發(fā)布時(shí)間：2018-02-16 09:17

  本文關(guān)鍵詞： 缺氧預(yù)處理 星形膠質(zhì)細(xì)胞 膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 凋亡　出處：《遼寧醫(yī)學(xué)院》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的 觀察缺氧預(yù)處理后星形膠質(zhì)細(xì)胞GDNF表達(dá)變化對(duì)神經(jīng)元凋亡的影響。 方法 神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)均應(yīng)用酶消化法及機(jī)械分離法。分別應(yīng)用NSE和GFAP免疫細(xì)胞化學(xué)染色對(duì)神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。將培養(yǎng)成熟的神經(jīng)細(xì)胞放到厭氧培養(yǎng)箱中，分別缺氧30、60、90、120、180min再?gòu)?fù)氧24h，用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液中LDH漏出率，，找出神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞共同的預(yù)處理及再缺氧時(shí)間。星形膠質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞被分為正常對(duì)照組、預(yù)處理+缺氧組、缺氧組，每組根據(jù)最后一次缺氧再灌注不同時(shí)間又分為6h、12h、24h、36h4組用ELISA方法檢測(cè)培養(yǎng)基中GDNF含量。將正常對(duì)照組的星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基制備成ACM1，預(yù)處理+缺氧組的星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基制備成ACM2，利用GDNF抗體中和ACM2中GDNF，制備成ACM3；將神經(jīng)元分為正常對(duì)照組、預(yù)處理+缺氧組、缺氧組，用不同條件培養(yǎng)基孵育神經(jīng)元，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)神經(jīng)元凋亡率。 結(jié)果 神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞分別培養(yǎng)至第6d和第9d成熟，NSE、GFAP染色陽(yáng)性細(xì)胞分別為85.23%±1.72%、99.11%±2.57%。神經(jīng)元缺氧30分鐘LDH漏出率很低，60min以后LDH漏出率增加呈遞增趨勢(shì)；星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧30min與60min相比較，LDH漏出率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著差異（P0.05），其余三組比較均有顯著性差異（P0.05）。缺氧組GDNF含量在再灌注6h表達(dá)增加，24h達(dá)到高峰（P0.05）；預(yù)處理+缺氧組GDNF含量逐漸增高，不同再灌注時(shí)間點(diǎn)均明顯高于其它兩組（P0.05）。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)神經(jīng)元凋亡率，可見(jiàn)預(yù)處理+缺氧組神經(jīng)元凋亡率低于缺氧組，加入ACM2后凋亡率較另外兩組有顯著性差異（P0.05）。 結(jié)論 缺氧預(yù)處理可誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞GDNF高表達(dá)，并明顯降低神經(jīng)元的凋亡。
[Abstract]:Purpose To observe the effect of GDNF expression on neuron apoptosis after hypoxia preconditioning . method The neurons and astrocytes were identified by chemical staining of NSE and GFAP . The neurons were divided into normal control group , pretreatment + hypoxia group and hypoxia group . The neurons were divided into normal control group , pretreatment + hypoxia group and hypoxia group . Results Compared with the other two groups ( P0.05 ) , the content of GDNF in hypoxic group was significantly higher than that in the other two groups ( P0.05 ) , and the apoptosis rate of the pretreated + hypoxia group was lower than that in the other two groups ( P0.05 ) . Conclusion Anoxia pretreatment can induce high expression of GDNF in astrocytes and decrease the apoptosis of neurons .

【學(xué)位授予單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R363

【共引文獻(xiàn)】

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4 孫宇;朱也森;;缺血預(yù)處理腦保護(hù)機(jī)制研究[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年03期

5 黃龍飛;錢貽崧;關(guān)騰;黃夢(mèng)昊;李運(yùn)曼;;谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體靶點(diǎn)藥物的抗腦缺血作用研究進(jìn)展[J];中國(guó)新藥雜志;2012年04期

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本文編號(hào)：1515175