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流式細胞術(shù)和微球技術(shù)分析應(yīng)激細胞內(nèi)HSP70表達

發(fā)布時間:2018-02-28 23:27

  本文關(guān)鍵詞: 流式細胞術(shù) 微球 免疫印跡 熱休克蛋白 出處:《吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報》2016年04期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的建立檢測細胞內(nèi)HSP70的流式細胞分析技術(shù),并應(yīng)用其分析炎癥、化療藥物(紫杉醇)和物理因素(熱處理)對U937細胞、A549細胞和Hela細胞HSP70表達的影響。方法培養(yǎng)U937、A549和Hela細胞,分別用細菌脂多糖(LPS)、紫杉醇(PTX)和熱應(yīng)激(42℃)上述細胞;采用流式細胞術(shù)檢測細胞內(nèi)活性氧、細胞周期和細胞凋亡;分別采用傳統(tǒng)的免疫印跡技術(shù)和自制液相微球結(jié)合流式細胞術(shù)來分析HSP70的表達水平。結(jié)果 LPS誘導(dǎo)U937細胞后,其細胞內(nèi)活性氧(ROS)增加并發(fā)生凋亡,PTX處理A549細胞后,細胞發(fā)生G2/M期阻滯和凋亡,熱處理導(dǎo)致Hela細胞發(fā)生凋亡。采用自制液相微球結(jié)合流式細胞術(shù)以及傳統(tǒng)的免疫印跡技術(shù),均可發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)HSP70隨處理因素強度或時間延長而表達增加。結(jié)論所建立的自制液相微球結(jié)合流式細胞術(shù)可用于細胞內(nèi)蛋白表達量的分析。
[Abstract]:Objective to establish a flow cytometry (FCM) assay for the detection of HSP70 in U937 cells and to analyze the effects of inflammation, chemotherapeutic drugs (paclitaxel) and physical factors (heat treatment) on the expression of HSP70 in U937 cell line A549 and Hela cells. Methods U937 A549 and Hela cells were cultured. Lipopolysaccharide (LPSX), paclitaxel (PTX) and heat stress (42 鈩,

本文編號:1549452

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