本文關(guān)鍵詞： 心流出道 ISL-1陽性細(xì)胞 第二生心區(qū) 神經(jīng)嵴 免疫熒光　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景:原始心管由三胚層胚盤的生心中胚層發(fā)育而來,僅是左心室的原基。流出道、右心室等結(jié)構(gòu)則是由位于原始心管頭端和背側(cè)的第二生心區(qū)間充質(zhì)不斷向心管動脈端添加心肌細(xì)胞而形成。第二生心區(qū)心肌前體細(xì)胞標(biāo)記蛋白轉(zhuǎn)錄因子ISL-1是調(diào)節(jié)第二生心區(qū)發(fā)育的重要節(jié)點(diǎn)蛋白,調(diào)控第二生心區(qū)心肌前體細(xì)胞的增生及向心肌細(xì)胞的分化。ISL-1基因敲除,胚胎心管流出道和右心室缺失,胚胎在發(fā)育9d～10d死亡。在多種信號系統(tǒng)和轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)節(jié)下,胚胎耳板與第三體節(jié)之間的神經(jīng)嵴細(xì)胞沿3、4、6對鰓弓向心管流出道遷移,與第二生心區(qū)心肌前體細(xì)胞相互作用,參與心管流出道的正常發(fā)育和分隔。去除神經(jīng)嵴,第二生心區(qū)向心管動脈端添加心肌細(xì)胞的功能降低,產(chǎn)生與第二生心區(qū)發(fā)育異常相似或相同的流出道發(fā)育畸形。對正常小鼠胚胎不同發(fā)育時期第二生心區(qū)的時空分布、ISL-1陽性細(xì)胞的分化潛能以及神經(jīng)嵴細(xì)胞在遷移過程中與ISL-1陽性細(xì)胞的時空分布關(guān)系所知甚少。本實(shí)驗(yàn)觀察了遷移中的細(xì)胞視黃酸結(jié)合蛋白1(cellular retinoic acid binding protein 1, CRABP1)陽性神經(jīng)嵴細(xì)胞和第二生心區(qū)ISL-1陽性心肌前體細(xì)胞在正常小鼠胚胎心流出道發(fā)育過程中的時空分布特點(diǎn),為進(jìn)一步研究兩類細(xì)胞在流出道發(fā)育過程中的相互作用及因流出道發(fā)育異常而導(dǎo)致的先心病發(fā)生機(jī)制提供可靠的形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究目的:探討遷移中的CRABP1陽性神經(jīng)嵴細(xì)胞、ISL-1陽性心肌前體細(xì)胞與小鼠胚胎心流出道發(fā)育的關(guān)系。 研究方法:胚齡7.5d～13d小鼠胚胎心臟連續(xù)石蠟切片,選用抗α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)抗體,抗心肌肌球蛋白重鏈(MHC)抗體,抗轉(zhuǎn)錄因子ISL-1抗體,抗CRABP1抗體和抗磷酸化組蛋白H3(PHH3)抗體,進(jìn)行免疫組織化學(xué)或免疫熒光染色。 研究結(jié)果:胚齡7.5d,部分中胚層細(xì)胞可見轉(zhuǎn)錄因子ISL-1和神經(jīng)嵴細(xì)胞標(biāo)記蛋白CRABP1微弱表達(dá),而心肌分化特異性蛋白質(zhì)α-SMA和MHC表達(dá)為陰性。胚齡8.5d,ISL-1陽性心肌前體細(xì)胞出現(xiàn)在心背系膜,原始咽兩側(cè)和心包腔背側(cè)壁間充質(zhì)。胚齡9d～10d,ISL-1陽性細(xì)胞相繼在頭面部間充質(zhì)及鰓弓核心間充質(zhì)中形成。ISL-1陽性間充質(zhì)形成心管進(jìn)一步發(fā)育的第二生心區(qū),向心管流出道遠(yuǎn)側(cè)端添加心肌細(xì)胞。胚齡11d～13d,ISL-1陽性細(xì)胞在咽前方聚集,形成特征性錐體形結(jié)構(gòu),并向升主動脈、肺動脈干及主肺動脈隔延伸。胚齡9d前,神經(jīng)嵴細(xì)胞散在分布于ISL-1陽性細(xì)胞之間,流出道遠(yuǎn)側(cè)端可見少量CRABP1和ISL-1雙陽性細(xì)胞。胚齡10d,CRABP1陽性神經(jīng)嵴細(xì)胞分布在ISL-1陽性鰓弓核心間充質(zhì)周圍。隨發(fā)育,弓動脈等處的神經(jīng)嵴細(xì)胞逐漸失去CRABP1表達(dá),開始表達(dá)α-SMA。 研究結(jié)論:第二生心區(qū)是動態(tài)結(jié)構(gòu),頭面部中胚層、心包腔背側(cè)臟壁中胚層、鰓弓核心間充質(zhì)以及咽周圍的間充質(zhì)組織,在不同時空階段內(nèi)發(fā)育為ISL-1陽性第二生心區(qū),向心管動脈端添加心肌細(xì)胞。胚齡11d～13d,ISL-1陽性細(xì)胞開始向平滑肌方向分化,參與心包腔內(nèi)升主動脈、肺動脈干和主肺動脈隔的發(fā)育。在發(fā)育過程中,CRABP1陽性神經(jīng)嵴細(xì)胞和ISL-1陽性細(xì)胞相互配合,在鰓弓形成獨(dú)特分布模式,保證心正常發(fā)育。胚齡11d后,神經(jīng)嵴細(xì)胞已遷移到其預(yù)定部位,并向特定細(xì)胞方向分化。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R321

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本文編號：1479831