本文關(guān)鍵詞： 諾如病毒 病毒樣顆粒 昆蟲(chóng)細(xì)胞 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)　出處：《四川大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年03期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：將人諾如病毒VA387株ORF2基因插入載體pFastBac1中,轉(zhuǎn)化DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞獲得Bacmid-NoV-ORF2;脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞,獲得表達(dá)NoV-ORF2的重組桿狀病毒Ac-NoV-ORF2.凍融破碎經(jīng)Ac-NoV-ORF2感染的Tn5細(xì)胞,離心收集上清進(jìn)行分子篩純化.10%SDS-PAGE分析結(jié)果顯示,重組病毒感染的Tn5細(xì)胞可見(jiàn)特異的蛋白條帶;目的蛋白條帶為相對(duì)分子質(zhì)量59kD和56kD的兩個(gè)條帶;電鏡觀(guān)察發(fā)現(xiàn)表達(dá)的諾如病毒衣殼蛋白成功裝配成了大小約為40~50nm的VLPs.結(jié)果表明在Tn5細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了諾如病毒衣殼蛋白的表達(dá)和VLPs的裝配.
[Abstract]:The ORF2 gene of human norovirus VA387 strain was inserted into the vector pFastBac1 and transformed into DH10Bac receptive cells to obtain Bacmid-NoV-ORF2. The recombinant baculovirus Ac-NoV-ORF2.The recombinant baculovirus Ac-NoV-ORF2 expressing NoV-ORF2 was obtained by transfection of sf9 insect cells mediated by liposome. Tn5 cells infected by Ac-NoV-ORF2 were frozen and thawed. The results of SDS-PAGE analysis showed that specific protein bands were found in Tn5 cells infected by recombinant virus, and the target protein bands were two bands of relative molecular weight 59 KD and 56 KD, respectively. Electron microscopy showed that the expressed norovirus capsid protein was successfully assembled into VLPs of about 40NV 50nm. The results showed that the expression of norovirus capsid protein and the assembly of VLPs were realized in Tn5 cells.
【作者單位】： 四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;成都生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【基金】：自然科學(xué)基金(J1103518)
【分類(lèi)號(hào)】：R373

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本文編號(hào)：1515110