本文關(guān)鍵詞： 胚胎干細(xì)胞 Kidins220/ARMS 間質(zhì)祖細(xì)胞 急性腎損傷 細(xì)胞治療　出處：《浙江大學(xué)》2012年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：胚胎干細(xì)胞來源于哺乳動物囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。它在體外培養(yǎng)條件下可以保持自我更新能力和多向分化潛能,是體外發(fā)育生物學(xué)研究的理想模型,并為再生治療提供了細(xì)胞來源。對促進(jìn)胚胎干細(xì)胞增殖的分子機(jī)理的研究是胚胎干細(xì)胞生物學(xué)研究的核心命題。胚胎干細(xì)胞的自我更新和分化受到胞外信號分子和胞內(nèi)信號通路的協(xié)同調(diào)控。作為兩者的介導(dǎo)者,細(xì)胞膜表面的跨膜蛋白對胚胎干細(xì)胞的自我更新起著關(guān)鍵作用。因此,對新的胚胎干細(xì)胞表面功能性分子的篩選有助于深入理解干細(xì)胞增殖相關(guān)的調(diào)控機(jī)理。 Kidins220/ARMS是神經(jīng)營養(yǎng)因子信號通路的關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白,對神經(jīng)細(xì)胞的存活和增殖起到重要作用。但是Kidins220/ARMS在胚胎干細(xì)胞上的表達(dá)及功能尚未進(jìn)行研究。本實(shí)驗(yàn)室通過對小鼠胚胎干細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)分析,結(jié)合實(shí)時定量PCR和ICC鑒定,在胚胎干細(xì)胞上首次篩選得到一種高豐度表達(dá)的膜表面蛋白Kidins220/ARMS.利用RNA干擾技術(shù),胚胎干細(xì)胞中Kidins220/ARMS的表達(dá)下調(diào)。進(jìn)一步研究證明Kidins220/ARMS的下調(diào)并未影響到小鼠胚胎干細(xì)胞的自我更新,但是顯著抑制了它的增殖。這說明Kidins220/ARMS對于維持胚胎干細(xì)胞正常的增殖非常重要。對Kidins220/ARMS影響胚胎干細(xì)胞增殖相關(guān)的分子機(jī)理作進(jìn)一步研究有助于加深對干細(xì)胞增殖機(jī)理的理解,建立新的ESCs培養(yǎng)體系,理解Kidins220/ARMS在小鼠胚胎發(fā)育中的生物學(xué)意義。 急性腎損傷(AKI)是一種嚴(yán)重的臨床疾病,具有較高的致殘率和致死率。雖然很多藥物治療方法,包括鈣通道阻止劑,多巴胺、內(nèi)皮素的佶抗劑和利尿排泄多肽等已經(jīng)進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn),但成功率較低,并伴有多種副作用。因此,干細(xì)胞移植為急性腎損傷的治療提供了新的希望,已經(jīng)有越來越多的研究者將各種來源的干細(xì)胞應(yīng)用于疾病治療。 本實(shí)驗(yàn)室通過人胚胎干細(xì)胞的定向分化,獲得了一種新的干細(xì)胞,人胚胎干細(xì)胞來源的間質(zhì)祖細(xì)胞(hESC-MPs).它具有自我更新能力,可以向成脂、成骨和成軟骨細(xì)胞分化。我們首次將hESC-MPs應(yīng)用于急性腎損傷的治療。將hESC-MPs移植到順鉑(Cisplatin)誘導(dǎo)的急性腎損傷小鼠模型中,顯著改善了受損傷小鼠的腎功能,促進(jìn)了腎臟組織結(jié)構(gòu)的修復(fù)。對人特異的17號染色體α微衛(wèi)星片段的PCR檢測揭示移植的hESC-MPs歸巢到了腎臟的損傷區(qū)域,促進(jìn)了腎細(xì)胞的增殖和存活。而且,hESC-MPs的移植活化了抗炎癥因子IL-10和促存活因子bFGF、FIGF、IGF-1的表達(dá),降低了趨化因子MCP-1和促炎癥因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ、IL-6和TGF-β的基因表達(dá)量。這提示hESC-MPs的免疫調(diào)節(jié)屬性在急性腎損傷的修復(fù)中起到了重要作用。這些結(jié)果揭示hESC-MPs是一種非常有希望的細(xì)胞來源,可用于急性腎損傷和其他復(fù)雜的多因素失調(diào)性疾病的治療。
[Abstract]:Embryonic stem cells come from the inner cell mass of mammalian blastocysts. It can maintain self-renewal and multi-differentiation potential in vitro, and is an ideal model for the study of developmental biology in vitro. The molecular mechanism of promoting the proliferation of embryonic stem cells is the core proposition in the biological research of embryonic stem cells. The self-renewal and differentiation of embryonic stem cells are subject to extracellular signaling molecules. And intracellular signaling pathways. As mediators of both, The transmembrane proteins on the membrane surface play a key role in the self-renewal of embryonic stem cells. Therefore, the screening of new functional molecules on the surface of embryonic stem cells is helpful to further understand the regulatory mechanisms related to stem cell proliferation. Kidins220/ARMS is a key regulator of neurotrophic factor signaling pathway. However, the expression and function of Kidins220/ARMS on embryonic stem cells have not been studied. In combination with real-time quantitative PCR and ICC identification, a highly abundant membrane surface protein Kidins220 / ARMSwas obtained from embryonic stem cells for the first time. RNA interference technique was used. Kidins220/ARMS expression was down-regulated in embryonic stem cells. Further studies showed that the down-regulation of Kidins220/ARMS did not affect the self-renewal of mouse embryonic stem cells. But it significantly inhibited its proliferation. This suggests that Kidins220/ARMS is very important for maintaining the normal proliferation of embryonic stem cells. Further study of the molecular mechanism related to the effects of Kidins220/ARMS on the proliferation of embryonic stem cells will contribute to a better understanding of the mechanism of stem cell proliferation. To establish a new ESCs culture system to understand the biological significance of Kidins220/ARMS in mouse embryo development. Acute renal injury (AKI) is a serious clinical disease with a high rate of disability and mortality. Although many drug treatments include calcium channel blockers, dopamine, Et has been used in clinical trials with low success rate and many side effects. Therefore, stem cell transplantation offers new hope for the treatment of acute renal injury. More and more researchers have applied stem cells from various sources to the treatment of diseases. Through the directional differentiation of human embryonic stem cells, we have obtained a new kind of stem cells, human embryonic stem cell derived mesenchymal progenitor cells (hESC-MPsN). Osteogenesis and chondroblast differentiation. We used hESC-MPs for the first time in the treatment of acute renal injury. Transplantation of hESC-MPs into the model of acute renal injury induced by cisplatin significantly improved the renal function of injured mice. The PCR analysis of the specific human chromosome 17 偽 microsatellite fragment revealed that the transplanted hESC-MPs homed to the damaged area of the kidney. Moreover, the transplantation of hESC-MPs activates the expression of anti-inflammatory factor IL-10 and survivor-promoting factor bFGFFIGF-1, and promotes the proliferation and survival of renal cells, and the transplantation of hESC-MPs activates the expression of anti-inflammatory factor IL-10 and survivor-promoting factor bFGFFIGF-1. These results suggest that the immunomodulatory properties of hESC-MPs play an important role in the repair of acute renal injury. These results suggest that hESC-MPs is a very promising cell source. It can be used in the treatment of acute renal injury and other complex multifactorial disorders.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R329

