發(fā)布時(shí)間：2018-02-05 00:56

  本文關(guān)鍵詞： miR-a 轉(zhuǎn)染 KGN細(xì)胞 FOXL 基因表達(dá)調(diào)控 細(xì)胞增殖　出處：《中國美容醫(yī)學(xué)》2016年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:研究外源性microRNA-130a在卵巢顆粒細(xì)胞KGN中過表達(dá)對(duì)FOXL2基因表達(dá)的影響,探索microRNA-130a對(duì)KGN細(xì)胞增殖的影響。方法:人工設(shè)計(jì)合成靶向FOXL2基因的microRNA-130a模擬物,脂質(zhì)體法將microRNA-130a模擬物轉(zhuǎn)染入KGN細(xì)胞中,Trizol法和RIPA蛋白裂解法分別獲取高純度的細(xì)胞總RNA和總蛋白,實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶聯(lián)反應(yīng)(FQ-PCR)檢測(cè)microRNA模擬物轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中FOXL2基因mRNA表達(dá)水平,Western Blot檢測(cè)FOXL2蛋白表達(dá)水平,四甲基偶氮唑鹽法(MTT)檢測(cè)microRNA-130a轉(zhuǎn)染后KGN細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果:成功轉(zhuǎn)染KGN細(xì)胞后,陰性對(duì)照組FOXL2基因mRNA和蛋白的表達(dá)水平與空白對(duì)照組相比無明顯的差異(P0.05),mi R-130a轉(zhuǎn)染組能顯著抑制FOXL2 mRNA和蛋白的表達(dá),與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。MTT法檢測(cè)各組KGN細(xì)胞的OD值及細(xì)胞增值率,microRNA-130a轉(zhuǎn)染后能明顯促進(jìn)KGN細(xì)胞的增殖,與與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:外源性的mi R-130a對(duì)FOXL2基因mRNA和蛋白表達(dá)有明顯的抑制作用,且能明顯促進(jìn)KGN細(xì)胞的增殖。
[Abstract]:Objective: to study the effect of exogenous microRNA-130a overexpression on FOXL2 gene expression in ovarian granulosa cell KGN and to explore the effect of microRNA-130a on the proliferation of KGN cells. Methods: microRNA-130a mimics targeting FOXL2 gene were designed and synthesized. MicroRNA-130a mimics were transfected into KGN cells by liposome method. The high purity total RNA and total protein were obtained by trizol and RIPA protein cleavage, respectively. The expression level of FOXL2 gene mRNA was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (FQ-PCR) and the expression of FOXL2 protein was detected by Western Blot after transfection of microRNA mimics. The proliferation of KGN cells after transfection of microRNA-130a was detected by MTT. Results: after transfection of KGN cells, KGN cells were transfected successfully. The expression level of FOXL2 gene mRNA and protein in the negative control group was not significantly different from that in the blank control group. The expression of FOXL2 mRNA and protein was significantly inhibited in the transfected group. Compared with the blank control group and the negative control group, there were significant differences between the two groups. The OD value of KGN cells and the cell proliferation rate were detected by P0.05. MTT assay. MicroRNA-130a transfection could significantly promote the proliferation of KGN cells. Conclusion: exogenous mi R-130a can significantly inhibit the expression of FOXL2 gene mRNA and protein, and promote the proliferation of KGN cells.
【作者單位】： 濰坊醫(yī)學(xué)院整形外科研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81272122 81301647 81471880) 山東省科技攻關(guān)計(jì)劃(JK67) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2013HQ025)
【分類號(hào)】：Q78;R329.2
【正文快照】： FOXL2是叉頭框轉(zhuǎn)錄因子家族成員之一,主要表達(dá)在眼周、卵巢和垂體細(xì)胞中,該基因最早由Crisponi作為小瞼裂綜合征(BPES,Blepharophimosis Syndrome,MIM:110100)及卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)的候選基因被克隆定位[1]。小瞼裂綜合征是一種常染色體顯性遺傳病[2],臨

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本文編號(hào)：1491654