發(fā)布時(shí)間：2018-01-23 08:23

  本文關(guān)鍵詞： RNA 小分子干擾 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 成纖維細(xì)胞 組織工程 組織構(gòu)建 Stealth siRNA 肺成纖維細(xì)胞 抑制　出處：《中國(guó)組織工程研究》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：背景:RT-PCR技術(shù)是將RNA的反轉(zhuǎn)錄和cD NA的聚合酶鏈反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù)。常用于檢測(cè)細(xì)胞組織中基因表達(dá)水平、細(xì)胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cD NA序列等。目的:運(yùn)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)Stealth siRNA對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的抑制作用。方法:實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、空轉(zhuǎn)染組、stealth_48組、stealth_166組和stealth_594組。針對(duì)BALB/c小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1基因組,選擇不同位點(diǎn)設(shè)計(jì)3套siRNA基因序列,轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的小鼠肺成纖維細(xì)胞,RT-PCR法檢測(cè)其對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1和下游結(jié)締組織生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響。結(jié)果與結(jié)論:(1)RT-PCR結(jié)果顯示3種Stealth siRNA對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1表達(dá)在不同時(shí)間有不同程度的抑制作用,以Stealth_166效果更為明顯;抑制效果與轉(zhuǎn)染時(shí)間長(zhǎng)短相關(guān),48 h后就可檢測(cè)出明顯抑制,72 h達(dá)到最高峰,96 h后開始減弱;(2)結(jié)果說明,RT-PCR技術(shù)可用于特異性Stealth siRNA抑制轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1在小鼠肺成纖維細(xì)胞的表達(dá)效果的檢測(cè)。
[Abstract]:Background: RT-PCR is a combination of reverse transcription of RNA and polymerase chain reaction of cdna. It is often used to detect gene expression level in cell tissues. The content of RNA virus in cells and the cdna sequence of specific genes were cloned directly. Objective: to detect Stealth by RT-PCR technique. The inhibitory effect of siRNA on transforming growth factor 尾 1. Methods: the experiment was divided into blank control group. The genome of transforming growth factor 尾 1 (TGF- 尾 1) in BALB/c mice was detected in the empty transfection group and the stealth166 group and stealth_594 group. Three sets of siRNA gene sequences were designed at different sites and transfected into mouse lung fibroblasts in vitro. The effect of TGF- 尾 1 and downstream connective tissue growth factor (TGF- 尾 1) on the expression of TGF- 尾 1 and connective tissue growth factor (TGF- 尾 1) was detected by RT-PCR. RT-PCR results showed that the expression of transforming growth factor 尾 1 was inhibited by three kinds of Stealth siRNA at different times. The effect of Stealth_166 was more obvious. The inhibitory effect was correlated with the length of transfection time. After 48 h, it was found that the inhibitory effect was obviously inhibited at 72 h and reached the peak at 96 h, then it began to weaken. The results indicated that RT-PCR could be used to detect the expression of transforming growth factor 尾 1 in mouse lung fibroblasts by specific Stealth siRNA.
【作者單位】： 解放軍第184醫(yī)院;
【基金】：南京軍區(qū)醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金資助項(xiàng)目(07M057)~~
【分類號(hào)】：R-33
【正文快照】： 引用本文:余維濤,汪東劍,艾凌艷.RT-PCR聯(lián)合凝膠電泳成像技術(shù)檢測(cè)體外培養(yǎng)小鼠肺成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的表達(dá)[J].中國(guó)組織工程研究,2017,21(8):1268-1272. 文章快速閱讀:Stealth si RNA對(duì)小鼠肺成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 m RNA表達(dá)的影響評(píng)價(jià):Stealth引物設(shè)計(jì)si RNA對(duì)

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本文編號(hào)：1457172