本文關(guān)鍵詞： 缺氧 心肌細(xì)胞 凋亡 Bcl-2 Bax 核因子-κB 17β-雌二醇 兒童 青少年 身體成分 用力呼氣流量 用力肺活量 生長(zhǎng)突增　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：[目的]探討缺氧誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡中Bcl-2、Bax和NF-K B的表達(dá),以及17β-雌二醇(E2)對(duì)缺氧心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。 [方法]Sprague-Dawley大鼠乳鼠(出生1-2d)心肌細(xì)胞原代培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)良好時(shí)進(jìn)行藥物干預(yù)和缺氧刺激。將細(xì)胞分成四組,分別為C1(對(duì)照組)、C2(單純加藥組)、H1(單純?nèi)毖踅M)和H2(加藥缺氧組)。即C2、H2經(jīng)E2作用24h,之后H1、H2缺氧(5%CO2+95%N：)處理12h,再進(jìn)行統(tǒng)一處理。采用MTT法檢測(cè)缺氧對(duì)心肌細(xì)胞活力和抑制率的影響及E2對(duì)缺氧心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。采用Flow cytometry方法檢測(cè)心肌細(xì)胞的凋亡。采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)Bcl-2、Bax和NF-K B的表達(dá)變化。采用Real-Time PCR技術(shù)分析Bel-2mRNA和Bax mRNA水平的表達(dá)變化。 [結(jié)果]缺氧使心肌細(xì)胞活力下降,且對(duì)心肌細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制,108、10-7mol/LE2可以提高心肌細(xì)胞活力,逆轉(zhuǎn)缺氧對(duì)心肌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。缺氧加重心肌細(xì)胞凋亡,使心肌細(xì)胞Bax蛋白、Bax mRNA, NF-K B蛋白的表達(dá)升高,Bcl-2蛋白、Bcl-2mRNA的表達(dá)降低,而經(jīng)10-7mol/L17β-雌二醇預(yù)處理的缺氧心肌細(xì)胞較單純?nèi)毖踅M心肌細(xì)胞Bax蛋白、Bax mRNA, NF-κB蛋白的表達(dá)降低,Bcl-2蛋白、Bcl-2mRNA表達(dá)升高。 [結(jié)論]缺氧對(duì)心肌細(xì)胞生長(zhǎng)具有一定的抑制作用,還促進(jìn)心肌細(xì)胞的凋亡,且使Bcl-2蛋白和mRNA表達(dá)降低、Bax蛋白和mRNA表達(dá)升高,NF-K B的蛋白表達(dá)升高。E2能夠逆轉(zhuǎn)缺氧對(duì)心肌細(xì)胞的抑制作用,這種保護(hù)作用可能通過降低NF-K B的表達(dá)進(jìn)而上調(diào)Bcl-2mRNA的表達(dá),下調(diào)Bax mRNA的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。 本文旨在研究?jī)和嗌倌耆ブw重(fat free mass,FFM)、脂肪體重(fat mass, FM)和肺通氣功能的關(guān)系,為兒童青少年相關(guān)疾病的預(yù)防、治療以及健康管理提供參考數(shù)據(jù)。隨機(jī)抽取黑龍江省10-18歲健康兒童青少年1174人(男性583人,女性591人),觀察身高、體重和腰臀比(waist to hip ratio, WHR),同時(shí)采用身體成分測(cè)量?jī)x和肺功能儀分別檢測(cè)FFM、FM和肺通氣功能,并采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、偏相關(guān)和多元逐步回歸分析FFM、FM和肺通氣功能的關(guān)系。結(jié)果顯示,受試者的性別、年齡均與去脂體重指數(shù)(FFM index,FFMI)呈正相關(guān)(P0.001)。男性年齡和脂肪體重指數(shù)(FM index,FMI)呈負(fù)相關(guān)(P0.001),女性年齡和FMI呈正相關(guān)(P0.001)。不同性別受試者FFMI與用力呼氣肺活量(forced vital capacity, FVC)、用力呼氣一秒量(forced expiratory volume in one second,FEV1)、最大呼氣流量(peak expiratory flow, PEF)、用力呼出25%肺活量時(shí)呼氣流量(forced expiratory flow at25%of forced vital capacity,FEF25%), FEF50%和最大呼氣中段流量(maximum mid-expiratory flow, MMEF)都呈正相關(guān)(P0.05),與FEV1/FVC呈負(fù)相關(guān)(P0.01)。男性FFMI與FEF75%正相關(guān)(P0.05),女性FFMI與FEF75%不相關(guān)。男性FMI與FEV1、 FEV1/FVC、PEF、FEF25%、FEF50%、FEF75%和MMEF呈負(fù)相關(guān)(P0.05),而與FVC不相關(guān)。女性FMI與肺通氣功能的指標(biāo)均不相關(guān)。除男性FEV1/FVC和FEF75%外,不同性別受試者FFMI對(duì)肺通氣功能指標(biāo)的預(yù)測(cè)作用大于FMI。FFMI對(duì)男性肺通氣功能預(yù)測(cè)作用大于女性。男性肺功能突增發(fā)生在12-15歲：FVC較前一個(gè)年齡段分別增加10.05%、20.41%、11.75%和9.00%,FEV1分別較前一年齡段增加11.38%、20.07%、12.01%和9.14%。女性肺功能突增發(fā)生在12、13和18歲：FVC較前一年齡段分別增加13.73%、9.07%和9.76%,FEV1較前一年齡段分別增加13.17%、11.12%和10.62%。在肺功能突增期,男女兒童青少年FFMI對(duì)肺功能的預(yù)測(cè)作用大于年齡的預(yù)測(cè)作用。綜上,男女不同性別中,反映骨骼肌力的FFM均與肺通氣功能呈正相關(guān),對(duì)男性肺通氣功能的預(yù)測(cè)作用大于女性。FM與男性肺通氣功能呈負(fù)相關(guān),而與女性肺通氣功能不相關(guān)。在肺功能突增期,身高和FFM的快速增長(zhǎng)可能是造成肺功能快速增長(zhǎng)的主要原因。
[Abstract]:[Objective] to investigate the expression of Bcl-2, Bax and NF-K B in cardiomyocyte apoptosis induced by hypoxia, and the protective effect of 17 beta estradiol (E2) on the hypoxic myocardial cells.
