本文關(guān)鍵詞： 親和力轉(zhuǎn)移 FSHR FSH- c Ab BCII 納米抗體　出處：《新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)》2017年07期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：【目的】評價駱駝來源的納米抗體c Ab BCII10作為非抗體親和力轉(zhuǎn)移骨架的潛能,采用親和力轉(zhuǎn)移的方法,將FSHR結(jié)合肽段移植到c Ab BCII10的抗原結(jié)合區(qū)以快速獲得抗FSHR抗體。【方法】將FSHR結(jié)合肽FSH33-53編碼序列,分別移植入納米抗體c Ab BCII10的CDR1和CDR3區(qū)域中,命名為VHH-h FSH1和VHH-h FSH3。采用DNA合成方法獲得VHH-h FSH1,VHH-h FSH3和c Ab BCII10的DNA編碼序列,把這些DNA序列克隆到p ET22b載體上,將其轉(zhuǎn)化到BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞中。經(jīng)過誘導(dǎo)和表達(dá)再用Ni離子親和純化獲得純的單域抗體。采取ELISA方法鑒定純化的c Ab BCII10,VHH-h FSH1、VHH-h FSH3與FSHR的結(jié)合能力及特異性�！窘Y(jié)果】通過框架移植獲得的VHH-h FSH1,VHH-h FSH3和c Ab BCII10蛋白均在細(xì)菌胞間質(zhì)可溶性表達(dá)。將FSHR結(jié)合肽FSH33-53移植到c Ab BCII10的CDR3獲得的VHH-h FSH3具有特異結(jié)合FSHR活性�！窘Y(jié)論】c Ab BCII10可以作為移植的框架,FSH和FSHR結(jié)合肽段移植到c Ab BCII10的CDR1和CDR3區(qū)可以獲得親和性較高的抗FSHR抗體。
[Abstract]:[objective] to evaluate the potential of camel-derived nano-antibody BCII10 as the skeleton of non-antibody affinity transfer, and to use affinity transfer method. The FSHR binding peptide fragment was transplanted into the antigenic binding region of BCII10 in order to obtain anti-#en2# antibody quickly. [methods] the coding sequence of FSHR binding peptide FSH33-53 was obtained. It was transplanted into the CDR1 and CDR3 regions of BCII10. Named VHH-h FSH1 and VHH-h FSH3. VHH-h FSH1 was obtained by DNA synthesis method. The DNA coding sequences of VHH-h FSH3 and c-Ab BCII10 were cloned into p ET22b vector. Convert it to BL21 DE3). The purified single domain antibody was obtained by elicitation and expression and then purified by Ni ion affinity. The purified BCII10 was identified by ELISA method. The binding ability and specificity of VHH-h FSH1VHH-h FSH3 to FSHR. [results] VHH-h FSH1 obtained by frame transplantation. VHH-h FSH3 and c Ab BCII10 protein were expressed in the interstitial cells of bacteria. The FSHR binding peptide FSH33-53 was transplanted into c Ab. VHH-h FSH3 obtained from CDR3 of BCII10 has specific binding FSHR activity. [conclusion] c Ab BCII10 can be used as a framework for transplantation. FSH and FSHR binding peptides were transplanted into the CDR1 and CDR3 regions of c Ab BCII10 to obtain anti FSHR antibodies with high affinity.
【作者單位】： 新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院/新疆生物資源基因工程省部共建重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“駱駝單域抗體框架區(qū)作為小分子抗體通用移植骨架的研究”(31370933);國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“基于高通量測序?qū)︸橊効贵w庫的多樣性分析和數(shù)據(jù)挖掘及新納米抗體的發(fā)現(xiàn)”(31570935)~~
【分類號】：R392
【正文快照】： 0引言【研究意義】卵泡刺激素受體(follicle-stimu-lating hormone receptor,FSHR)是一種跨膜糖蛋白,屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族中糖蛋白亞家族成員。近期發(fā)現(xiàn)FSHR普遍表達(dá)于各種進(jìn)程的腫瘤新生血管內(nèi)皮的細(xì)胞表面。表明了FSHR是一種合適的腫瘤標(biāo)志物和抗體作用的良好靶點(diǎn)�！厩�

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本文編號：1456558