流式細(xì)胞術(shù)和微球技術(shù)分析應(yīng)激細(xì)胞內(nèi)HSP70表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2018-02-28 23:27
本文關(guān)鍵詞: 流式細(xì)胞術(shù) 微球 免疫印跡 熱休克蛋白 出處:《吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào)》2016年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的建立檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)HSP70的流式細(xì)胞分析技術(shù),并應(yīng)用其分析炎癥、化療藥物(紫杉醇)和物理因素(熱處理)對(duì)U937細(xì)胞、A549細(xì)胞和Hela細(xì)胞HSP70表達(dá)的影響。方法培養(yǎng)U937、A549和Hela細(xì)胞,分別用細(xì)菌脂多糖(LPS)、紫杉醇(PTX)和熱應(yīng)激(42℃)上述細(xì)胞;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡;分別采用傳統(tǒng)的免疫印跡技術(shù)和自制液相微球結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)來(lái)分析HSP70的表達(dá)水平。結(jié)果 LPS誘導(dǎo)U937細(xì)胞后,其細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)增加并發(fā)生凋亡,PTX處理A549細(xì)胞后,細(xì)胞發(fā)生G2/M期阻滯和凋亡,熱處理導(dǎo)致Hela細(xì)胞發(fā)生凋亡。采用自制液相微球結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)以及傳統(tǒng)的免疫印跡技術(shù),均可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)HSP70隨處理因素強(qiáng)度或時(shí)間延長(zhǎng)而表達(dá)增加。結(jié)論所建立的自制液相微球結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)可用于細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)量的分析。
[Abstract]:Objective to establish a flow cytometry (FCM) assay for the detection of HSP70 in U937 cells and to analyze the effects of inflammation, chemotherapeutic drugs (paclitaxel) and physical factors (heat treatment) on the expression of HSP70 in U937 cell line A549 and Hela cells. Methods U937 A549 and Hela cells were cultured. Lipopolysaccharide (LPSX), paclitaxel (PTX) and heat stress (42 鈩,
本文編號(hào):1549452
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