Methods]Sprague-Dawley rats (born 1-2D) myocardial cells were cultured, when the cells grow well when drug intervention and hypoxia. The cells were divided into four groups, respectively C1 (control group), C2 (simple dosing group), H1 (hypoxia group) and H2 (chemical hypoxia group) at C2, H2 by E2 24h, H1, H2 (5%CO2+95%N:) 12h hypoxia treatment, and unified treatment. MTT method was used to detect the protective effect of hypoxia on myocardial cell activity and the inhibitory effect of E2 on hypoxic myocardial cells and myocardial cells. Apoptosis was detected by Flow cytometry method was used to detect the Bcl-2 Western. The technology of Blot, the expression of Bax and NF-K B. The expression of Bel-2mRNA Bax and mRNA Real-Time level by PCR technology.
[results] the myocardial hypoxia decreased the cell viability, and inhibit myocardial cell growth, 108,10-7mol/LE2 can improve the myocardial cell activity, inhibition of reverse hypoxia on the growth of cardiac myocytes. Hypoxia increased myocardial cell apoptosis, myocardial cell Bax protein, Bax mRNA, increased expression of NF-K B protein Bcl-2 protein, decreased the expression of Bcl-2mRNA however, hypoxic myocardial cells by 10-7mol/L17 beta estradiol pretreatment compared with hypoxia group, myocardial cell Bax protein, Bax mRNA, decreased expression of NF- kappa B protein Bcl-2 protein, the expression of Bcl-2mRNA increased.
[Conclusion] hypoxia has a certain inhibitory effect on myocardial cell growth, but also promote the apoptosis of myocardial cells, and Bcl-2 protein and mRNA expression decreased, increased expression of Bax protein and mRNA expression of NF-K B protein increased.E2 can reverse the inhibitory effect of hypoxia on myocardial cells, this protective effect may reduce the expression of NF-K expression by B then the upregulation of Bcl-2mRNA, downregulation of Bax mRNA.
The purpose of this paper is to study fat children and adolescents weight (fat free mass, FFM), fat mass (fat mass, FM) and the relationship between pulmonary function, prevention of related diseases in children and adolescents, and to provide reference data for health management. 10-18 years old in Heilongjiang province were randomly selected from healthy children and adolescents (583 males, 1174 females 591), observation height, weight and waist to hip ratio (waist to hip ratio, WHR), and the FFM were detected in body composition measurement and pulmonary function FM and pulmonary function, and the independent sample t test, partial correlation and multiple stepwise regression analysis, FFM, FM and pulmonary ventilation function the results showed that the subjects of sex, age and body fat index (FFM index, FFMI) were positively correlated (P0.001). The male age and fat mass index (FM, index, FMI) was negatively correlated (P0.001), female age and FMI positive correlation (P0.001) of different sex. The subjects of FFMI and forced expiratory vital capacity (forced vital capacity, FVC), forced expiratory volume in one second (forced expiratory volume in one second, FEV1), peak expiratory flow (peak expiratory, flow, PEF), forced expiratory expiratory flow at 25% of vital capacity (forced expiratory flow at25%of forced vital capacity, FEF25%, and FEF50%) maximal midexpiratory flow (maximum mid-expiratory, flow, MMEF) were positively correlated (P0.05), and negatively correlated with FEV1/FVC (P0.01). Male FFMI was positive correlation with FEF75% (P0.05), FFMI and FEF75% are not related to women. Male FMI and FEV1, FEV1/FVC, PEF, FEF25%, FEF50%, FEF75% and MMEF were negatively correlated (P0.05), but not correlated with FVC. The female FMI and pulmonary function indexes were not correlated. In addition to the male FEV1/FVC and FEF75%, different genders predict FFMI on pulmonary function index greater than FMI.FFMI of male pulmonary function pre The action is more than female. Male pulmonary function surge occurred in 12-15 years: FVC compared with the previous ages were increased by 10.05%, 20.41%, 11.75% and 9% FEV1 respectively, compared with the previous age increased by 11.38%, 20.07%, 12.01% and 9.14%. in female pulmonary function surge occurred in 12,13 and FVC than in the previous 18 years: age some were increased by 13.73%, 9.07% and 9.76% FEV1, compared with the previous ages were increased by 13.17%, 11.12% and 10.62%. in lung function spurt, predict FFMI male and female children and adolescents on lung function than predict age. In conclusion, different gender, reflect the muscle FFM and pulmonary function were positively correlated and the prediction effect on male lung function than female.FM was negatively correlated with male pulmonary function, but not associated with pulmonary function in lung function in women. The rapid growth spurt, height and FFM may be caused by the rapid increase in lung function The main reason for long.

【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R363

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本文編號(hào)：1499231