 through the regulation of IL-6 expression by PKR.
【作者單位】： 吉林大學人獸共患病教育部重點實驗室人獸共患病研究所;吉林農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院;
【基金】：國家重點基礎研究發(fā)展計劃(973計劃)(2012CB518901)
【分類號】：R373.13

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