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 張潤;秦琨;法志強(qiáng);劉翼;李鵬;蔡穎謙;姜曉丹;;Catwalk系統(tǒng)評估臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療大鼠腦損傷后運(yùn)動功能的恢復(fù)情況[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2012年04期

2 王琪;茍三懷;陳華江;;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞:骨組織工程學(xué)的理想種子細(xì)胞?[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年07期

3 侯萍;宋志國;趙冬陽;劉英杰;李劍平;;臍血單個核細(xì)胞成功培養(yǎng)的相關(guān)影響因素[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年37期

4 姚丹丹;苑紅;苑春慧;;人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞在不同改性處理聚苯乙烯表面的生長效應(yīng)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年25期

5 李劍;涂懷軍;石慶芝;李潔;吳瓊;戴革;戴育成;;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的無血清培養(yǎng)[J];中華血液學(xué)雜志;2006年06期

6 王伯春;;組織工程化骨低溫保存研究現(xiàn)狀及展望[J];制冷與空調(diào)(四川);2008年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 盧建民;小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞的間充質(zhì)干細(xì)胞樣表型和多向分化潛能以及抑制樹突狀細(xì)胞成熟的功能[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

2 孫德毅;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與骨誘導(dǎo)活性材料構(gòu)建組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2011年

3 袁源;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性、向神經(jīng)樣細(xì)胞的分化及細(xì)胞移植治療顱腦損傷的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

4 遲作華;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞和胰島樣細(xì)胞的分化研究[D];暨南大學(xué);2006年

5 孫宇;糖尿病患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細(xì)胞的研究[D];山東大學(xué);2007年

6 王琪;人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合β-磷酸三鈣的骨組織工程學(xué)實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

7 張曉艷;不同來源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外生物學(xué)特性及人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在造血干細(xì)胞移植中的應(yīng)用研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

8 楊立明;間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療急慢性肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2009年

9 洪孫權(quán);轉(zhuǎn)分化和未轉(zhuǎn)分化人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在腦損傷修復(fù)中的比較研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 林凌;IGF-1誘導(dǎo)臍血間充質(zhì)干細(xì)胞向少突膠質(zhì)樣細(xì)胞分化的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

2 周金玉;大鼠臍帶間質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2011年

3 胡嘉升;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及體外轉(zhuǎn)化為神經(jīng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2007年

4 崔俊成;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2008年

5 蔡瓊霞;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及體內(nèi)移植促進(jìn)皮膚創(chuàng)面修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2008年

6 吳莉芳;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為胰島樣細(xì)胞及其與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的比較[D];汕頭大學(xué);2008年

7 吳雅迪;保存方法對同種異體軟骨移植物免疫原性的影響[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2009年

8 朱華民;兩種細(xì)胞因子組合誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞分化的研究[D];暨南大學(xué);2010年

，

本文編號：1517402